不同方法學檢測老年病人梅毒抗體假陽性結果分析

夏歡 洪云 王永卿 邱梅花

梅毒是由密螺旋體蒼白亞種引起的一種經典性傳播疾病，其傳染性強，傳染源隱蔽，可侵犯全身多個器官，治愈困難，危害極大[1]。梅毒主要通過性接觸傳播，其次是母嬰垂直傳播或血液傳播[2]。老年人作為一個特殊群體，梅毒感染情況較其他群體有其特殊性[3]。近年來，臨床檢測工作中經常發現有些老年病人梅毒螺旋體抗體檢測結果呈陽性，而無梅毒感染的任何臨床癥狀和體征，也無不潔性生活史、既往史和接觸史，給臨床診斷和病人生活帶來了一定的困擾[4]。本次研究共收集2018年11月至2019年11月海口市人民醫院13 735例60歲以上老年病人梅毒抗體檢測結果，分析老年病人梅毒抗體情況，同時探討各種疾病對老年病人梅毒生物學假陽性的影響，為臨床診斷梅毒提供依據。現將結果報道如下。

1 對象和方法

1.1 研究對象 選擇2018年11月至2019年11月海口市人民醫院就診的老年病人，年齡60～95歲，平均(73.6±8.1)歲，收集所有病人的梅毒抗體檢測結果，共計13 735例(同一病人只收集第1次檢測結果)。實驗室檢測結果至少有1項或者1項以上陽性，但是無臨床癥狀和體征、無相關病史或不潔性史，經臨床醫生綜合判斷最終不考慮診斷梅毒的病人判定為生物學假陽性。假陽性率又稱誤診率，是指實際上無病而被診斷試驗錯誤地判斷為有病的百分比。

1.2 樣本采集 一次性真空采血針(與一次性真空采血管配套使用)靜脈采血，血標本經離心分離后取上層血清當日檢查。

1.3 檢測方法 嚴格按照感染性疾病免疫測定指南中規定的梅毒感染的實驗流程操作。采用ELISA和明膠顆粒凝集試驗(TPPA)檢測梅毒密螺旋體(TP)抗體；采用甲苯胺紅不加熱血清反應素試驗(TRUST)檢測梅毒非密螺旋體抗體。具體操作流程為：首先用ELISA法檢測所有標本的TP抗體，檢測結果陽性者再用TPPA法確認，兩者均陽性則認為TP抗體陽性。最后對TP抗體檢測結果為陽性的病人用TRUST檢測梅毒非密螺旋體抗體。

1.4 檢驗試劑 TP-ELISA試劑由珠海麗珠試劑股份有限公司提供，TPPA試劑由日本富士瑞必歐株式會社提供，TRUST試劑由上海榮盛生物藥業公司提供。

1.5 檢驗儀器 酶標儀為 MK3 酶標儀,數顯混勻器為WZR-H6000。

1.6 統計學處理 采用SPSS 20.0軟件進行統計分析，計數資料用例數(百分比)表示，組間比較采用趨勢卡方檢驗，P<0.05認為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 一般情況 本次研究共計收集13 735例老年病人的梅毒檢測結果。其中TP抗體陽性597例，陽性率為4.35%;TRUST陽性160例,陽性率為1.16%，且兩者陽性率均隨著年齡增加而增高(P均<0.01)。見表1。

表1 不同年齡組老年病人抗體陽性情況

2.2 各年齡組老年病人TP抗體假陽性率 TP抗體假陽性428例，假陽性率為71.69%。隨著年齡的增高，TP抗體假陽性率增高(χ2=32.582，P<0.01)。見表2。

表2 不同年齡組老年病人TP抗體假陽性情況

2.3 各年齡組老年病人TRUST抗體假陽性率 TRUST抗體假陽性39例，假陽性率為24.38%。各年齡組間TRUST抗體假陽性率差異無統計學意義(P>0.05)。見表3。

表3 不同年齡組老年病人TRUST假陽性情況

2.4 老年梅毒抗體生物學假陽性病人合并癥情況 428例老年TP抗體生物學假陽性病人伴有的合并癥包括腫瘤(19.63%)、心血管疾病(17.06%)、DM(11.92%)、感染(11.21%)、腦梗死(9.81%)等。39例老年TRUST生物學假陽性病人伴有的合并癥主要包括腦梗死(23.08%)、自身免疫病(15.38%)、心血管疾病(12.82%)、感染(12.82%)、高血壓(10.26%)等。

3 討論

梅毒是我國《傳染病防治法》規定的法定報告和管理的傳染病之一。由于梅毒的臨床表現極為復雜，而且梅毒螺旋體又無法在體外培養，因此血清學檢測是目前診斷、治療和檢測梅毒的主要指標之一[5]。梅毒的血清學試驗有兩類，按所用抗原不同分為非密螺旋體抗體試驗(nontreponemal antibody test, NTrAT)和密螺旋體抗體試驗(treponemal antibody test, TrAT)。常用的TrAT試驗有熒光梅毒螺旋體抗體吸收試驗(fluorescent treponemal antibody absorption, FTA-ABS)、梅毒螺旋體血球凝集試驗(treponema pallidum hemagglutination assay, TPHA)和TPPA等。常用的NTrAT試驗主要包括快速血漿反應素環狀卡片試驗(rapid plasma reagin circle card test, RPR)、不加熱血清反應素試驗、性病研究實驗室試驗和TRUST等。

梅毒血清學試驗陽性者中有一些人確實是梅毒螺旋體感染者，但相當一部分陽性者沒有診斷梅毒的任何依據，特別是在老年人群中。近年來，在檢測老年病人血清標本時就常發現病人梅毒檢測陽性，而病人無臨床癥狀和體征，也無感染病史、不潔性生活史和接觸史，給我們檢驗工作和臨床醫生解釋帶來了困擾。武建國等[6]的研究表明，老年病人梅毒假陽性率偏高。在本次研究中，≥60歲老年病人TP抗體陽性率為4.35%，陳彬等[7]統計的所有住院病人梅毒抗體陽性率為1.97%。通過進一步對TP抗體陽性的老年病人分析發現，71.69%的病人最終被判為假陽性，只有約三分之一的老年病人最終被診斷為梅毒，可見老年病人梅毒的假陽性率之高。本研究中，老年TP抗體生物學假陽性病人的合并癥主要包括腫瘤(19.63%)、心血管疾病(17.06%)、DM(11.92%)、感染(11.21%)、腦梗死(9.81%)等。筆者認為之所以腫瘤病人占TP抗體假陽性病人的比例最高，可能是因為某些腫瘤抗原與梅毒螺旋體抗原存在相似的表位，腫瘤病人體內產生的抗腫瘤抗體可能與梅毒抗原發生交叉反應，亦或腫瘤病人體內產生的一些異常蛋白質干擾了試驗反應所致[8]。

在本次研究中，60歲以上老年病人TRUST陽性率為1.16%，進一步分析研究發現24.38%的TRUST陽性病人最終被判為生物學假陽性。老年病人TRUST抗體生物學假陽性者合并癥包括腦梗死(23.08%)、自身免疫病(15.38%)、心血管疾病(12.82%)、感染(12.82%)、高血壓(10.26%)等。TRUST是以心磷脂、膽固醇和磷脂酰膽堿等為抗原檢測，筆者認為腦梗死病人占TRUST假陽性病人的比例最高可能是因為TRUST試驗的原理是應用心磷脂作為抗原，測定血清中抗心磷脂抗體，而腦部損傷會產生大量抗磷脂抗體，梅毒螺旋體損傷所產生的磷脂抗體具有相似性所致[9]。其他疾病如自身免疫病、心血管疾病等也可誘導機體產生抗心磷脂抗體等，從而導致試驗出現假陽性。

綜上所述，隨著年齡的增長，老年人的生理功能退化，基礎疾病增多，老年人梅毒生物學假陽性率也隨之增高。雖然不同的方法學檢測均會導致生物學假陽性，但是多種方法學特別是NTrAT和TrAT同時檢測可以有效降低生物學假陽性率。當然，梅毒的血清學試驗陽性只提示所測標本中有抗 TP 抗體或抗類脂抗體存在，不能作為感染梅毒螺旋體的絕對依據,陰性結果也不能排除梅毒螺旋體感染。因此，臨床醫生應在掌握病人的疾病史及臨床癥狀后，結合血清學試驗結果及影響因素做出診斷，最大限度地降低誤診和漏檢率，慎重發出陽性診斷，避免對病人及家屬造成傷害而引發醫療糾紛。