Rac1蛋白在結直腸癌中表達及其生物學行為的Meta 分析

徐 娟 謝敏娟▲ 徐石張

1.宜春學院醫學院，江西宜春 336000；2.宜春學院附屬醫院腎臟內科，江西宜春 336000

Rac1蛋白來自RhoGTP 酶家族，參與調控細胞極性、囊泡的轉運等過程，并且在細胞增殖、基因轉錄中起重要作用[1]。Rac1 是一個原癌基因，近年來被發現與多種腫瘤的發生存在關聯，如胃癌、乳腺癌、卵巢癌、白血病等[2-3]。結直腸癌（colorectal cancer，CRC）是一種常見的惡性腫瘤，雖然近年來其預后有所改善，但癌細胞轉移仍是導致CRC 患者死亡的重要原因[4]。CRC 發病機制仍未明確，深入探討Rac1蛋白和CRC侵襲與轉移機制的關系具有重要意義。本研究在已發表的相關文獻基礎上，利用薈萃分析的方法，探討Rac1蛋白在CRC 中的表達及其生物學行為。

1 資料與方法

1.1 檢索策略

利用Rac1蛋白、結直腸癌、Rac1、colorectal cancer作為主題詞、標題詞，分別檢索PubMed、Google Scholar、萬方數據庫、中國知網（CNKI）、中國生物醫學文獻數據（CBM）等。以PubMed 數據庫為例，英文檢索式：“Rac1”（MeSH）OR“colorectal cancer”（MeSH）；以萬方數據庫為例，中文檢索式：“Rac1”AND“結直腸癌”。限制檢索時間均為1990年1月～2019年11月。并同時檢索納入研究的相關參考文獻。

1.2 納入及排除標準

納入標準：①研究內容包含Rac1蛋白和CRC 關系的對照研究；②疾病診斷CRC 明確；③研究方法采用免疫組織化學方法檢測Rac1蛋白。排除標準：①重復數據的文獻；②綜述與評論。

1.3 數據提取

設計合適的數據填報表，兩位研究員分別提取納入文獻中的相關資料，如：第一作者、發表年份、癌細胞（Rac1 陽性數與總數）、正常細胞（Rac1 陽性數與總數）、淋巴結未轉移標本數、淋巴結轉移標本數等。如結果存在差異時，經兩位研究員討論決定。

1.4 質量評價

納入文獻的質量采用Newcastle-Ottawa scale 量表進行評價，其評價內容包含：病例組與對照組選擇方法（病例的定義與診斷、病理的代表性、對照的選擇、對照的定義）、病例組與對照組的可比性、接觸暴露評估方法。

1.5 統計學方法

利用Review Manager 5.3 軟件對納入的研究進行薈萃分析，其中分類變量采用相對危險度（OR）合并總體效應，并對每個合并效應量行異質性檢驗。若P＞0.10、I2≤50%，說明文獻同質性良好，采用固定效應模型合并效應量；若P≤0.10、I2＞50%，則采用隨機效應模型。以P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 文獻檢索結果及納入文獻特征

依照檢索策略進行檢索時，初步獲得68篇文獻，通過閱讀標題與摘要后排除46篇，對其余22篇文獻進行精讀，依照納入與排除標準，最終剩余納入本次研究的6篇文獻[5-10]（圖1）。6項研究的發表時間為2007～2018年，其中1篇文獻[5]中缺少癌旁正常標本數據，因此總共包含研究對象1011例，一般情況與資料見表1。

圖1 文獻篩選流程及結果

2.2 Rac1蛋白在CRC 中的表達

2.2.1 Rac1蛋白與CRC 的關系

5項研究[6-10]中包含CRC 組織與癌旁正常組織的Rac1蛋白表達數據，對組織Rac1表達率進行薈萃分析，結果具有明顯異質性（P＜0.000 01，I2=89%），采用隨機效應模型合并效應量，結果顯示，CRC組織中Rac1蛋白表達率高于癌旁正常組織，差異有統計學意義（OR=79.97，95%CI 4.65～1374.11，P=0.003）（圖2）。

表1 納入研究的基本特征（n/N）

圖2 Rac1蛋白與CRC 關系的薈萃分析

2.2.2 Rac1蛋白與結直腸癌TNM分期的關系

6項文獻[5-10]中均包含疾病診斷的國際TNM分期，以TNM Ⅲ、Ⅳ期與TNMⅠ、Ⅱ期癌標本為研究對象，對兩類Rac1蛋白表達率進行薈萃分析，總體效應具有異質性（P＜0.0001，I2=82%），采用隨機效應模型合并效應量，結果顯示，Ⅰ、Ⅱ期CRC 標本中Rac1蛋白表達率低于Ⅲ、Ⅳ期癌標本，差異有統計學意義（OR=0.26，95%CI 0.10～0.67，P=0.005）（圖3）。

圖3 Rac1蛋白與TNM 關系的薈萃分析

2.2.3 Rac1蛋白與癌組織分化程度的關系

對不同分化程度癌標本的Rac1蛋白表達率行薈萃分析[6-10]，總體效應無明顯異質性（P=0.59，I2=0%），采用固定效應模型，結果顯示，低分化癌標本中Rac1蛋白表達率高于中、高分化標本，差異有統計學意義（OR=2.51，95%CI 1.55～4.06，P=0.0002）（圖4）。

圖4 Rac1蛋白與癌組織分化程度的薈萃分析

2.2.4 Rac1蛋白與CRC 浸潤轉移的關系

2.2.4.1 Rac1蛋白與淋巴結轉移的關系 將CRC 標本分為無淋巴結轉移與淋巴結轉移[5-10]，并對兩類Rac1蛋白表達率行異質性檢驗（P=0.03，I2=59%），有統計學異質性，采用隨機效應模型合并效應量，結果顯示，伴有淋巴結轉移的癌組織Rac1蛋白表達率高于無淋巴結轉移，差異有統計學意義（OR=2.56，95%CI 1.36～4.82，P=0.004）（圖5）。

圖5 Rac1蛋白與淋巴結轉移關系的薈萃分析

2.2.4.2 Rac1蛋白與遠處轉移的關系 對伴有遠處轉移的癌組織Rac1蛋白表達率行薈萃分析[5-6，8]，總體效應無統計學異質性（P=0.58，I2=0%），采用固定效應模型，結果顯示，伴有遠處轉移的癌組織Rac1蛋白表達率高于無遠處轉移，差異有統計學意義（OR=11.64，95%CI 5.71～23.70，P＜0.000 01）（圖6）。

圖6 Rac1蛋白與遠處轉移關系的薈萃分析

3 討論

Rac1蛋白在腫瘤中高度表達，而在正常組織中低表達或不表達，并且表達程度與腫瘤的分化程度、轉移等生物學特征密切相關[11-14]。在此次薈萃分析中，結果與先前大部分研究相似[7-10]，證實CRC 組織中Rac1蛋白表達率明顯增加，但薈萃結果存在明顯異質性，可能與疾病病程、疾病控制情況、檢測方法等不同有關，結論需要謹慎表述。5項研究[6-10]中涉及癌旁正常組織的Rac1蛋白表達檢測，但僅有1項研究發現癌旁正常組織伴有Rac1蛋白表達。將此研究與其余文獻對比發現，該研究者的免疫組織化學結果判斷方法與其余研究者存在部分不同，從而導致了結果的差異。因此，在將來需要更大規模、多中心的研究，同時研究者的檢測方法需要規范統一。

Rac1 調節腫瘤生物學行為的機制仍未完全明確，有學者考慮與多重因素有關，如Rac1 調節干擾素、CDC42 等因子表達促進腫瘤血管的形成，促進腫瘤細胞轉移[15-16]；刺激肌動蛋白單體的成核作用，加快細胞移動；活化核轉錄因子Snail 誘導上皮間質轉化，促進腫瘤侵襲的轉移[17-19]。Rac1 的活化在大腸癌遷移侵襲中起重要作用，活性程度高的癌組織細胞遷移與侵襲能力顯著高于對照組[20]，而在本次Meta 分析中，結果顯示，Rac1蛋白在低分化與伴有遠處轉移組的CRC 中高度表達，且分別與中高分化、無遠處轉移比較，差異有統計學意義（P＜0.05），總體效應值無統計學異質性；Rac1蛋白在伴有淋巴結轉移與TNM Ⅲ、Ⅳ期中高度表達，但考慮結果存在異質性，是否存在必然聯系，需增加樣本數量證實。

綜上所述，近年來，Rac1蛋白表達與CRC 的研究獲得了較大進展，本次研究也證實Rac1蛋白表達與CRC 的發生發展及其生物學行為密切相關，同時為臨床將來探討CRC 的發病機制和治療措施提供了新的思路。