不同水平三丁酸甘油酯對胡子鯰生長及肝功能指標的影響

王振勇

（遼寧禾豐牧業股份有限公司，遼寧沈陽110164）

隨著水產養殖業的高度集約化發展，水產養殖面臨越來越多的應激因素，如水質污染、有害物質侵襲、飼養管理不當等，這些不同程度應激因素導致水生動物的抵抗能力下降，腸炎等疾病頻發，給生產帶來嚴重的經濟損失。

丁酸鈉或者三丁酸甘油酯作為一種綠色新型飼料添加劑，在畜禽生產中是一種有效的替代抗生素方案。無論是丁酸鈉還是三丁酸甘油酯，在動物腸道中發揮作用的是丁酸。丁酸是腸道中存在的一種短鏈脂肪酸，在調節胃腸機能、腸道pH、胃腸道微生態平衡以及誘食方面發揮重要作用。然而丁酸極易揮發，在體內吸收代謝迅速，半衰期很短，目前生產實踐中大多是以丁酸鈉或者三丁酸甘油酯的形式添加。同時丁酸鈉易吸潮結塊且有特殊臭味，不利于其廣泛應用。而三丁酸甘油酯口服耐受性比丁酸鈉更好，可以直接作用于腸道，物理性質穩定，適合各類飼料加工的生產工藝。

目前三丁酸甘油酯在畜禽養殖中已經得到廣泛應用，在水產上也有研究報道。喬麗紅等[1]將添加0、250、500、1 000 mg/kg 三丁酸甘油酯的試驗飼料投喂建鯉，42 d后發現試驗組建鯉的增重率與對照組相比分別提高了5.93%、9.19%、13.21%，提高了肥滿度，降低了餌料系數，且腸道中超氧化物歧化酶（SOD）和一氧化氮合酶活性增強，降低了丙二醛和一氧化氮的含量，從表觀層面說明三丁酸甘油酯能夠提高建鯉生長性能和肝體比，增強腸道抗氧化能力。唐啟峰等[2]在南美白對蝦飼料中分別添加0.5、1.0 g/kg 和1.5 g/kg三丁酸甘油酯，研究結果顯示各試驗組的南美白對蝦增重顯著提高，餌料系數顯著降低，腸道有益菌群數量增加，致病性弧菌數量明顯減少，說明三丁酸甘油酯能夠促進腸道有益菌的生長，降低疾病暴發率。翟秋玲等[3]的研究表明三丁酸甘油酯不僅能夠提高菊黃東方鲀生長性能，增強腸道消化酶活力和有益菌的數量，還能提高腸道絨毛高度和寬度。姜鶯穎等[4]的研究表明添加1 kg/t三丁酸甘油酯可以顯著提高異育銀鯽生長性能，增強肝胰臟中轉氨酶活性，提高機體抗嗜水氣單胞菌感染能力，提高魚體免疫力。

丁酸鈉易吸潮結塊且有特殊臭味，不利于其廣泛應用。三丁酸甘油酯是丁酸和甘油酯化后的產物，屬于丁酸鹽，其可順利過胃而不被胃酸分解，在腸道中經胰脂肪酶分解，釋放出三個游離的丁酸分子，作用于各組織器官被吸收利用。三丁酸甘油酯作為丁酸的前體物，具有脂肪香味、代謝緩慢半衰期長[5]、安全無毒副作用，在促進動物腸道健康發育、加快營養物質消化吸收、提高機體免疫力、預防疾病和調節機體代謝等方面發揮著重要的作用[6-7]，已被大量應用于實際生產過程中。

三丁酸甘油酯在畜禽生產中得到了廣泛應用，在水產中應用較少。本文旨在研究三丁酸甘油酯對胡子鯰生長及其肝功能指標的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

在印尼實嘉金豐車間進行試驗飼料的生產。基礎日糧組成及營養水平見表1，在基礎日糧中分別添加三丁酸甘油酯0、0.05%、0.075%、0.1%(純度50%),配制成4種試驗飼料。

1.2 試驗時間與試驗動物

試驗于2019年5月13日～2019年7月21日進行。試驗動物選擇胡子鯰魚種。

表1 基礎日糧組成和營養水平（風干基礎）(%)

1.3 試驗地點及飼養管理

試驗在公司池塘內設置的網箱中進行，網箱規格1 m3。試驗魚初始平均體重約5.26 g，水溫26.5～28.6 ℃，水質pH 7.5～8.5，溶氧4～6 mg/L，氨氮0.02～0.2 mg/L。共設置4 個處理組，每個處理組4 個重復，每個重復200尾魚。對照組為基礎日糧配方，開始試驗前用對照組飼料預飼喂14 d，正式試驗8 周，各試驗組分別飼喂4種試驗飼料，每天飼喂3次。

1.4 樣品采集測定

試驗期觀察、記錄胡子鯰死亡數，計算成活率。試驗開始和結束時每箱稱重，計算增重。記錄每天的攝餌量，同時每次飼喂后用虹吸的方法收集殘餌。試驗結束后將所有的殘餌收集在一起，按烘干基礎條件烘干，計算攝餌量和餌料系數[8]。

試驗結束時，每個處理隨機取25尾魚，稱取體重和測量體長，分離內臟后，稱取其重量，再從內臟中分離出肝胰臟并稱其重量，計算肥滿度、臟體指數、肝體指數[8]。

1.4.1 生長性能

成活率（SR，%）=末尾數/初尾數×100

特定生長率（SGR，%/d）=（Ln 試驗平均末重-Ln試驗平均始重）/試驗天數×100

攝餌量（g/尾）=總投餌量（g/尾）-總殘餌量（g/尾）餌料系數（FCR）=攝餌量（g/尾）/增重（g/尾）

1.4.2 形體指標

肥滿度（CF，g/cm3）=100×體重（g）/[體長（cm）]3

臟體指數（%）=100×內臟總重（g）/體重（g）

肝體指數（%）=100×肝胰重（g/尾）/體重（g/尾）

1.4.3 肝功能指標

肝臟和血漿中谷丙轉氨酶（ALT）和谷草轉氨酶（AST）活性均采用南京建成生物工程研究所的試劑盒測定，具體操作流程：準確稱取組織重量，按重量(g)∶體積(mL)=1∶9 的比例，加入9 倍體積的生理鹽水，冰水浴條件下機械勻漿，2 500 r/min，離心10 min，取上清液待測。將基質液20 μL（37 ℃已預溫）與待測樣品5 μL 混勻后放入測定孔中，講基質液20 μL（37 ℃已預溫）放入對照孔中，37 ℃水浴30 min。將2，4-二硝基苯肼液20 μL放入測定孔中，將2，4-二硝基苯肼液20 μL 與待測樣品5 μL 混勻后放入對照孔中，37 ℃水浴30 min。輕輕水平搖勻96孔板，室溫放置15 min 后，在510 nm 波長下用酶標儀測各孔OD值，查標準曲線，求得相應AST或ALT活性。

1.5 數據分析

結果以“平均值±標準差”表示，數據處理與分析采用SPSS 16.0統計軟件進行方差分析和差異顯著性比較，以P＜0.05作為差異顯著性判斷標準。

2 結果

2.1 不同水平三丁酸甘油酯對胡子鯰生長性能影響(見表2)

表2 不同水平三丁酸甘油酯對胡子鯰生長性能影響

由表2可知，三丁酸甘油酯影響胡子鯰的試驗末重、特定生長率、餌料系數和成活率。三丁酸甘油酯0.05%和0.075%添加組試驗末重、特定生長率顯著高于對照組（P＜0.05），餌料系數顯著低于對照組（P＜0.05）；對照組和0.1%添加組試驗末重、特定生長率和餌料系數均為差異不顯著（P＞0.05）；三丁酸甘油酯0.05%、0.075%和0.1%添加組成活率顯著高于對照組（P＜0.05），三丁酸甘油酯0.05%，0.075%和0.1%添加組，三組間成活率差異不顯著（P＞0.05）。

2.2 不同水平三丁酸甘油酯對胡子鯰形體指標的影響(見表3)

由表3 可知，與對照組相比，添加三丁酸甘油酯0.05%、0.075%和0.1%添加組肥滿度、臟體指數和肝體指數顯著高于對照組（P＜0.05）；而添加三丁酸甘油酯的三個試驗組間肥滿度、臟體指數和肝體指數無顯著變化（P＞0.05）。

表3 不同水平三丁酸甘油酯對胡子鯰形體指標影響

2.3 不同水平三丁酸甘油酯對胡子鯰肝功能指標的影響(見表4)

表4 不同水平三丁酸甘油酯對胡子鯰肝功能指標的影響

AST、ALT 在肝臟中合成，若肝臟異常時，肝臟中的AST、ALT 就會釋放到血清中，使血清AST 和ALT含量升高。本試驗中試驗組與對照組血清AST、ALT活性遠小于肝胰臟AST，ALT 活性，表明魚體的肝胰臟功能正常，肝胰臟細胞沒有受到明顯的損傷；各試驗組肝胰臟中的AST 和ALT 與對照組相比均無顯著性差異，試驗組血清中AST 和ALT 活性顯著低于對照組（P＜0.05）；三丁酸甘油酯0.05%、0.075%和0.1%添加組，三組間血清中AST 和ALT 活性差異不顯著（P＞0.05）。

3 討論

3.1 不同水平三丁酸甘油酯對胡子鯰生長性能影響

魚類的生長受到內在因素與外在因素的制約，外在因素包括飼料、水溫、溶氧量、光照、鹽度、pH、飼養密度、水流和水質等因素影響。本試驗中，排除水溫、水質等環境因素的影響外，三丁酸甘油酯是唯一的差異性影響因素。

研究表明，三丁酸甘油酯能夠提高畜禽生長性能。劉統等[9]研究發現，在斷奶仔豬飼糧中添加0.1%、0.2%三丁酸甘油酯均能有效改善仔豬日增重，降低料重比[9]。Antongiovanni等[10]將0.2%、0.35%、0.5%、1%三丁酸甘油酯添加到肉雞日糧中，肉雞體重均明顯增加。喬麗紅等[1]添加250、500、1 000 mg/kg 三丁酸甘油酯使建鯉增重率和特定生長率均有不同程度提高，其中添加1 000 mg/kg 三丁酸甘油酯組達到顯著水平。本試驗在飼料中添加不同水平的三丁酸甘油酯使得胡子鯰生長性能得到不同程度的提高，其中添加0.05%試驗組在試驗末重、特定生長率、餌料系數和成活率等生長性能指標方面都達到顯著改善水平，而添加三丁酸甘油酯三個處理間各指標差異不顯著。三丁酸甘油酯作為一種重要的短鏈脂肪酸，具有脂肪香味，可提高日糧適口性。日糧酸化后可刺激味蕾，使唾液分泌增多，增進食欲，經胰脂肪酶分解后釋放出丁酸。一方面可降低胃腸道pH，提高消化酶活性，進而提高飼料轉化率；另一方面，丁酸在pH為4～6時不易被分解，可直接穿過胃和小腸進入后腸，被腸上皮細胞吸收利用，成為重要能量來源，促進腸道的生長發育，提高生長性能[11]。

3.2 不同水平三丁酸甘油酯對胡子鯰形體指標的影響

肥滿度是用體重和體長的關系來表明魚體的體型生長狀況。本研究結果顯示三丁酸甘油酯0.05%、0.075%和0.1%添加組肥滿度顯著高于對照組（P＜0.05）；當三丁酸甘油酯添加量達到0.05%以后，三個處理間肥滿度無顯著差異（P＞0.05）。

魚類屬于變溫、低等動物，其最主要的免疫器官是胸腺、腎臟和脾臟[12]。免疫器官指數的高低也直接反映免疫器官發育程度，數值越高，則免疫功能越強，抵御致病菌入侵的能力越強，機體的免疫力越強[13]。臟體指數和肝體指數是衡量魚類內臟及肝胰臟生長發育狀況的重要指標之一。本研究結果顯示三丁酸甘油酯0.05%、0.075%和0.1%添加組臟體指數和肝體指數顯著高于對照組（P＜0.05）；當三丁酸甘油酯添加量達到0.05%以后，三個處理間臟體指數和肝體指數無顯著變化（P＞0.05）。

本研究表明適量添加三丁酸甘油酯可以提高胡子鯰肥滿度，增加臟體指數和肝體指數，從而提高胡子鯰生長性能，促進胡子鯰免疫器官的發育。

3.3 不同水平三丁酸甘油酯對胡子鯰肝功能的影響

ALT 和AST 是反映肝功能是否正常的重要指標[14]，也是反映機體氨基酸代謝情況的重要酶，主要存在于肝細胞中，在機體蛋白質代謝中起著重要作用[15]。當肝臟受到損傷時，組織內這種酶的活性就會降低。大量ALT、AST 滲入了血液，肝臟的ALT、AST 活性會明顯下降，而血液中ALT、AST 的活性升高。

本試驗中試驗組與對照組血清AST、ALT 活性遠小于肝胰臟AST、ALT 活性，表明魚體的肝胰臟功能正常，肝胰臟細胞沒有受到明顯的損傷；各試驗組肝胰臟中的AST 和ALT 與對照組相比均無顯著性差異，試驗組血清中AST 和ALT 活性顯著低于對照組（P＜0.05）；三丁酸甘油酯0.05%、0.075%和0.1%添加組，三組間血清中AST 和ALT 活性差異不顯著（P＞0.05），表明本試驗劑量的三丁酸甘油酯在長期投喂過程中不會對胡子鯰的肝胰臟造成損傷，且可保護肝功能，提高轉氨酶的轉運水平，加快氨基酸的代謝過程。

4 結論

本文通過為期8周的生長試驗，研究表明不同含量的三丁酸甘油酯對胡子鯰生長性能、形體指標及肝功能的影響。結果表明，添加0.05%的三丁酸甘油酯不僅能提高胡子鯰增重、特定生長率、成活率以及魚體肥滿度，降低餌料系數，而且不會對肝胰臟造成負擔，還能降低血清中轉氨酶活性，提高臟體指數和肝體脂數，保護肝功能。