艾拉莫德對(duì)調(diào)節(jié)性B細(xì)胞及相關(guān)細(xì)胞因子的影響

孫蛟,叢珊,李潭,張倩楠,羅莉

作者單位： 830011 烏魯木齊市,新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院風(fēng)濕免疫科

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthritis,RA)是一種以持續(xù)性關(guān)節(jié)滑膜炎性反應(yīng)導(dǎo)致骨和軟骨破壞為特征的慢性系統(tǒng)性全身性自身免疫性疾病[1]。T細(xì)胞免疫功能紊亂是RA發(fā)病的主要機(jī)制之一[2]，但近年，具有負(fù)向免疫調(diào)節(jié)、維持免疫平衡的調(diào)節(jié)性B細(xì)胞(Bregs)也成為RA發(fā)病的研究熱點(diǎn)[3]。艾拉莫德是我國(guó)自主研發(fā)的1.1類藥物，是一種新型的具有多作用靶點(diǎn)的抗風(fēng)濕藥物(DMARDs)，對(duì)RA有明顯的治療作用[4]。研究表明，艾拉莫德不僅對(duì)Th1、Th17細(xì)胞有抑制作用[5-6]，且能降低B細(xì)胞分泌的免疫球蛋白和紅細(xì)胞沉降率[7]。艾拉莫德是否通過(guò)影響B(tài)regs從而達(dá)到控制關(guān)節(jié)炎癥的目的尚未明確。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 選擇健康清潔級(jí)、6～8周齡、Wistar雌性大鼠60只，平均體質(zhì)量180～220 g。

1.2 實(shí)驗(yàn)藥物與試劑 艾拉莫德片(先聲藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，國(guó)藥準(zhǔn)字H20110084)；牛Ⅱ型膠原(美國(guó)Chondrex公司生產(chǎn)，生產(chǎn)批號(hào)：20022)、弗氏完全佐劑(美國(guó)Sigma公司生產(chǎn)，生產(chǎn)批號(hào)：F5881)；大鼠白介素-10(IL-10)、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β(TGF-β)ELISA試劑盒(武漢基因美科技有限公司生產(chǎn)，生產(chǎn)批號(hào)GR201708-1)。

1.3 方法 (1)動(dòng)物分組：將60只大鼠隨機(jī)分為空白組、CIA模型組、艾拉莫德組，每組20只。(2)模型制備：將牛Ⅱ型膠原等體積加入弗氏完全佐劑后，于冰浴條件下使二者充分乳化[4]，CIA模型組和艾拉莫德組大鼠足跖及尾根部采用多點(diǎn)皮內(nèi)注射的方法進(jìn)行初次免疫，0.3 ml/只，初次免疫第8天，再次制備上述乳劑，進(jìn)行加強(qiáng)免疫。免疫后第21天時(shí)，關(guān)節(jié)炎指數(shù)(AI)≥6分提示造模成功[8]。(3)治療方法：造模成功后，艾拉莫德組給予每只大鼠每天灌胃艾拉莫德10 mg·kg-1·d-1，模型組給予每只大鼠每天灌胃等量生理鹽水，給藥4周。……