農產品農藥殘留檢測能力驗證的前處理方法比較

郝玉敏

（長治市農產品質量安全檢驗監測中心，山西 長治 046000）

能力驗證是內部質量控制的補充，是評價實驗室能力的一種方法，是保證檢測工作質量持續有效的手段[1]。能力驗證考核需要在規定時間內完成前處理、上機測定、定性定量結果分析及原始記錄填寫等。前處理過程及數據分析是最為重要的2個環節，而傳統方法前處理時間較長。因此，縮短前處理時間，確保檢測結果準確是能力驗證的關鍵。通過3種不同的前處理凈化方式的比較，確定能力驗證中最優前處理方法，以便提高能力驗證完成速度。

1 材料與方法

1.1 儀器設備

超高效液相色譜-串聯質譜儀（美國Waters I-class XEVO-TQD），電子天平（上海光正醫療儀器有限公司YP20002），勻漿機（上海弗魯克F6/10），電熱板（北京萊伯泰科儀器有限公司EG20A plus），氮吹儀（天津奧特賽恩斯儀器有限公司MTN003-007），氮氣發生器（北京中惠普分析技術研究所PSAN-20），固相萃取裝置（Lebtech w-spe24），離心機（中科中佳HC-3018），漩渦混合器（上海躍進醫療器械廠MX-S）。

1.2 試劑與材料

乙腈、甲醇、甲酸（Fisher色譜純），氯化鈉，QuEChERS EN提取鹽包（4 g無水硫酸鎂，1 g NaCl，1 g檸檬酸三鈉二水合物，0.5 g檸檬酸二鈉倍半水合物）及凈化管（150 mg無水硫酸鎂，50 mgPSA），氨基固相萃取柱（500 mg，6 mL）。燒杯，量筒，100 mL具塞量筒，50 mL及15 mL共2種規格離心管，10 mL移液槍及槍頭，0.22μm有機相濾膜，一次性注射器，進樣瓶等。

多菌靈、烯酰嗎啉標準品購買自農業部環境保護科研監測所，濃度為100μg/mL，用甲醇稀釋成10μg/mL儲備液，-18℃冰箱中貯存備用。樣品西葫蘆及橙子由農業農村部環境質量監督檢驗測試中心（天津）郵寄。

1.3 實驗條件

1.3.1 色譜條件

BEH-C18色譜柱（2.1 mm×100 mm，1.7 um）；流動相A為甲醇，B為0.05%甲酸水溶液（V/V）。梯度洗脫條件：初始10%A；0～1 min，10%～50%A；1～2 min，50%～60%A；2～4 min，60%～80%A；4～8 min，80%～95%A；8～9 min，95%A；9～12 min，95%～10%A；流速0.3 mL/min；柱溫：40℃；進樣量5μL。

1.3.2 質譜條件

電噴霧離子源正離子掃描模式（ESI+）；離子源溫度150℃；毛細管電壓3 kV；錐孔電壓30 V；脫溶劑氣溫度450℃；脫溶劑氣流速1 000 L/hr；錐孔氣流速50 L/hr；碰撞能量20 eV；多反應監測MRM模式，質譜參數見表1。

表1 質譜參數Tab.1 The mass spectrum parameters

1.4 樣品前處理方法

（1）按NY/T 761-2008第三部分[2]進行前處理。

（2）同NY/T 761-2008標準中提取過程，從具塞量筒中取10.00 mL乙腈于燒杯中，緩緩通入空氣，蒸發至近干后用70%甲醇定容至5.0 mL。過0.22μm有機相濾膜，裝入2 mL樣品瓶。

（3）稱10.0 g樣品于50 mL離心管，加10.0 mL乙腈，震蕩，加提取鹽包，震蕩1 min，5 000 r/min離心5min，取上清液2 mL加入2支EN凈化管填料，漩渦混勻，8 000 r/min離心5 min。注射器吸取樣品過0.22μm有機相濾膜，裝入2 mL樣品瓶。

1.5 測定

樣品先進行初檢定性，明確樣品中目標農藥及大致濃度，再準確定量測定。樣品測定及添加回收測定在相同的條件下進行。每個樣品平行測定2次。

1.5.1 結果質量控制

測定樣品的同時，選擇接近初檢農藥濃度水平進行相同樣品的目標農藥添加回收測定。加標后靜置1 h，然后分別按照3種方法進行前處理測定。最終能力驗證上報結果可以根據需要選擇是否進行回收率校正。

1.5.2 溶劑及基質標樣配制

準確吸取10μg/mL儲備液各1 mL于10 mL容量瓶中，分別配制所需濃度的溶劑標及基質標。

2 結果與分析

2.1 基質效應

基質效應[3]=基質標樣峰面積/溶劑標樣峰面積×100，多菌靈溶劑標樣峰面積為596 188，基質標樣峰面積為293 794，基質效應為49%；烯酰嗎啉溶劑標峰面積為476 447，基質標樣峰面積為254 838，基質效應為53%。基質效應<70%為強基質效應，因此測定液質聯用儀測定多菌靈與烯酰嗎啉應采用配基質標樣進行測定，用溶劑標樣測定結果偏低。

2.2 3種前處理方式測定結果

采用3種方法前處理后，測定結果如表2所示。通過比較發現采用方法一和三處理后多菌靈測定回收率偏低，分別為75.0%和50.3%，采用方法二測定多菌靈回收率為88.7%，采用方法一和二烯酰嗎啉測定回收率均大于90.0%，綜合考慮，采用方法二結果校正后上報能力驗證系統。

2.3 能力驗證結果

將烯酰嗎啉和多菌靈檢測結果進行回收校正后上報能力驗證系統，通過穩健統計Z值法進行結果統計與評價：|Z|<3，滿意結果；|Z|≥3，不滿意結果。能力驗證結果見表3。烯酰嗎啉能力驗證Z值為0.7，多菌靈能力驗證結果為1.0，結果均滿意，判定合格。

表2 三種方法測定結果Tab.2 The results of three methods

表3 能力驗證結果Tab.3 The results of proficiency test

3 結論

不同的農藥性質不同，前處理的凈化過程可以降低基質的干擾，達到較好的凈化效果，但同時有些吸附劑對農藥有較強的吸附作用，如多菌靈含有苯環平面結構容易被吸附從而降低回收率。通過能力驗證中3種前處理方式的比較，方法一按照NY/T 761-2008第三部分方法，方法二在方法一的基礎上去掉凈化步驟，方法三是采用QuEChERS方法，通過檢測發現QuEChERS方法測定多菌靈回收率低至50.3%，方法二提取液不經過凈化直接蒸發至近干多菌靈的回收效果是三種方法里最好的。通過能力驗證選取最優前處理方法應用于檢測工作中，不僅能確保檢測數據真實、可靠，而且還能提高檢測技術水平和工作效率。