一例羊傳染性胸膜肺炎的診斷與分析

熊 杰，張昕彤，蔣成偉，胡生富，蒲楊柳，梁易曉

（1.攀枝花市動物疫病預防控制中心，四川 攀枝花 617000；2.攀枝花市動物衛生監督所）

羊傳染性胸膜肺炎，又稱羊支原體性肺炎（MPSG），是由多種支原體引起的綿羊和山羊的一種高度接觸性傳染病，以高熱、咳嗽、纖維素性胸膜肺炎為主要特征，典型病理特征是胸腔有大量淡黃色漿液纖維素性滲出物；胸膜充血；肺胸膜與肋胸膜粘連；心包積液；肺臟肝變。筆者就2020 年5 月攀枝花某散養戶山羊發生羊傳染性胸膜肺炎的發病情況、臨床癥狀、病理變化、實驗室診斷，提出思考和分析。

1 發病情況及臨床癥狀

攀枝花某農戶，養殖本地山羊32只，2020年5月26日開始發病，出現眼結膜蒼白、發紺，精神沉郁，死前口吐泡沫、低嚎和腹部膨脹等癥狀，到27日已死亡7只，死亡率達21.9%。

2 病理變化

對死亡24 h內的山羊進行解剖，發現心臟質地軟化，肺與胸壁，肝與腹壁少量粘連，肺臟肝變、真胃出血，胃黏膜壞死脫落，膽囊腫大積液。

經過對臨床癥狀和病理變化分析，初步懷疑為羊傳染性胸膜肺炎感染，現場采集心、肝、肺、腸系膜淋巴結至實驗室進行熒光定量PCR檢測。

3 實驗室診斷

3.1 樣品處理及核酸提取

將現場采集的心、肝、肺等組織用組織研磨儀（寶予德，EasyextractS）進行組織勻漿后，8 000 rpm離心2 min取上清液，按照DNA 提取試劑盒（離心柱提取法）提取組織DNA。

3.2 熒光定量PCR

將提取的DNA按照無錫優聯生物科技有限公司羊傳染性胸膜肺炎（MPSG）核酸檢測試劑盒（熒光-PCR法）（生產批號：20040101）說明書進行羊傳染性胸膜肺炎（MPSG）支原體檢測。

4 結果

羊傳染性胸膜肺炎（MPSG）支原體檢測結果：陽性對照Ct 值≤32 并出現特異性擴增曲線，陰性對照CT 值＞38或無CT值，試驗結果成立。所有被檢樣品CT值≤35并出現特異性擴增曲線，表明所有樣品羊傳染性胸膜肺炎（MPSG）支原體陽性。

5 討論

山羊支原體山羊肺炎亞種（Mccp）、絲狀支原體山羊亞種（Mmc）和綿羊肺炎支原體（Mo）是引起羊傳染性胸膜肺炎的主要病原體，其中Mccp 和Mmc 屬于絲狀支原體簇，均感染山羊，Mo 感染山羊和綿羊。三種致病支原體中，Mccp 引起的山羊傳染性胸膜肺炎（CCPP）危害最大，發病率高達100%，病死率60%～70%，世界動物衛生組織（OIE）將其列入必須上報的動物疫病目錄，我國為將其與其他支原體引起的山羊肺炎區別，將其命名為山羊接觸傳染性胸膜肺炎，并制定了國家標準。Mccp、Mmc和Mo的正確及時診斷是羊傳染性胸膜肺炎防控的重點，其中Mccp 的實驗室診斷則最為困難。病原分離與鑒定是鑒別診斷支原體的黃金標準，但是由于Mccp 體外生長難度大并且容易受到其他支原體污染，此方法多適用于科研院所，較少應用于基層獸醫實驗室。血清學診斷和分子診斷技術是目前常用的方法，雖然Mccp與Mmc同屬于絲狀支原體簇成員，存在血清學交叉反應，但隨著診斷技術的改進，有研究人員開發出了特異性強、敏感性高、重復性好的血清學診斷方法。相比于血清學診斷方法，基于基因或者DNA 的分子診斷方法具有更高的特異性和敏感性，目前常用的分子診斷方法有PCR、熒光定量PCR、環介導等溫擴增技術（LAMP）和重組酶聚合酶擴增（RPA）。

羊傳染性胸膜肺炎在我國長期存在，20世紀20年代，我國新疆伊犁地區最早發現此病，隨后在新疆、甘肅、西藏、四川、內蒙古等地流行，給我國養羊業帶來了重大損失。攀枝花地處山區，山羊多采取放養的養殖模式，疫苗免疫率低，發病風險高，該次試驗采用熒光定量PCR方法進一步驗證了羊傳染性胸膜肺炎在攀枝花流行，為下一步攀枝花市羊傳染性胸膜肺炎的流行病學調查與支原體分型鑒定奠定了基礎。