趙苑池 莫秋榮 易華宇 梁云彩 宋柳萍

摘要:目的探究非小細胞肺癌(NSCLC)組織中趨化因子受體-4(CXCR4)、血管內皮生長因子(VEGF)的表達及意義。方法回顧性分析2019.03~2020.02本院70例NSCLC組織標本及20例正常肺組織標本,均采用免疫組化SP法檢測CXCR4、VEGF的陽性表達,觀察兩種組織、不同TNM分期NSCLC組織中CXCR4、VEGF的表達情況,對比高表達率。結果NSCLC組織中CXCR4、VEGF的高表達率分別為42.86%、67.14%,均高于正常肺組織的5.00%、25.00%(P<0.05);Ⅲ+Ⅳ期NSCLC組織中CXCR4、VEGF的高表達率分別為58.33%、80.56%,均高于Ⅰ+Ⅱ期的26.47%、52.94%(P<0.05)。結論CXCR4、VEGF在NSCLC組織中的表達水平高于正常肺組織,且與NSCLC患者的臨床分期存在一定的聯系。
關鍵詞:非小細胞肺癌;CXC趨化因子受體-4;血管內皮生長因子;TNM分期
【中圖分類號】R734.2 ?【文獻標識碼】A ?【文章編號】1673-9026(2021)14--01
非小細胞肺癌(NSCLC)是主要的肺癌類型,多數患者就診時已處于中晚期階段,所有肺癌患者的5年生存率僅達到19.7%,侵襲和轉移是臨床治療失敗的重要因素[1]。目前認為,趨化因子受體-4(CXCR4)參與腫瘤器官的特異性轉移,血管內皮生長因子(VEGF)在腫瘤的侵襲、轉移中發揮著重要作用。因此,了解NSCLC組織中上述指標的表達,對于疾病的早期診斷、治療及預后均有著積極意義。為進一步深入臨床對NSCLC的深入認識,本研究對NSCLC與正常肺組織、不同TNM分期NSCLC組織中CXCR4、VEGF的表達情況進行觀察,分析如下。
1 資料與方法
1.1一般資料
回顧性分析以免疫組化SP法檢測CXCR4、VEGF陽性表達的70例NSCLC組織標本及20例正常肺組織標本,對應的研究對象分別為NSCLC患者及肺部良性病變者,均選自2019.03~2020.02期間。納入標準:NSCLC患者及肺部良性病變者均經病理檢查確診;既往無惡性腫瘤病史;未接受過放療、化療;無其他肺部感染性疾病。排除標準:患免疫系統疾病;行姑息性切除者;術中未行淋巴結清掃者。NSCLC患者:男46例,女24例;年齡41~75歲,平均(60.23±6.59)歲;有吸煙史32例;TNM分期:Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期分別為9、25、29、7例。肺部良性病變者:男12例,女8例;年齡41~75歲,平均(60.14±6.52)歲;有吸煙史8例。兩組性別、年齡、吸煙史對比無差異(P>0.05)。
1.2 方法
使用4%中性甲醛固定液對所有組織標本進行固定(6~48h),脫水包埋后石蠟切片,厚度3μm。采用免疫組化SP法進行檢測:切片65℃烤片30min以上;環保透明劑連續脫蠟10min×4;梯度乙醇洗脫環保透明劑5min×4,將切片在流水中沖洗5min;使用已稀釋成工作液的EDTA抗原修復液在電磁爐(2100W)上進行高壓抗原修復,噴氣后1.5~2min停止加熱;待高壓鍋自然冷卻10min后,用流水沖洗高壓鍋外壁加速冷卻取出切片;切片取出后在流水下沖洗1~3min;滅活內源性過氧化氫阻斷10min;PBS緩沖液浸洗3min×4;使用免疫組化筆標記切片組織范圍;滴加一抗CXCR4(abcam公司,稀釋濃度為1:150)、VEGF(福州邁新試劑),室溫孵育3h;PBS緩沖液浸洗切片3min×4;滴加二抗并在室溫下孵育15min;PBS緩沖液浸洗切片3min×4次;DAB顯色3~10min;流水浸洗1~5min;蘇木素染色10~30s;分化5s;返藍5s,梯度乙醇脫水透明后封片。實驗過程中設置陰性對照,使用PBS緩沖液代替一抗。嚴格按照試劑盒相關操作執行。
1.3觀察指標
于高倍視野下進行觀察,參照Andre評分標準,隨機選取5個高倍視野(×400),胞漿內觀察到一致的淡黃色至棕褐色顆粒為陽性,計算染色腫瘤細胞百分率。根據半定量方法,結合染色陽性細胞百分率及染色強度進行綜合評定,評定標準[2]:①陽性細胞:0分:陽性細胞占0%~5%;1分:陽性細胞占6%~30%;2分:陽性細胞占31%~60%;3分:陽性細胞占61%~100%;②染色強度:0分:無著色;1分:淡黃色;2分:棕色;3分:棕褐色。取上述兩項評分之和,總分0~3分:低表達;總分4~6分:高表達。①觀察NSCLC組織及正常肺組織中CXCR4、VEGF的表達情況;②觀察不同TNM分期NSCLC組織中CXCR4、VEGF的表達情況。
1.4 統計學處理
以SPSS21.0統計軟件進行分析,計數資料以%表示,采用X2檢驗;計量資料以()表示,采用t檢驗,P<0.05代表差異有統計學意義。
2 結果
2.1 兩種組織中CXCR4、VEGF的表達情況
NSCLC組織中CXCR4、VEGF的高表達率分別為42.86%、67.14%,與正常肺組織中的5.00%、25.00%對比均有統計學差異(P<0.05),見表1。
2.2 不同TNM分期NSCLC組織中CXCR4、VEGF的表達情況
Ⅲ+Ⅳ期NSCLC組織中CXCR4、VEGF的高表達率分別為58.33%、80.56%,與Ⅰ+Ⅱ期的26.47%、52.94%對比均有統計學差異(P<0.05),見表2。
3 討論
近年來,靶向藥物的應用為惡性腫瘤患者提供一種新的治療途徑,在改善預后方面取得良好的效果,故趨化因子成為臨床研究的熱點。由于不同臨床分期,NSCLC的治療方案存在差異,而對于早期患者,其相對而言可采取手術治療,在促進預后方面有一定的積極意義。鑒于此,本研究主要從NSCLC組織與正常肺組織、NSCLC組織不同TNM分期兩個方面進行比較,為NSCLC的診斷及治療提供參考。
CXCR4是G蛋白耦聯的7次跨膜蛋白受體,可與配體基質細胞衍生因子(SDF-1)相結合,促進靶細胞支架的重構,CXCR4/SDF-1反應軸可能在胚胎發育、骨髓造血、細胞遷移、器官發育等病理生理過程中發揮著至關重要的作用[3]。高磊[4]等表示,CXCR4在NSCLC中呈高表達狀態;是否存在淋巴結轉移、不同TNM分期NSCLC組織中的CXCR4陽性率均存在顯著差異,證實該蛋白與NSCLC的發生、發展以及轉移有著密切聯系。本研究結果顯示,NSCLC組織中CXCR4的高表達率為42.86%,高于正常肺組織的5.00%;Ⅲ+Ⅳ期NSCLC組織中CXCR4的高表達率為58.33%,高于Ⅰ+Ⅱ期的26.47%,與上述研究相似,說明CXCR4在NSCLC組織中呈高表達,且與腫瘤的發展存在密切聯系。VEGF是一種血管生成促進因子,可促進內皮細胞增殖,誘導腫瘤血管生成,在腫瘤細胞的浸潤、轉移中發揮著重要作用,目前以VEGF為靶點的抗血管生成藥貝伐珠單抗用于晚期NSCLC的治療[5]。本研究發現NSCLC組織中VEGF的高表達率為67.14%,高于正常肺組織的25.00%;Ⅲ+Ⅳ期NSCLC組織中VEGF的高表達率為80.56%,高于Ⅰ+Ⅱ期的52.94%,提示VEGF在腫瘤的發生、發展中有著重要意義。
綜上所述,CXCR4、VEGF在NSCLC組織中呈高表達狀態,在腫瘤的發生、發展中有著一定的促進作用。
參考文獻:
[1]姚益,曾小飛,李衛,等.非小細胞肺癌中GPR120、VEGF的表達及臨床意義[J].臨床與實驗病理學雜志,2020,36(6):671-676.
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[3]陳曉東,任開明,段瓊玉,等.CCR7蛋白和 CXCR4蛋白表達水平與非小細胞肺癌患者的預后及相關性研究[J].河北醫藥,2016,38(3):331-334.
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[5]王晨亮,彭麗姿,周兵.非小細胞肺癌組織Smac、TLR、VEGF及其受體的表達變化研究[J].中國醫學創新,2021,18(25):1-4.
課題名稱:崇左市科技計劃項目合同(崇科攻2019020)