縫隙連接蛋白CX43表達下降導致EPCs功能減退

徐穎佳，朱振華，吳春城，任國慶，孫文文

（1.吳江區第五人民醫院心血管內科，江蘇 蘇州 215200；2.吳江區第五人民醫院消化內科，江蘇 蘇州 215200；3.江蘇大學附屬醫院急診科，江蘇 鎮江 212001）

當前，經動脈粥樣硬化疾病已經嚴重影響到人們的身體健康，對于該疾病需要進一步研究分析，從而能在身體出現不適的時候能夠及時去醫院接受治療，利于疾病能早發現和有效治療，患者預后效果好；在患者診斷分析病情期間，臨床醫生需要充分的掌握縫隙連接通道，這樣才能有效的把握患者神經系統傳遞信號情況，有效掌握患者的病情情況，因此，該文的研究將著重討論縫隙連接蛋白CX43表達水平的變化情況與EPCs功能減退的相關性，研究內容具體如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

挑選了我院從2016年—2017年診斷治療經動脈粥樣硬化的50名患者作為研究對象，根據研究對象的縫隙連接蛋白CX43的表達水平將患者劃分為A、B兩組。A組患者為縫隙連接蛋白CX43高表達，B組患者為縫隙連接蛋白CX43低表達。A組病例共計25例，其中男性患者13例，女性患者12例，年齡中位數為（78.29±2.56）歲；B組病例總計為25例，男性患者14名、女性患者11名，年齡中位數為（76.90±2.25）歲，這對兩組患者的疾病資料進行研究總結分析并進行比較，差異較小，可以比較兩組的數據，且文中的研究已與患者及家屬溝通，并簽署了知情同意書，醫院的倫理委員會審核了該試驗，可以實施。

1.2 方法

予以患者肘部靜脈采血處理，通過密度梯度離心法獲取單核細胞，培養采集貼壁細胞，予以激光共聚焦顯微鏡鑒定，評估兩組的增殖能力、遷移能力、粘附能力。①增殖能力實驗：收集貼壁細胞并進行消化，96孔細胞培養板使用纖維來與蛋白連接，接種內皮細胞，每個標本會將3個復孔設置為對照，采用CO2培養箱來運轉培養板，然后在37℃、5%CO2且濕度適宜的環境下培養24小時，再在每一個孔中添加20μL二苯基四氮唑溴鹽液體，繼續培養4小時，然后清除上清液，滴加150μL二甲基亞砜到每個孔中，使用振蕩器充分震蕩10 min后，下490 nm波長的酶標儀下進行檢測吸光度。②遷移能力試驗：收集貼壁細胞并進行消化，將50μg/L血管內皮生長因子、200μL培養液添加到Boyden小室的下室，數量一致的內皮細胞注入上室，然后在37℃、5%CO2且濕度適宜的環境下培養24小時；刮去濾膜上沒有移動的細胞，在使用甲醇3～5 min來固定，DAPI染色10分鐘，清洗蒸餾水，晾干后放在200倍顯微鏡下觀察遷徙到低層的細胞。③粘附能力實驗：收集貼壁細胞并進行消化，96孔細胞培養板使用纖維來與蛋白連接，接種數量一致的內皮細胞，然后在37℃、5%CO2且濕度適宜的環境下培養半小時，隨機挑選9個貼壁細胞，然后放在200倍熒光顯微鏡下進行計數。

1.3 統計學處理

本文中獲得的所有研究數據信息均使用SPSS 20.0統計學軟件來分析，計量資料是t檢驗，采用±s表示；計數資料x2檢驗，如果結果為P＜0.05，則說明研究數據之間的差異較大，有統計學意義。

2 結 果

依據患者縫隙連接蛋白CX43的表達水平將入選患者劃分為A、B兩組。A組患者為縫隙連接蛋白CX43高表達，B組患者為縫隙連接蛋白CX43低表達。對兩組患者的增殖細胞數目、遷移細胞數目、黏附細胞數目進行對比分析，數據結果差別較大，具有統計學意義（P＜0.05），A、B兩組的數據結果進行比較后，可以清楚看到B組增殖細胞數目、遷移細胞數目、黏附細胞數目明顯下降（P＜0.05）。如表1所示。

表1 兩組患者的EPCs功能對比

3 討 論

針對動脈粥樣硬化發展存在的危險因素實施歸納，包含的主要有：血流動力學紊亂，高血脂、炎癥因子等，患者的機體在這些因素的作用下，就會出現動脈粥樣硬化，可能還會出現其他疾病，因此，臨床醫生在對患者實施診斷治療的時候，還要重點分析研究這些影響因素，看能否找到一種或多種造成動脈粥樣硬化的因素，以便制定更加科學有效的治療方案，讓患者的病情可以獲得有效的干預和控制。正常的血管內皮細胞表達的主要方式為CX37和CX40，CX43一般位于血管中特殊的位置，比如血管連接處，伴隨AS的發展，內皮細胞的表現形式會慢慢失去CX37和CX40，而CX43表達卻不斷增加。CX43有間接造成動脈粥樣硬化的作用；CX43表達降低50%能夠明顯的將有LDL受體缺陷小鼠粥樣斑塊處的巨噬細胞和T細胞數目減少，阻止斑塊形成，內皮細胞GJIC不僅能選擇性的抑制CX43，還能抑制白細胞的粘附。選擇性的將CX43基因的內皮細胞進行剔除，就會表現出VCAM-1、ICAM-1低表達的情況，從而降低單核與內皮細胞的遷移和黏附。這次研究發現，對兩組患者的增殖細胞數目、遷移細胞數目、黏附細胞數目進行組間對比，差異存在統計學意義，與A組相比較，B組增殖細胞數目、遷移細胞數目、黏附細胞數目明顯下降。

綜上所述，縫隙連接蛋白CX43表達下降導致EPCs功能減退。