獾子油對(duì)腺嘌呤致小鼠腎臟損傷的保護(hù)作用

劉美琦 鄒麗娟 白琳昊 王思鶴 李銘銘 于淼 楊詩(shī)晗 張環(huán)宇 何曉燕

（吉林省通化師范學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院 134002）

獾子油是由獾的皮下脂肪熬制而成的淡黃色、氣辛涼的脂油。目前獾子油主要用于治療痔瘡、燒燙傷、凍傷及中氣不足等癥[1]，近兩年有學(xué)者研究出獾子油對(duì)治療胃潰瘍及肝損傷有一定的作用，腎臟功能受損可因?yàn)E用藥物、外傷、不良的生活習(xí)慣和飲食習(xí)慣等多種因素引起，其中藥物性腎臟損傷較為常見(jiàn)，目前，國(guó)內(nèi)外治療腎臟功能損傷的主要手段是透析和腎臟移植等方法，但由于昂貴的治療費(fèi)用，透析和腎臟移植的方法尚未得到廣泛應(yīng)用，所以非透析治療法倍受醫(yī)學(xué)專家所重視，但目前治療腎臟損傷仍缺少有效又對(duì)身體影響較小的方法。本文研究獾子油對(duì)腺嘌呤致小鼠腎臟損傷的保護(hù)作用，以期為治療腎臟損傷提供一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

雄性昆明種小鼠，體重在18～22g 之間，由遼寧長(zhǎng)生生物技術(shù)股份有限公司提供，合格號(hào)為SCXK (遼) 2015-0001。

1.2 實(shí)驗(yàn)藥品和儀器

尿毒清；腺嘌呤；羧甲基纖維素鈉；丙二醛試劑盒；超氧化物歧化酶試劑盒；獾子油；Multiskan FC 型酶標(biāo)儀；TG16K型高速離心機(jī)。

1.3 小鼠腎臟損傷模型的建立方法

除正常空白組外，按照250mg/kg 灌胃給予小鼠腺嘌呤混懸液，每隔1d 灌胃給藥1 次，給藥3 次后開(kāi)始實(shí)驗(yàn)，在實(shí)驗(yàn)的28d 內(nèi)每隔7d 灌胃同劑量的腺嘌呤混懸液。

1.4 分組和給藥

按照蛇形分組法把48 只小鼠分為6 組。根據(jù)《中藥藥理研究方法學(xué)》[2]計(jì)算出尿毒清陽(yáng)性藥組小鼠每天灌胃尿毒清的劑量為0.38mg/10g，按照0.1ml/10g 給小鼠灌胃。獾子油高、中、低劑量組灌胃獾子油的劑量為0.2ml/10g、0.15ml/10g、0.1ml/10g。正常組和模型組按照0.1ml/10g 灌胃蒸餾水，實(shí)驗(yàn)周期28d。

2 指標(biāo)測(cè)定

2.1 小鼠血清中SOD、MDA 的測(cè)定

在實(shí)驗(yàn)第28d 給藥后，對(duì)小鼠禁食不禁水12h，然后頸椎脫臼法處死小鼠，迅速采取心臟血離心，測(cè)定各組小鼠血清中SOD、MDA 含量。

2.2 小鼠腎重的測(cè)定

在小鼠取完心臟血后，取出小鼠兩側(cè)腎臟，稱重計(jì)算，記錄兩腎的平均數(shù)。

3 結(jié)果

3.1 獾子油對(duì)腎臟損傷小鼠腎重的影響

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，與腺嘌呤模型組比較，獾子油各劑量組小鼠腎重均有所增加，且與給藥劑量呈正相關(guān)，其中獾子油高劑量組腎重增加明顯接近于尿毒清陽(yáng)性藥組小鼠。見(jiàn)表1。

表1 獾子油對(duì)小鼠腎重的影響(±s，n=8)

表1 獾子油對(duì)小鼠腎重的影響(±s，n=8)

注：*表示給藥組與正常組比：***P＜0.001，**P＜0.01；#表示給藥組與模型組比：##P＜0.01，#P＜0.05。

3.2 獾子油對(duì)腎臟損傷小鼠血清SOD、MDA 的影響

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，與腺嘌呤模型組比較，獾子油各劑量組小鼠血清SOD 值均有所提高，其中獾子油高、中劑量組小鼠表現(xiàn)極顯著且高于尿毒清陽(yáng)性藥組小鼠，獾子油低劑量組也表現(xiàn)出顯著性差異且接近于正常組小鼠；獾子油各劑量組小鼠血清MDA 值均有所降低，其中獾子油中劑量組小鼠表現(xiàn)有顯著性差異且接近于正常組小鼠，表明獾子油可以改善腎臟損傷小鼠的氧化應(yīng)激水平，說(shuō)明獾子油對(duì)腺嘌呤致小鼠腎臟損傷有保護(hù)作用。見(jiàn)表2。

表2 獾子油對(duì)小鼠血清SOD、MDA 的影響(±s，n=8)

表2 獾子油對(duì)小鼠血清SOD、MDA 的影響(±s，n=8)

注：*表示給藥組與正常組比：*P＜0.05；#表示給藥組與模型組比###P＜0.001，#P＜0.05

4 討論

當(dāng)腎臟損傷后體內(nèi)的氧化應(yīng)激會(huì)發(fā)生變化，導(dǎo)致體內(nèi)的MDA 含量增加，SOD 活力下降。當(dāng)體內(nèi)SOD 活力降低時(shí)，氧自由基含量會(huì)增加，體內(nèi)的氧自由基可以啟動(dòng)膜脂質(zhì)過(guò)氧化的鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，造成膜的通透性及流動(dòng)性發(fā)生改變，并形成脂質(zhì)過(guò)氧化物，MDA 為脂質(zhì)過(guò)氧化物之一，MDA 水平與脂質(zhì)過(guò)氧化程度呈正相關(guān)，MDA 水平越高組織所遭受的氧化應(yīng)激損傷越重。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：獾子油各劑量組小鼠血清SOD 值均有所提高，MDA 值均有所降低，表明獾子油可以改善氧化應(yīng)激水平，同時(shí)小鼠腎重的變化，也可以間接反應(yīng)腎結(jié)構(gòu)和功能的變化。因此，獾子油對(duì)腺嘌呤致小鼠腎臟損傷具有一定的保護(hù)作用，但具體保護(hù)機(jī)理還有待進(jìn)一步研究。