牛冷凍精液人工授精技術要點

歐陽仕春

（西盟縣農業綜合執法大隊，云南西盟 665700）

牛冷凍精液人工授精技術是牛繁殖配種常用的成熟技術，人工輸精人員技術水平是影響牛人工授精妊娠率的主要因素。近年來，牛冷凍精液人工授精技術作為一項低成本、高效益的實用技術，在畜牧業生產中發揮著越來越重要的作用。根據省、市畜禽改良工作要求，西盟縣于2014年開始免費推廣牛冷凍精液人工授精技術，目前該技術已普及到全縣5鎮2鄉，受胎率在85%以上。

1 現 狀

1.1 基礎生產情況

截至2019年12月，西盟縣建成牛場9個，牛存欄17 642頭，出欄6395頭，能繁母牛6554頭，當年生仔畜3932頭；建有凍精液供應站1個，鄉（鎮）建有牛冷凍精液人工授精輸配點2個，培養人工授精技術骨干64人。縣級設有品種改良站1個，為鄉（鎮）人工授精輸配點提供液氮、凍精庫房1間，配有整套人工授精所需器械。

1.2 牛冷凍精液人工授精成果

西盟縣轄5鎮2鄉36個村民委員會3個社區367個村民小組，2014年開始免費推廣牛冷凍精液人工授精技術，主要推廣西門塔爾、短角牛、云嶺黃牛等優良品種。目前該技術已普及到全縣5鎮2鄉，共輸配發情母牛2547頭次，產雜交犢牛2280頭，受胎率在85%以上。

2 冷凍精液的貯存和運輸

冷凍精液應保存在保溫效果良好的液氮罐中，并保證所有精液浸在液氮中，每周檢查1次液氮罐，如發現液氮消耗顯著增加，或容器外殼掛霜，應及時更換容器。液氮不足總容量的1/3應及時補充，防止因缺少液氮而使溫度回升導致精子死亡。液氮和凍精的液氮罐應放在陰涼避光處，避免陽光直射和接觸揮發性氣體。移動和運輸液氮和凍精時應輕拿輕放，不得傾斜，以免液氮溢出，嚴禁用任何物品將罐口封嚴。提取冷凍精液時精液在罐口的空氣中停留的時間越短越好，時間不得超過10 s。

3 技術要點

3.1 掌握母牛生殖規律

黃牛8～16月齡性成熟（初情期），發情周期18～23 d，平均21 d，懷孕期282 d；水牛13～24月齡性成熟（初情期），懷孕期305 d。

3.2 配種母牛壯膘

配種期到來之前，適齡母牛應具有中等體況。體況較差的牛可適當調整飼料配比，增加營養和補食次數、并延長放牧時間、割草喂牛，促使母牛發情排卵。平時要注意營養平衡，防止因蛋白質和能量飼料攝入過多造成母牛過度肥胖，影響配種質量。

3.3 掌握母牛發情癥狀

發情是母牛人工授精的前提，接受爬跨是母牛發情的標志。母牛發情時會出現一系列的發情癥狀，根據癥狀來進行準確的發情鑒定是能否全配全準的關鍵，其發情表現為4個階段。

3.3.1 發情前期

母牛精神不安、尿頻、爬跨公牛、陰道濕潤呈粉紅色、外陰部稍有腫脹。

3.3.2 發情盛期

陰門明顯腫脹、黏液增多呈雞蛋清樣、子宮頸外周松弛，主動舉尾拱腰穩穩當當地接受試情公牛的爬跨，愿意交配。

3.3.3 發情后期

外陰腫脹開始消失、黏液變稠混濁，試情公牛仍追隨，但母牛不讓接近。

3.3.4 發情末期

發情癥狀完全消失、黏液呈黃色塊狀，試情公牛已不跟隨母牛。

3.4 適時輸精

3.4.1 準確的發情觀察

發情是母牛卵巢卵泡發育的外在表現，一般情況下，母牛發情后12～16 h排卵，可以在母牛表現精神平穩，發情母牛不讓試情公牛爬跨后12～18h開始輸精。

3.4.2 準確掌握輸精時間

母牛發情持續時間為4～18 h，排卵時間在發情結束后10～12 h，因此，輸精的最佳時間應在母牛發情后的10～12 h（外陰部腫脹開始消失，由陰道流出的黏液變黏稠）。為確保受胎率，可在母牛發情接受爬跨后8～12 h進行第一次輸精，間隔8～12 h進行第二次輸精。一般來說，年老體弱的母牛發情持續期較短，排卵較早，配種時間要適當提早。青年母牛發情持續期較長，排卵較晚，配種時間要適當延遲。群眾常說“老配早，少配晚，不老不少配中間”就是這個道理。

3.4.3 準確掌握輸精部位

牛的適宜輸精部位是子宮體，人工授精時可將精液輸送到子宮體部位，以保證推出的精液流入2個子宮角內。如果輸精時間較晚（如直腸觸診卵泡已經排卵），則可以將精液輸到排卵卵巢側的子宮角內。

3.5 直腸把握輸精法

3.5.1 人工輸精前的準備

（1）輸精器械的準備。輸精槍、消毒輸精外套管、直腸檢查塑料長臂手套、鑷子和剪刀。

（2）發情牛保定與消毒。將輸精適期的母牛牽（趕）入配種保定架內，保定好后用栓尾繩將尾巴吊高系于一側或專人拉住牛尾，用清潔溫水把外陰周圍洗干凈，再用0.1%的高錳酸鉀溶液清洗消毒或用酒精棉球消毒母牛外陰。

（3）輸精技術人員的準備。穿戴好工作服，將雙手指甲剪短并磨光，一只手戴上長臂手套，涂上潤滑劑（清水、肥皂或專用潤滑劑），另一只手可戴上一次性手套。

（4）冷凍精液的解凍。先準備一盆37～38 ℃恒溫水，將細管凍精從液氮中迅速取出后手拿細管上端（封裝精液后的封口）立即放入37～38 ℃溫水中并輕緩游動10 s使管壁受熱均衡后取出。

（5）精液細管裝槍。解凍后，取出精液并用消毒衛生紙擦干細管外壁水分，然后用酒精燈火焰或者75%酒精消毒好的細管剪（剪刀）距細管封口端1.2～1.5 cm處剪去封口，將棉塞端平行裝入輸精槍中，注意裝槍前應把輸精鋼芯退到比細管稍長的位置，再將裝有精液細管的輸精槍裝入輸精外套管內，剪口端應與輸精外套管緊密連接，防止精液推出后回流到輸精外套管內，在進入母牛生殖道前應避免任何污染。

3.5.2 輸精

（1）輸精槍插入和定位。一律采用直腸把握輸精法，輸精人員先拎起母牛尾巴下端將尾巴根抬起，輕輕觸摸刺激肛門，使肛門括約肌松弛；然后將五指并攏呈錐形緩緩插入直腸內（應避免與努責的直腸蠕動相反方向移動），清除直腸淺部的糞便，用衛生紙擦拭母牛外陰；臂膀用力往下按壓使陰門張開（或助手將陰門掰開），另一只手持輸精器（槍），以35°～45°（避開尿道口）自陰門作斜上方緩緩插入陰道，進入陰道外口后改為水平或向下方插入陰道內。

（2）輸精槍通過子宮頸。當輸精槍頭插到外子宮頸口時，頂破保護膜，將直腸中手指向子宮口或下方移動，用食指、中指、無名指和小指將子宮頸托起，掌心向上、小指向后，握住子宮頸（8 cm），但防止緊握；左右手協同配合，使輸精槍前端搭在小指上，引導槍頭插入外子宮頸口內，使輸精器越過子宮頸管皺襞，到達子宮頸管中央部時，握子宮頸的手逐漸往前推進，食指在內子宮頸口位置，指頭相互配合把握好子宮頸并左右手配合將輸精槍頭部插入到子宮頸管深部5～6 cm（子宮頸管深部注入法）或子宮體分叉處（子宮內注入法）以保證推出的精液可注入2個子宮角內。如果輸精時間較晚（如直腸觸診卵泡已經排卵），則可以將精液輸到排卵卵巢側的子宮角內，以保證到達授精部位的有效精子數。

（3）注入精液。確認輸精器已進入子宮頸管深部（5～6 cm）或子宮體分叉處（輸精槍應稍向后退出一點）向前推動輸精槍鋼芯，緩慢注入精液（子宮頸管深部注入法）或注入到子宮體分叉處（子宮內注入法），也可注入到有卵泡發育一側子宮角內或兩個子宮角內，每角各一半（用于超排后輸精）；注入后，為了防止精子的逆流，用直腸里的手繼續把握子宮頸管30 s至1 min，再緩慢地將輸精槍撤出，并將子宮頸稍向上提動（特別是子宮頸開口較大的母牛）。取出輸精槍后，應觀察輸精槍外套管，檢查黏附的黏液和輸精槍前端是否有血跡等情況。

（4）記錄。輸精完成后應及時、詳細記錄配種情況，如牛編號、胎次、上次產犢時間、發情時間、配種時間、配種次數、精液用量、配種人員、公牛精液等信息。

3.6 加強營養管理

母牛配種后1～2 h，不要劇烈運動，盡量避免飲水或吃食過飽。對妊娠牛，需改善飼養條件，保證母體與胎兒正常發育，配種后15 d內夜間補料，同時加喂麩皮1～1.5 kg，并供給含有少量食鹽的清潔飲水，促進受精卵著床。母牛懷孕期間，喂給含蛋白質、維生素和礦物質豐富的飼料，以適應母牛生長以及胎兒、胎盤、子宮體發育的需要。圍產前期母牛應補充低鉀、低鈣飼料，減少產前和產后乳房水腫，還應該提供足量的維生素A、維生素D、維生素E（也可肌內注射），以防胎衣不下。嚴禁投喂發霉、變質、冰凍、有毒、酸度過大或有強烈刺激性的飼料，以防腸炎、流產、弱胎或死胎。牛舍環境要安靜，防止因過度驚嚇、擠撞、滑跌、鞭打或打架等引起流產。