雙柱雙進(jìn)樣氣相色譜法測定蔬菜中5種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留

韓順林

（晉中市綜合檢驗(yàn)檢測中心，山西晉中 030600）

有機(jī)磷類農(nóng)藥是一類高效、廣譜、種類多及殘留期短的人工合成農(nóng)藥，自20世紀(jì)30年代后在世界各國農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中被廣泛應(yīng)用，尤其是20世紀(jì)70年代很多國家相繼禁用毒性大、高殘留的有機(jī)氯農(nóng)藥后，其使用率大幅提升，對(duì)人類、動(dòng)物及環(huán)境有許多潛在危害[1]。目前，我國雖對(duì)菜農(nóng)、果農(nóng)等在蔬菜、水果種植中嚴(yán)禁使用和限制使用的農(nóng)藥做了嚴(yán)格規(guī)定，但在蔬菜、水果質(zhì)量安全抽檢、風(fēng)險(xiǎn)監(jiān)測中仍能檢測到高毒、劇毒農(nóng)藥殘留，其中以有機(jī)磷類農(nóng)藥殘留居多，因此，提升有機(jī)磷類農(nóng)藥殘留檢測的技術(shù)水平尤為重要[2]。氣相色譜法是基層食品檢驗(yàn)檢測機(jī)構(gòu)開展農(nóng)藥殘留檢測的常規(guī)方法，但由于蔬菜水果基質(zhì)復(fù)雜，單一色譜柱檢測常受到樣品中其他內(nèi)含物的干擾，出現(xiàn)假陽性誤判。因此，本文結(jié)合實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有條件設(shè)備，參照《蔬菜和水果中有機(jī)磷、有機(jī)氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農(nóng)藥多殘留的測定》（NY/T 761—2008）[3]第一部分方法一，建立了雙柱雙進(jìn)樣氣相色譜法檢測蔬菜中敵敵畏、乙酰甲胺磷、樂果、毒死蜱和三唑磷5種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的方法。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

西紅柿（購自某超市）；標(biāo)準(zhǔn)溶液：敵敵畏、乙酰甲胺磷、樂果、毒死蜱和三唑磷（壇墨質(zhì)檢科技股份有限公司，濃度均為100 μg/mL）；乙腈（韓國德山試劑公司，色譜純）；丙酮（賽默飛世爾科技公司，色譜純）；氯化鈉（國藥集團(tuán)化學(xué)試劑公司，分析純）；實(shí)驗(yàn)用水為一級(jí)超純水。

1.2 儀器與設(shè)備

Agilent 8890氣相色譜儀（美國安捷倫，配雙塔雙柱雙FPD檢測器）；AL104電子天平（瑞士梅特勒·托利多，精度0.000 1 g）；VORTEX MS3旋渦混合儀（德國艾卡）；氮吹儀；勻漿機(jī)。

1.3 試樣前處理

準(zhǔn)確稱取25.0 g充分混勻的西紅柿試樣置于勻漿機(jī)中，精確量取50.0 mL乙腈加入，高速勻漿2 min后，用濾紙過濾至裝有6 g氯化鈉的100 mL具塞比色管中，加蓋振搖約1 min，室溫靜置30 min，待分層后，準(zhǔn)確移取10.0 mL上層溶液于150 mL燒杯中，在80 水浴鍋中加熱，氮吹至近干，加入2.0 mL丙酮，蓋鋁箔備用。將備用液全部移入10.0 mL比色管中，用約3 mL丙酮分3次洗滌燒杯并移入比色管中，用丙酮定容至5.0 mL，用旋渦混合儀渦旋混勻，移入進(jìn)樣瓶中上機(jī)待測。

1.4 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

1.4.1 混合標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

分別吸取樂果、毒死蜱標(biāo)準(zhǔn)溶液各0.10 mL，敵敵畏、乙酰甲胺磷標(biāo)準(zhǔn)溶液各0.15 mL，三唑磷標(biāo)準(zhǔn)溶液0.20 mL于25 mL容量瓶中，用丙酮定容至刻度線，配制得含有樂果、毒死蜱濃度為0.4 μg/mL，敵敵畏、乙酰甲胺磷濃度為0.6 μg/mL，三唑磷濃度為0.8 μg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。

1.4.2 標(biāo)準(zhǔn)工作系列溶液配制

準(zhǔn)確吸取上述混合有機(jī)磷標(biāo)準(zhǔn)溶液0.25 mL、0.50 mL、1.50 mL、2.50 mL和5.00 mL于10 mL容量瓶中，用丙酮定容至刻度，配制得相應(yīng)濃度的敵敵畏、乙酰甲胺磷、樂果、毒死蜱和三唑磷混合標(biāo)準(zhǔn)工作系列溶液，各農(nóng)藥殘留組分濃度詳見表1。

表1 各農(nóng)藥殘留組分標(biāo)準(zhǔn)系列點(diǎn)濃度

1.5 氣相色譜條件

色譜柱：A柱為DB-17毛細(xì)管色譜柱（30 m×530 μm×1 μm）、B柱為 DB-1毛細(xì)管色譜柱（30 m×530 μm×1.5 μm）； 載 氣： 高 純 氮； 柱 流 量：2 mL/min；柱溫：150 保持2 min，以8 /min升溫至250 ，保持30 min；進(jìn)樣口溫度：220 ；進(jìn)樣方式：不分流進(jìn)樣；進(jìn)樣量：1 μL；檢測器溫度：250 ；氫氣流量：70 mL/min；空氣流量：100 mL/min；尾吹流量：10 mL/min。

2 結(jié)果與分析

2.1 色譜分離分析

以標(biāo)準(zhǔn)溶液與樣品溶液分別在A柱（DB-17色譜柱）與B柱（DB-1色譜柱）上的保留時(shí)間定性，以標(biāo)準(zhǔn)溶液與樣品溶液在A柱上的峰面積比較外標(biāo)法定量，44.5 min內(nèi)能完成色譜分析，5種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留可較好地分離，各組分峰形尖銳對(duì)稱，且樣品中雜質(zhì)峰未產(chǎn)生干擾。

2.2 線性關(guān)系及檢出限

對(duì)配制的敵敵畏、乙酰甲胺磷、樂果、毒死蜱和三唑磷混合標(biāo)準(zhǔn)工作系列溶液進(jìn)行測定，以各組分的標(biāo)準(zhǔn)系列點(diǎn)濃度為橫坐標(biāo)，以相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)系列點(diǎn)對(duì)應(yīng)的峰面積制作標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。當(dāng)取樣量為25 g，提取溶劑50 mL，取10 mL提取液，定容體積為5 mL時(shí)，以3倍信噪比對(duì)應(yīng)的目標(biāo)物濃度計(jì)算方法檢出限，以10倍信噪比對(duì)應(yīng)的目標(biāo)物濃度計(jì)算方法定量限。該方法的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程、線性相關(guān)系數(shù)、檢出限及定量限見表2。結(jié)果表明，5種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留組分在各自濃度范圍內(nèi)均有良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)均＞0.999。

表2 各農(nóng)藥殘留組分標(biāo)準(zhǔn)曲線方程、相關(guān)系數(shù)、檢出限及定量限

2.3 加標(biāo)回收率與精密度

在陰性西紅柿試驗(yàn)中，參照5種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留組分的方法檢出限《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中農(nóng)藥最大殘留限量》（GB 2763—2021）[4]中的最大殘留限量，添加高、中、低3個(gè)濃度水平的有機(jī)磷農(nóng)殘標(biāo)準(zhǔn)溶液，按照1.3中試樣前處理、1.5中色譜條件將每個(gè)濃度水平平行測定6次，計(jì)算方法的加標(biāo)回收率與精密度以相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD表示。由表3可知，西紅柿中5種有機(jī)磷農(nóng)殘?jiān)?.016～0.320 mg/kg添加水平下，回收率為70.8%～118.0%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.88%～6.14%。結(jié)果表明，該方法測定西紅柿中敵敵畏、乙酰甲胺磷、樂果、毒死蜱和三唑磷殘留量的加標(biāo)回收率與精密度良好，符合《實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范 食品理化檢測》（GB/T 27404—2008）[5]的規(guī)定。

表3 各農(nóng)藥殘留組分的加標(biāo)回收率及精密度試驗(yàn)結(jié)果

3 結(jié)論

本研究參照《蔬菜和水果中有機(jī)磷、有機(jī)氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農(nóng)藥多殘留的測定》（NY/T 761—2008）第一部分方法一，建立了雙柱雙進(jìn)樣氣相色譜法測定蔬菜中敵敵畏、乙酰甲胺磷、樂果、毒死蜱和三唑磷5種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量的分析方法。通過試驗(yàn)考察方法的線性關(guān)系、檢出限、定量限、加標(biāo)回收率與精密度等均符合《蔬菜和水果中有機(jī)磷、有機(jī)氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農(nóng)藥多殘留的測定》（NY/T 761—2008）與《實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范 食品理化檢測》（GB/T 27404—2008）的相關(guān)要求，能滿足食品檢驗(yàn)檢測機(jī)構(gòu)對(duì)蔬菜中敵敵畏、乙酰甲胺磷、樂果、毒死蜱和三唑磷等5種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留準(zhǔn)確、快速的檢測需求。