對西藏不同居群野生牡丹籽油的主要脂肪酸成分分析

崔永寧 張姍姍1 趙 凡1 格桑平措1 魏小豹 薛璟祺 王順利 張秀新 曾秀麗1

(西藏自治區農牧科學院蔬菜研究所1，拉薩 850032)(農業部青藏高原果樹科學觀測實驗站2，拉薩 850032)(中國農業科學院蔬菜花卉研究所3，北京 100081)

牡丹(paeoniasuffruticosaAndr)屬毛茛科芍藥屬牡丹組灌木，具有很高的觀賞價值、保健和藥用價值，原產于中國。我國唐宋時期就有較成熟的觀賞牡丹栽培應用技術。牡丹的丹皮具有清血、活血散瘀的藥用功能[1]。

牡丹籽油是一種新興的食用油，具有很好的抗衰老、抗菌的作用[2]，牡丹籽油中含有較高的不飽和脂肪酸，以亞油酸和亞麻酸為主。亞油酸和亞麻酸是人體健康必須的脂肪酸，在人體中不可合成只能從飲食中獲取。牡丹籽含油量較高，出油率高達27%～33%[3-5]，經毒理學研究證實牡丹籽油食用安全性較高[6-9]。牡丹籽油的開發利用潛力極大。

1 材料與方法

1.1 樣品采集

為避免西藏現有的極其稀少的牡丹資源被破壞，具體采樣地點不公布，用居群表示。選取拉薩、林芝和山南地區等地10個居群進行研究(目前僅發現這三個地區有牡丹存在)，其中居群1、居群2、居群3、居群4和居群5選自林芝市(平均海拔3 100 m)，居群6選自拉薩市(平均海拔3 650 m)，居群7、居群8、居群9和居群10選自山南市(平均海拔3 700 m)；所選居群間距均大于20 km。每個居群選取15株蓇葖果數量超過3個的植株，每個植株采集3個蓇葖果，用網袋封裝，實驗室內自然風干，果莢自然開裂后收取種子，在烘箱中46 ℃烘干48 h后備用。

1.2 實驗方法

牡丹籽油脂肪酸成分分析采用GC-MS法，儀器為GC/MS-QP5050A 氣質聯用儀。色譜柱：Supelco SP-2560(100 m×0.25 mm×0.20 μm)；色譜柱溫度程序：100 ℃保持5 min，然后以4 ℃/min升溫至240 ℃，保持15 min；載氣：氦氣，純度≥99.999%，流速為1 mL/min；進樣口溫度程序：250 ℃，進樣方式：不分流，進樣量1 μL；溶劑切除時間12.5 min，檢測器電壓：0.1 kV；GC-MS接口溫度：250 ℃。

牡丹籽脫殼，液氮冷凍研磨，過40目篩網，取500 mg粉末于10 mL離心管，加入3 mL三氯甲烷甲醇溶液(三氯甲烷∶甲醇=1∶2)，4 ℃搖晃1 h，補加1 mL三氯甲烷，加入1.8 mL 1 mol/L氯化鉀溶液，2 500 r/min，離心10 min。取出氯仿層，氮吹干，加入1 mL5%硫酸甲醇溶液，渦旋1 min，80 ℃水浴1 h，冷卻到室溫，加入1 mL去離子水終止反應。加入5 mL色譜級正己烷，搖勻，靜止10 min，用微量注射器取0.1 mL上清液至1.5 mL樣品瓶，加入20 μL 4 mg/mL十七烷酸甲酯正己烷溶液，加入0.88 mL正己烷使體系為1 mL。上機檢測[10]。

2 結果與討論

2.1 不同居群牡丹籽油脂肪酸的定性分析

通過氣質聯用色譜法(GC-MS)對拉薩、林芝和山南地區等地10個居群牡丹的混合種子進行主要脂肪酸成分分析，如圖1所示，由GC-MS色譜圖的峰保留時間以及各相關的分子式可知，牡丹籽油的脂肪酸主要由棕櫚酸、硬脂酸、油酸、亞油酸以及α-亞麻酸等組成，這與前人研究結果一致[11-14]。

注：PA為棕櫚酸，IS為十七烷酸(內標)，SA為硬脂酸，OA為油酸，LA為亞油酸，ALA為α-亞麻酸。

2.2 標準曲線與檢出限分析

根據西藏野生牡丹籽油脂肪酸的GC-MS色譜圖(圖1)，以不同質量濃度混合標準品的質量濃度為橫坐標(x)，標準品的色譜峰面積為縱坐標(y)，進行線性回歸分析，根據信噪比(RSN=3)，計算其最低檢測質量濃度為檢出限，如表1所示。最終計算所得，相關系數都在0.99以上，由此可見在測定質量濃度范圍內，色譜圖的色譜峰面積與質量濃度成良好的線性關系。

表1 標準曲線與檢出限

2.3 不同居群牡丹籽油主要脂肪酸定量分析

根據GC-MS法測試西藏不同居群野生牡丹籽油含量結果可知(表2)，牡丹籽油中主要飽和脂肪酸有棕櫚酸、硬脂酸等，占總飽和脂肪酸99%以上；不飽和脂肪酸有α-亞麻酸、油酸、亞油酸等，占總不飽和脂肪酸99%以上。其中西藏野生牡丹居群3、居群4和居群5牡丹籽油的油酸含量最高，分別為54.84、43.24、47.79 mg·g-1，較其他居群差異極顯著，但是居群1和居群2的牡丹籽油的油酸含量最低，為1.40 mg·g-1和0.16 mg·g-1，而其他居群的含量均在30 mg·g-1以上。對于亞油酸而言，居群6、居群7、居群8、居群9以及居群10含量最高，均在21.93 mg·g-1以上，較其他居群差異極顯著。對于α-亞麻酸而言亦是如此，居群6、居群7、居群8、居群9以及居群10含量最高，均在67.84 mg·g-1以上，其中居群8更是高達106.77 mg·g-1，差異極顯著。居群6、居群7、居群8、居群9以及居群10的總脂肪酸含量亦是比其他居群含量高，均在137.78 mg·g-1以上，差異極顯著。居群6、居群7、居群8、居群9以及居群10的不飽和脂肪酸占總脂肪酸的比例均在93%以上，這和毛程鑫等[15]研究結果一致。其中居群6的所有不飽和脂肪酸均比居群7、居群8、居群9以及居群10稍低一點，但是顯著高于其他居群。由此可見，隨著海拔的升高，各居群牡丹籽油的脂肪酸含量逐漸增多，這與前人隨著海拔增高、光照增強，從而果實含油率提高的研究結果一致[19]，也與種植地的地理環境和氣候條件對牡丹籽油脂肪酸含量有顯著性影響的研究結果一致[20,21]。

2.4 常見食用油和牡丹籽油主要脂肪酸含量對比分析

人體不能合成亞油酸和亞麻酸，必須從日常膳食中獲取，不飽和脂肪酸是構成人體內脂肪的不可缺少的脂肪酸[16-18]。常見食用油(表3)中油酸含量最高的為葵花籽油，亞油酸含量最高的為大豆油，α-亞麻酸含量最高的為亞麻籽油，總不飽和脂肪酸含量最高的為菜籽油。而居群10牡丹籽油的油酸含量高出葵花籽油4倍多，亞油酸含量居于9種常見食用油中間，和亞麻籽油的亞油酸含量相仿，但是α-亞麻酸的含量顯著高于亞麻籽油，總不飽和脂肪酸含量也顯著高于菜籽油。牡丹籽油的不飽和脂肪酸含量顯著高于常見食用植物油，其人體必需的兩種不飽和脂肪酸(油酸和α-亞麻酸)的含量顯著高于目前常見食用油，這和王順利等[22]的研究結果一致。

表3 常見食用油和牡丹籽油主要脂肪酸質量分數/%

3 結論

西藏不同居群牡丹籽油的脂肪酸主要由棕櫚酸、硬脂酸、油酸、亞油酸以及α-亞麻酸等組成；牡丹籽油的不飽和脂肪酸含量顯著高于常見食用植物油的含量，其人體必需的兩種不飽和脂肪酸(油酸和α-亞麻酸)的含量顯著高于目前常見食用油；其中居群1、居群2、居群3、居群4和居群5的不飽和脂肪酸(大于82%，小于92%)均低于居群6(93%)，而居群6的不飽和脂肪酸低于居群7、居群8、居群9以及居群10(96%)，即隨著海拔的升高各居群牡丹籽油的脂肪酸含量逐漸增多。山南地區的地理環境中，林芝和拉薩更適合西藏油用牡丹的發展和推廣。

本研究將根據牡丹籽油的碘值、過氧化值、酸價、皂化值等理化指標進一步對西藏牡丹籽油的優異性進行分析。