胱抑素C、β2微球蛋白和視黃醇結合蛋白的測定在評估慢性腎臟疾病損害程度中的應用*

杜亞琴 張文松 牟俊杰 甘措 關欣 劉瑤 鄧菲

(1.四川省醫學科學院·四川省人民醫院腎臟內科，四川 成都 610072；2.成都市金牛區人民醫院腎臟內科，四川 成都 610082)

慢性腎臟疾病(Chronic kidney disease,CKD)已經成為全世界范圍內高度重視的公共衛生醫療的問題。有研究指出，包括歐美中在內的多個國家和地區的CKD患病率已經超過10%。中國在2012年的一項全國性流行病學調查中顯示全國慢性腎臟病患病率達到10.8%[1]。2009年KDIGO指南將CKD患者3期分為3a和3b期，1、2期劃分為早期腎臟損傷階段，3a期往后為中晚期腎臟損傷階段。由于終末期腎病對患者生命健康的危害，因此延緩疾病進程，盡可能避免患者進入尿毒癥期是本病的主要治療目的[2]。目前臨床主要通過測定血清肌酐、尿素氮、尿酸等判斷腎臟損害程度，但肌酐、尿素氮等影響因素較多，對腎組織損害的反應不夠準確和及時。有學者認為，胱抑素C(cystatin C, Cyc C)、β2微球蛋白(β2-microglobalin,β-MG)、視黃醇結合蛋白(Retinal-binding protein,RBP)檢測方便，可更加靈敏的反映腎功能損害[3-4]。為進一步證實其有效性和可靠性，本研究探討了Cys C、β2-MG、RBP測定在評估慢性腎臟疾病(CKD)腎臟損害程度中的可行性，現報告如下。

1 資料和方法

1.1 一般資料 選取2016年6月～2019年3月四川省人民醫院和成都市金牛區人民醫院收治的慢性腎臟疾病患者91例作為觀察組，健康體檢者38例作為對照組。前者根據KDIGO的分組標準將患者分為6組(1期、2期、3a期、3b期、4期、5期)。納入標準：①觀察組根據臨床表現、實驗室檢查等符合慢性腎炎、腎病綜合征、慢性腎功不全等符合KDIGO關于慢性腎臟疾病定義標準[5]，對照組為同年齡段健康體檢者。②年齡≥18歲。③臨床資料完整，兩組研究對象及(或)家屬簽署知情同意書，研究經我院倫理委員會批準。排除標準：①合并肝硬化、肺間質纖維化、硬皮病等其他慢性纖維化疾病患者。②合并惡性腫瘤、嚴重心腦血管疾病、血液系統、免疫系統疾病患者。③婦女哺乳或妊娠期。④對照組無急慢性腎臟疾病病史。⑤有腎臟替代治療的病史。

1.2 指標檢測方法 采用酶法和免疫比濁法檢測血清Cys C、β2-MG、采用免疫比濁法檢測血清及尿液RBP(嘉興博泰生物科技發展有限公司)。血清CysC含量>1.00mg/L；β2-MG>3.00mg/L；血清RBP>70 μg/mL；尿液RBP>0.7 μg/m為陽性。受檢者留取晨尿，同時抽取受檢者空腹靜脈血凝固離心后取上清采用貝克曼AU5800及雅培的C16000檢測腎功能相關指標。

2 結果

2.1 一般資料比較 對照組中男性22例，女性16例，年齡24～73歲，平均(55.59±8.62)歲；觀察組中男性47例，女性44例，年齡24～74歲，平均(56.17±8.34)歲。兩組差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。

2.2 不同組別患者不同生化指標水平比較 不同組別患者年齡、Cys C、β2-MG、尿RBP、血清RBP水平比較存明顯差異(P<0.05)，對照組患者年齡、Cys C、β2-MG、尿RBP、血清RBP水平明顯低于CKD患者，隨著CKD腎臟損害程度的上升，Cys C、β2-MG、尿RBP、血清RBP水平逐漸升高，5期CKD患者上述指標水平最高，差異有統計學意義(P<0.05)，見表1。

表1 不同組別患者不同生化指標水平比較

2.3 CKD患者Cys C、β2-MG、尿RBP、血清RBP與腎功能指標相關性分析 CKD患者尿RBR、血清RBP、Cys C、β2-MG與Urea、Scr呈正相關，與eGFR呈負相關，β2-MG與Scr的相關程度最高(P<0.001)，見表2。

表2 CKD患者Cys C、β2-MG、尿RBP、血清RBP與腎功能指標相關性分析

2.4 Cys C、β2-MG、RBP檢查對各期CKD的診斷陽性率比較 Cys C、β2-MG、血清RBP及尿RBP聯合檢測可提高對早期CKD的診斷陽性率，見表3。

表3 Cys C、β2-MG、RBP檢查對各期CKD的診斷陽性率比較[n,n(×10-2)]

3 討論

慢性腎臟疾病包括慢性腎炎、腎病綜合征、狼瘡性腎炎、糖尿病腎病等病程較長、對腎功能有所損害的一類疾病，其嚴重危害人類健康[6-8]，是臨床上常見的慢性疾病。目前臨床上認為，腎損害達到3個月即可診斷慢性腎臟疾病[9-11]，而本病由于腎組織損害難以逆轉，因此無法徹底根除，只有通過早期診斷、治療來阻止腎功能進一步惡化。

細胞外基質在腎小球和腎間質異常堆積可導致腎小球硬化、腎小管間質纖維化，使患者逐漸發展為終末期腎病，其中最值得注意的是各項因子的變化[12]，RBP實質上是肝細胞釋放的低分子量蛋白，可于正常健康人體血清、尿液中檢測出。正常情況下血清中RBP維持在一穩定的范圍內[(25～70)mg/L]，在終末期腎病患者中，血清RBP水平較正常人升高3.5-5倍。較多文獻報道，肝細胞的高爾基體復合體表面和視黃醇按照50%的比例形成復合物，在此基礎上，結合前白蛋白，以三位復合物的形式防止RBP通過腎小球濾過膜[13]。在前白蛋白分離通過腎小球濾過膜前，需要滿足復合物與靶細胞的條件，在濾過過程中，僅出現極少量RBP從尿中排出體外。基于上述因素，較多學者認為尿RBP檢測可反映近端小管損傷的敏感指標，亦有學者認為其在器官纖維化過程中起著反映作用。正常人血液中β2-MG生成量恒定，濃度較低，可自由通過腎小球，最后于近端小管內幾乎全部重吸收，其水平不受性別、年齡和代謝因素影響。CKD患者因腎小球濾過功能受損，血清β2-MG 水平升高，檢測靈敏度優于血肌酐。Cys C是一種半胱氨酸蛋白酶B的特異性抑制劑，有核細胞以恒定速率產生[14]，機體體液內均有廣泛分布，能自由地通過腎小球濾過膜并被近曲小管重吸收，相較血肌酐被性別、年齡影響較小[15]，在診斷方面優于血肌酐[16]，因此可靈敏、準確地反映腎小球濾過功能[17]。

國內目前對于Cys C、β2-MG、RBP對于腎臟病損傷的評估大多針對糖尿病腎病早期，本研究中我們涉及慢性腎臟病的各個時期。在對比不同組別Cys C、β2-MG、血清及尿RBP水平后，發現不同組別患者年齡、Cys C、β2-MG、尿RBP、血清RBP水平比較存明顯差異(P<0.05)，對照組患者年齡、Cys C、β2-MG、尿RBP、血清RBP水平明顯低于CKD患者，同時隨著CKD腎臟損害程度的上升，Cys C、β2-MG、尿RBP、血清RBP水平逐漸升高，5期CKD患者上述指標水平最高(P<0.05)，與馬紅雨等[18]結果相符。隨后采用Pearson相關系數分析得出，CKD患者尿RBR、血清RBP、Cys C、β2-MG與Urea、Scr呈正相關，與eGFR呈負相關(P<0.05)，β2-MG與Scr的相關程度最高(P<0.001)，與馬紅雨等研究中顯示相關系數為0.806相符。

Cys C、β2-MG、RBP與腎功能指標的相關性蛋白酶B表達減少或活性減弱，其降解重吸收的蛋白質的能力下降，蛋白質在近曲小管上皮細胞內沉積，損傷上皮細胞功能，從而導致腎小球硬化、腎間質損害。研究表明血清Cys C、β2-MG、RBP可顯著提高慢性腎臟病檢測的最確性，本研究在對比Cys C、β2-MG、RBP對各期CKD的診斷陽性率中發現，聯合檢查在腎臟損傷早期陽性診斷率較單一指標高，這與古麗鮮·吐爾洪等[19]結果相似。由此可觀，聯合檢測可提高對早期CKD的診斷有重要意義，可提高診斷 CKD 患者早期腎功能損傷的準確性。

4 結論

CKD患者Cys C、β2-MG、尿RBP、血清RBP水平表達高于健康人群，隨著腎臟損害程度增加而升高。CKD患者上述指標與Urea、Scr呈正相關，與eGFR呈負相關，聯合檢測提高對早期CKD的診斷具有重要意義。