松乳菇的研究進展

彭君，朱德彬，王小鳳，李湘球

（萍鄉(xiāng)市蔬菜科學研究所，337000）

松乳菇是一種外生菌根真菌，拉丁學名為Lactariusdeliciosus（L.ex Fr.）Gray，為紅菇科乳菇屬。野生松乳菇有蝦仁色、胡蘿卜色、橙紅色等多種顏色，子實體受傷后會變成綠色[1]。圖1所示為湘西地區(qū)常見的松乳菇，其菌蓋扁半球形，直徑1～13 cm，菌柄長3~9 cm，邊緣向內微卷，傘蓋表面光滑，中部向下凹進[2]。松乳菇為菌根食用菌，對生長環(huán)境要求嚴格，國內人工馴化栽培技術還未成熟。但有研究報道，在實驗室中已獲得了與野生松乳菇形態(tài)風味完全一樣的子實體，該技術還需進一步優(yōu)化，未大面積投入生產[3，4]。

圖1 湘西地區(qū)常見的松乳菇

1 資源分布簡介

松乳菇對環(huán)境條件要求嚴格，好散射光（適宜溫度在11～25℃[5]），喜濕度大 （含水量為65%～75%），一般生長在松林或混交林地[2]，最適土壤pH值在5.6～6.5。松乳菇在生長發(fā)育過程中會吸收土壤中的NO3-N[6]，并通過與宿主植物的根系形成共生體才能產生子實體。因為這種特殊的共生關系，所以在有松乳菇分布的地區(qū)，土壤一般都具修復作用[7]。據研究報道，我國松乳菇主要分布在湖南、云南等地，在四川、遼寧、吉林、河南、山東、貴州、安徽、江西等地區(qū)的也有文獻報道[8]。不同地區(qū)松乳菇生長環(huán)境的植被有差異。湘西北松乳菇大多生長在喬木層（馬尾松、濕地松及火炬松混合林）、灌木層（油茶、金纓子、小果薔薇、火棘、馬桑、杜鵑、繼木）、草木層（白茅、黃茅、獐茅、狗牙根）中[9]。黃山地區(qū)松乳菇生長在馬尾松林下（金纓子、尖毛心茶、麻櫟、杜鵑、六月雪、鹽膚水、江南越橘、格藥柃、野花椒等）、草木層（白茅、獲、麥冬）[5]。貴州地區(qū)橙黃色松乳菇植物群落的均勻性和穩(wěn)定性高[10]。山西地區(qū)松乳菇發(fā)現只生長在油松林內[11]。湘西北每年的5～9月、7～9月是松乳菇的生長旺盛期[8]，雨后為松乳菇大量生長的時期[12]。黔東地區(qū)松乳菇主要出菇期為4月下旬至11月中旬[13]。

2 營養(yǎng)價值與功效研究

研究表明，松乳菇的營養(yǎng)豐富，人體所必需的氨基酸、粗蛋白、粗脂肪等營養(yǎng)物質的含量都相對較高[14]。松乳菇中含有8種人體必需氨基酸，其中谷氨酸、天冬氨酸的含量高（表1）[14]。氨基酸主要集中在菌蓋組織中，其次是菌柄[15]。松乳菇還含有豐富的Fe、Cr、Cu、Zn、Mn、Ni、Ca、Mg等礦物元素[16]。針對松乳菇多糖的研究較多。多糖總含量為68.83%，蛋白質的含量為24.53%，單糖的成分主要為葡萄糖、果糖、甘露糖[17]。目前，有對松乳菇多糖含量的測定技術研究報道，苯酚硫酸法簡單快捷[18]。松乳菇的營養(yǎng)價值高，但不同種類的松乳菇營養(yǎng)成分、含量各異，紫褐色松乳菇富含P（6.44 g/kg）、Mg（1.18 g/kg）、Zn（0.19 g/kg）、必需氨基酸（48.98 g/kg）及總氨基酸（149.22 g/kg），營養(yǎng)價值高于橙黃色松乳菇[19]。此外，松乳菇還是一種珍稀藥材，多項研究表明，松乳菇具有抗癌作用[20，21]、抗氧化能力[22]、殺菌作用（尤其對巴氏桿菌、大腸桿菌、沙門氏菌作用明顯）[23]、調節(jié)機體免疫活性[24]、有效清除自由基[25]、降血糖[26]等多種功效，但由于原材料栽培技術的限制，松乳菇目前還沒有大量投入臨床應用。

表1 松乳菇子實體和菌絲體各成分的含量[14] %

3 馴化栽培研究

3.1 菌絲體研究

松乳菇菌絲體的研究主要集中在菌絲的形態(tài)特征、培育菌絲生長的培養(yǎng)基、生長所需的營養(yǎng)物質等方面。研究表明，從松乳菇不同的組織中分離的菌絲生長速度不同，采用菌蓋與菌柄連接處的組織體分離的菌絲生長速度最快[27]。不同的組織分離得到的菌絲在顯微鏡下觀察到的形態(tài)特征也不一樣。松乳菇柄基分離的菌絲體匍匐生長，呈白色、長勢濃密。菌柄與蓋交界處分離的菌絲體為雙核菌絲，呈白色，出現橫隔[28]。從子實體組織中分離得到的菌絲體為氣生型，呈淺棕色，菌絲表面有菌膜[29]。

營養(yǎng)水平、生長調節(jié)劑、培養(yǎng)基、溫度及pH值對松乳菇菌絲體培養(yǎng)均有影響。菌絲體生長中碳源對K、Ca的吸收影響最大，氮源對Fe、Mn的吸收影響最大，P含量對Mg、Zn的吸收影響最大[30]。培養(yǎng)基中葡萄糖為最佳碳源，乙酸銨為最佳氮源，其次是玉米漿和蛋白胨[27]。但有研究報道，不同菌株的最適碳、氮源有所不同[31]。也可在培養(yǎng)基中添加牛肉膏作為氮源，且有機氮源比無機氮源的效果更好[32]。研究表明，在培養(yǎng)基中添加松乳菇生長地區(qū)的土壤和干松針的浸出液混合物[33]或者加入濃度為5 mg/L的赤霉素能顯著促進松乳菇的菌絲生長[34]。培養(yǎng)基對菌絲的生長影響較大，PDA是培養(yǎng)松乳菇較適宜的培養(yǎng)基[35]，蛭石、珍珠巖是制備菌根菌栽培種較適宜的基質[36]。在改良后的BAF培養(yǎng)基上松乳菇長勢良好[37]。松乳菇液體培養(yǎng)基可獲得高生物量，改良后的馬丁氏培養(yǎng)基是最適宜的基礎培養(yǎng)基[38]。半固體培養(yǎng)基也適合菌絲擴繁培養(yǎng)[39]。此外，在PDA培養(yǎng)基中培養(yǎng)松乳菇，菌絲體在pH值為7.5時生長最快，培養(yǎng)溫度為25℃[40]。而使用固體MMN培養(yǎng)基則最適的pH值為6.5。松乳菇菌絲也可用15 L罐進行發(fā)酵生產[38]。

3.2 子實體研究

在子實體培養(yǎng)研究中發(fā)現，采用液體菌劑打孔接種馬尾松無菌苗，春季接種菌根感染率低[41]。廣西共生型野生松乳菇的馴化研究中報道，最佳原種、栽培種培養(yǎng)基為棉籽殼88%、松木屑10%、糖2%。人工栽培和半人工模擬栽培均可觀察到菌絲體的生成[42]。研究中發(fā)現，雖然在適宜條件下單以碳源、氮源菌絲可以旺盛生長，但是最終卻不能形成子實體[39]，還需加入添加物如松樹鋸木屑（或加糖）、濕松樹根等，才能在適宜的條件下迅速長出菌蕾[43]。

4 分子技術在松乳菇研究上的應用

ITS（Internal transcribed spacer）作為rDNA中的非轉錄編碼區(qū)，因具有高度的保守性，可作為一種分子標記對松乳菇進行系統(tǒng)發(fā)育研究[44]。研究表明，松乳菇和紅汁乳菇、橙色乳菇親緣關系較近[45]。松乳菇ITS序列共有20 bp長度的變化（表2），變異位點ITS有99個。松乳菇組織分離菌株的rDNA ITS序列分子鑒定可快速鑒定分離菌株是否為松乳菇純菌種[46]。轉錄組分析表明，松乳菇多糖能夠通過Ras-ERK-MAPK信號通路促進T淋巴細胞進行基因表達及增殖[47]。

表2 松乳菇ITS序列長度及堿基組成[45]

5 展望

國內松乳菇市場價格維持在50元/kg以上，品相好的松乳菇市場價格在100元/kg以上[48]。松乳菇具有較大的加工利用價值，其菌根化苗木具有較強的抗逆性[49]。松乳菇對馬尾松幼苗的生長及氮磷鉀養(yǎng)分的吸收有明顯的促進作用[50]，合理栽培松乳菇可促進我國林業(yè)的發(fā)展。可以松乳菇發(fā)酵液和鮮牛奶為原料進行乳酸發(fā)酵[51]。松乳菇揮發(fā)性物質中含有較高含量的丁酸丁酯，可作食用、煙用、皂用香精，也用于調和蘋果、鳳梨等香味，以及作涂料、油漆、樹脂和硝化纖維的溶劑[52]。

目前松乳菇人工馴化研究取得了一定的進展，新西蘭是松乳菇研究生產的主要國家之一[53]，2008年首次商業(yè)化栽培新西蘭松乳菇獲得成功。但是，我國僅在實驗室成功栽培出與野生松乳菇形態(tài)風味相同的子實體，商業(yè)化栽培的相關技術至今還未成熟[54]，因此我國還應進一步探討商業(yè)化栽培中松乳菇子實體的培養(yǎng)基配方、適宜菌絲體生長的環(huán)境條件、管理技術等，以期獲得高產，為后續(xù)松乳菇的營養(yǎng)研究以及加工、臨床等多方面應用提供原材料。