蒲公英飲片質量評價及質量控制分析

王青青 王夢雅

1.江蘇省中醫院研究院，江蘇 南京 210046；2.江蘇省中西醫結合醫院，江蘇 南京 210046

蒲公英屬于菊科植物，具有利尿通淋、清熱解毒和消腫散結的功效。蒲公英飲片在臨床上得到廣泛應用，為提高蒲公英飲片的質量，本研究對其質量評價及質量控制進行研究分析，現報告如下。

1 材料與方法

1.1 主要儀器 選擇安捷倫科技有限公司生產的高效液項色譜儀，型號為Agilent100、迪馬公司生產的色譜柱，型號為ODS，規格為5 μm。梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司生產的電子天平，型號為MS105DU。

1.2 材料 實驗用材料選擇：甲醇、色譜純、三乙胺、甲酸、磷酸、磷酸二氫鈉、水純化水、分析純。實驗用對照品為：中國藥品生物制品鑒定所提供的咖啡酸。

1.3 方法 根據蒲公英中主要成分咖啡酸水溶性和預實驗結果，確定咖啡酸的含量和得膏率作為指標，將加水量、提取次數、提取時間進行正交實驗。并對水提工藝的的各項參數進行考察。

按照正交設計方案，稱取9份蒲公英原料25 g，加入相應倍量的水，微沸之后回流提取，過濾并搖勻。從中提取5 mL，并通過0.22 μm微孔濾膜過濾，廢去初濾液。對照品制備中，同樣使用精密測量儀器進行咖啡酸稱取，稱取量為7.2 mg，放置到50 mL量瓶中，加入甲醇到相應刻度搖勻。精密量取2 mL，放置到10 mL量瓶中，再加入甲醇到刻度，搖勻。經過0.22 μm微孔濾膜過濾，廢去初濾液，得到對照品。

2 結果

將咖啡酸的含量作為蒲公英飲片質量檢驗的指標，對超聲狀態下和回流狀態下兩種不同提取方法的蒲公英飲片中咖啡酸含量結果進行分析，得到的結果沒有差異性，表明提取方法產生的影響不顯著。按照上述方法進行操作之后得到，0.025 mg/mL的溶液，室溫放置一段時間，并在2 h、4 h、8 h、16 h和24 h等階段，分別進行測定和計算，結果證明咖啡酸峰面積RSD為0.2%。證明樣品中咖啡酸的含量在24 h之內具有穩定性。按照建立方法，對不同產地的蒲公英藥材進行炮制加工，制備成蒲公英飲片之后對含量測定，結果可以看出不同產地蒲公英制備的蒲公英飲片含量具有產一定，基本上在0.017%～0.065%之間，根據測定得到的結果，按照干燥品進行計算，得到咖啡酸的含量不少于0.015%。特征圖譜如圖1所示。

基于特征成分關聯，對特征色譜中各特征成分進行了相關性分析，選擇咖啡酸為基準峰，并將其保留時間設定為1，計算特征峰為1～14，相對保留時間分別為0.543、0.823、0.912、0.930、0.965、1.000、1.236、1.392、1.472、1.533、1.947、2.125、2.169、2.717。

2.1 蒲公英飲片質量評價 取材：中藥藥材產地廣泛，不同的生長環境與獨特的栽培技術，使不同產地的藥材質量會產生一定的差異性。在實際制備和生產蒲公英飲片的過程中，要選擇具有代表性的材料進行投料。全覆蓋藥材產地，要對當地的地理環境可能產生的影響進行分析。中藥來源廣泛，因為名稱而產生混淆的情況時有發生，對此，本研究從純正蒲公英的產地進行取材，確保品質的穩定性。本研究過程中選擇的蒲公英材料來自于我國湖北、四川、河南和甘肅等地，使用DNA條形碼技術對蒲公英的品質進行鑒定，從源頭進行材料質量把關，測得蒲公英飲片的指標與成分含量均符合我國頒布的《中國藥典》的要求，保證投料藥材的代表性與廣泛性，也保證了標準湯劑合理性和安全性[1]。

操作：本研究中的蒲公英飲片標準湯劑，嚴格按照國家中藥管理總局發布的《規范》中規定的工藝參數和研究數據進行制備。花葉全草類藥物頭煎使用12倍量水，二煎使用10倍量水。蒲公英飲片的頭煎時間為30 min，二煎的時間為20 min。這種操作方法不僅保留蒲公英飲片原汁原味，同時又合理地使用現代化設備，制備出的蒲公英飲片以傳統的煎藥工藝作為基礎，同時提高藥物的整體質量水平[2]。

品質：此次研究采用標準化工藝，對蒲公英飲片標準湯劑進行制備，并且測定其中咖啡酸的含量，得到蒲公英飲片標準湯劑物質傳遞的規律，從整體上把控了蒲公英飲片的質量。指標成分轉移率考察結果和指紋圖譜具有較高的相似度，考查結果證明對此次研究過程中制備的蒲公英飲片總體質量有均一性和穩定性，研究得到的數據有參考價值。

標準化蒲公英飲片制備和出膏率考察結果更是為后續蒲公英飲片藥物大量生產工藝優化提供參考指標，能夠有效縮短研發時間，并提高藥物整體品質。

2.2 蒲公英飲片質量控制 合理選擇提取溶劑：咖啡酸是蒲公英中最為重要的一種成分，根據《中國藥典》中對蒲公英的要用價值進行分析中可以看出，咖啡酸成分的含量會影響到蒲公英的價值。而且，在單味藥物配方中，蒲公英經過水蒸氣提取、濃縮、干燥和制備成飲片，在實驗探究的過程中，如果提取溶劑為水，則咖啡酸的含量可能會受到水分的影響而出現含量變化。《中國藥典》規定蒲公英飲片中咖啡酸的含量在0.02%以上，本研究得出的蒲公英飲片中咖啡酸含量在0.04%以上，得膏率為20%以上。由此可以看出，合理選擇提取溶劑，不僅可以保證蒲公英飲片配方中咖啡酸含量高，又可以確保水溶性成分增多，是一種合理的提取方法[3]。

明確評價工藝指標：根據蒲公英飲片制備領域實驗研究可以看出，如果有兩項評價指標同時存在，那么在蒲公英飲片質量評定中，主要采用的方法為兩項指標加權評價方法。這種評價方法能在兩項指標變化趨勢不一致的情況下，突顯出優越性。但是，在選擇工藝指標時，主要是根據以往的工作經驗確定的。因為不同的藥材在《藥典》中有不同的規定，無論是藥理活性成分還是總體提取物對于最終產品的藥效會產生不同的影響[4]。根據本研究能看出，在實驗中沒有引入權重概念，主要是因為蒲公英飲片中咖啡酸的含量以總提取物的含量指標變化趨勢具有一致性。由此可以看出，本研究所采用的方法是一種有利于提高得膏率的方法，對于蒲公英飲片的質量能起到較好的控制效果。

科學規定咖啡酸含量：根據相關領域的資料研究可以看出，不同產地蒲公英其中含有的咖啡酸的含量會有較大的差異性。一般情況下，蒲公英中的咖啡酸含量會從0.10%～0.36%不等，所以，不同產地的蒲公英飲片作為有原料生產值得的配方中，咖啡酸含量也會參差不齊。制定完善的含量控制標準，是確保蒲公英飲片質量的重要手段。

3 討論與結論

在本研究中，經過測量得到原材料中咖啡酸含量為0.02%，多批樣品測定結果表明咖啡酸的含量均在0.04%以上。制備工藝最終得到蒲公英飲片的咖啡酸含量為0.04%，提取工藝的得到率為36%。所以，從理論上分析，蒲公英飲片和蒲公英原材料中的咖啡酸含量基本持平。實驗數據與理論折算有較大的差異性。而且，因為蒲公英中咖啡酸具有溶于水的特性，在高溫條件下的正交試驗中，具有不穩定性。當溫度回流到100攝氏度左右時，也會有其他成分轉化成為咖啡酸。根據相關規定可以得出，蒲公英咖啡酸不能低于0.02%，本研究所得到的蒲公英飲片中咖啡酸的含量不低于0.4 mg/g[5-7]。

在研究的過程中，實驗雖然嚴格按照相關標準和規定進行操作，并將水溶劑作為蒲公英飲片的溶劑，在微沸騰狀態下提取1 h之后制備得到成品。但是，其中包括咖啡酸在內的酚酸類有效成分仍有不穩定性，并且遇光會分解。本實驗制備蒲公英飲片標準湯劑按照《藥典》與相關技術要求中規定的工藝參數與數據進行制備，花葉全草類藥物頭煎加水量為12倍，二煎加水量為10倍，飲片頭煎時間為30 min，二煎時間為20 min。這種藥物煎煮方法不僅能保留重要湯劑原本的特性，而且也運用了現代煎藥設備，制備的蒲公英飲片湯劑基于傳統工藝，也實現了工藝優化升級的目的。雖然其中咖啡酸的含量已經超過《中國藥典》中關于蒲公英飲片中咖啡酸含量的規定，但是不能完全排除其他成分轉化影響。所以，其中是否有其他成分損失，蒲公英飲片配方的實際應用質量仍有待進一步研究[8]。

綜上所述，本研究通過實驗探究的方法，制備蒲公英飲片，并對其質量進行分析，探討出合理的蒲公英飲片質量控制辦法，為今后相關領域的研究提供參考。