2種不同的尿液沉渣檢測方法在腎臟疾病診斷中應用價值

李文芳，李春娜，林文珍，李克學，唐 苗，劉丹丹

（中山大學附屬第五醫院1.臨床檢驗科；2.感染科，廣東 珠海 519000）

慢性腎臟病（Chronic kidney disease，CKD）是一種慢性進展性疾病，嚴重危害人類健康，早期臨床表現常由于缺乏明顯和特異性的癥狀和體征容易被漏診，研究顯示約30%的患者在首次就診時就已經患有慢性腎臟疾病[1]，因此予以腎臟疾病患者早期而有效的診斷很有必要。目前尿液常規和沉渣檢查是目前檢查腎臟疾病的常用檢測方法，也是腎臟疾病治療的常用監測指標[2]；顯微鏡鏡檢結果較為準確，但需大量的人力投入以及結果易受主觀因素影響，隨著尿沉渣檢驗標準化的推廣和普及，有許多尿液沉渣檢驗專用儀器，無論是何種儀器法操作均簡單及高效[3-4]；慢性腎臟疾病患者尿液中各種有形成分有多種形態學的變化，尤其紅細胞形態學的變化較為多樣性，因此針對慢性腎臟疾病患者是否可用儀器法完全替代人工鏡檢仍有待商榷。因此本文將運用沉渣發針對腎臟疾病患者的尿液檢測，同時以人工顯微鏡鏡檢檢測作為標準，探討不同的尿沉渣儀器檢測法在腎臟疾病患者中的檢測價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取我院在2020年8月收治的31例患者的尿液樣本和53例腎臟疾病患者作為研究對象，其中女性56例，男性27例，年齡17～87歲。通過比較數字顯微鏡成像檢查和染色流式細胞儀法在尿液有形成分如紅細胞、白細胞和管型計數的檢測結果的差異。

1.2 主要儀器與試劑

人工鏡檢法使用奧林巴斯顯微鏡進行，而數字顯微鏡成像尿沉渣檢測使用Cobas u701有形成分分析儀和染色流式細胞儀法尿沉渣檢測用希森美康UF-5000i有形成分分析儀，以上兩臺設備均采用配套的試劑。

1.3 方法

同一份尿液標本分別在Cobas u701有形成分分析儀和希森美康UF-5000i有形成分析儀上進行尿液有形成分檢測。儀器檢測后，將剩余的尿液標本以1500 rpm，離心5分鐘，棄上清，沉渣涂片人工鏡檢。尿液為均為清晨的中段尿，所有的檢查結果均在2h內檢查完成。

1.4 統計學方法

本文中所有的數據分析均采用SPSS 21.0軟件進行分析統計。計量資料采用t檢驗；計數資料以率（%）表示，采用x2檢驗。若P＜0.05則表示具有統計學意義差異。

2 結 果

2.1 兩種方法一致性分析

為了檢測兩種不同的檢測方法在在常規患者的檢測中尿液檢測結果是否存在一致性，我們通過檢測31名隨機患者的尿液，結果顯示染色流式細胞儀法和數字顯微鏡成像檢查法在紅細胞和白細胞的計數均沒有統計學差異（圖1A和B）；進一步比較發現在腎小球疾病患者中染色流式細胞儀法檢測的紅細胞計數要明顯高于數字顯微鏡成像檢查法，且差異具有統計學差異（P＜0.05）（圖1C和D）。

2.2 兩種方法學在尿液紅細胞和白細胞、管型與顯微鏡鏡檢符合率的比較

人工鏡檢是尿液有形成分是臨床尿液常規檢查的金標準，本研究的尿液有幸成分的人工鏡檢有2名有經驗的檢驗人員對尿液標本進行人工鏡檢，對兩種方法學在紅細胞和白細胞與顯微鏡鏡檢符合率進行評估比較，結果顯示染色流式細胞儀法實驗組的紅細胞鏡檢陽性19例，陰性28例；白細胞鏡檢陽性28例，陰性21例，管型鏡檢陽性4例，陰性48例；數字顯微鏡成像檢查法實驗組的紅細胞鏡檢陽性18例，陰性32例；白細胞鏡檢陽性28例，陰性20例，管型鏡檢陽性2例，陰性42例；染色流式細胞儀法的紅細胞和白細胞的符合率分別為91%和93%，數字顯微鏡成像檢查法的紅細胞和白細胞的符合率分別為85%和93%，顯然前者要略高于后者且差異具有統計學意義（見表1）。

表1 兩種方法與人工鏡檢檢測（n）

3 討 論

機體在正常情況下尿液并不會出現大量的紅細胞、白細胞和管型等有形成分，若在尿液標本中檢測出紅細胞、白細胞和管型可提示患者的腎臟或者泌尿系統出現異常，尤其顯微鏡鏡下血尿和鏡下管型是提示腎性疾病的重要線索，也是明確腎性疾病類型的依據之一[5-6]，多項研究也證實于腎臟疾病患者采取尿沉渣化學方法檢測尿液的準確性較高[7-8]，因此能夠早期和準確的檢測尿液中各種細胞類型將有助于提高腎性疾病的診斷準確率和監測治療的有效性。目前在臨床檢驗中對于尿液沉渣有形成分檢測原理主要有數字顯微鏡成像檢查和染色流式細胞儀法，其中染色流式細胞儀法主要是通過對尿液中各種有形成分進行細胞膜和細胞核熒光染色，通過對各種有形成分所產生的散射光、熒光和電阻變化檢測計算出各種有形成分的含量；而數字顯微鏡成像尿沉渣檢測法主要是通過拍攝全景圖片并且提供與人眼在顯微鏡下觀察到的細胞有形成分一致的圖像，最終通過神經網絡分析軟件對圖像內的成分進行識別和計數[9]。在本研究分析中發現，針對腎臟疾病患者，兩種方法學在紅細胞的檢出率中具有統計學差異，并且染色流式細胞儀法與鏡檢符合率更明顯高于數字顯微鏡成像尿沉渣檢測法，究其原因可能是由于數字顯微鏡成像在檢測過程中對某些層別的細胞識別效率減低甚至無法識別，因此與鏡檢的符合率有所減少[10]；數據顯示，染色流式細胞法在檢測紅細胞時存在一定的假陽性，鏡檢發現這類假陽性標本主要是由于含有細小的草酸鈣結晶，在形態上與小紅細胞形態類似，因此染色細胞流式法存在一定的假陽性[11]；另外我們認為在數字顯微圖像法出現一定的假陽性可能是由于腎小球源性的紅細胞因受到腎臟系統中不同的酸堿環境和滲透壓的影響會導致出現紅細胞形態學的變化[12]，因此可能運用數字顯微鏡成像檢查法時對紅細胞的檢測可能存在漏診，本研究中數字顯微鏡成像檢查所漏診的患者尿液中的紅細胞陽性率要略高于色流式細胞儀法檢測法的結果也證實這一點。另外，尿液中出現管型成分提示患者的腎小球或者腎小管存在腎實質性損害，針對腎小球疾病患者運用數字顯微鏡成像檢查對于管型成分識別與鏡檢符合率要明顯低于染色流式細胞法，但是檢出的假陽性略高，這主要是由于前者常將尿液中的粘液絲和卷曲的上皮細胞誤判為病理性管型，以及管型由于在組成成分、形態和性質管型具有多種類型，因此染色流式細胞法與鏡檢符合率上更優于數字顯微鏡成像法。臨床工作發現顯微鏡鏡檢雖具有較高的臨床價值，但耗時耗力，尤其對檢驗人員資質要求高，但無論染色流式細胞法還是數字顯微鏡成像法的都具有高效率和速度快的特點，結合以上結果可以看出，無論是何種方法學的尿液沉渣檢測，都無法完全替代人工鏡檢法，因此在臨床檢驗中，針對腎臟疾病患者都應在儀器法檢測的基礎上及時進行人工鏡檢確認，這樣才能保證檢測的準確性、避免誤診漏診的事件發生。