羊鮮精常溫保存技術研究

肖廣慶

（洛陽市畜牧良種繁育推廣中心，河南 洛陽471013）

在目前凍精人工授精技術尚未成熟之際，本交及鮮精人工授精仍然是羊場主要的繁殖方式。但因為鮮精保存技術領域發(fā)展滯后，傳統的稀釋方法因保存時間短、稀釋倍數低，嚴重影響種羊利用效率及良種覆蓋率。筆者探索羊鮮精稀釋液科學配方，擬在不改變原精生理環(huán)境前提下，加入精子可吸收能量及營養(yǎng)物質，為精子運動補充能源，同時保護精子少受損傷，抑制精子過量耗能，達到保存時間延長、活力衰減緩慢等效果。

1 羊人工授精鮮精處理技術

1.1 羊場現有配種繁殖技術方案

目前，大多羊場仍采用本交及鮮精人工授精技術。專用稀釋液市面較少，大多羊場采用0.9%生理鹽水、2.9%枸櫞酸鈉或脫脂鮮奶等方式臨時稀釋，或直接用現采鮮精直接配種。稀釋比例通常在1∶1～1∶3，每只母羊輸精0.2～0.3 ml，兩次輸精完成配種。

1.2 現有技術的缺點

傳統稀釋方法稀釋比例低、保存時間短。有些羊場在種羊充足條件下采取原精直接輸精。要求鮮精短時間必須用完，同時好的種羊由于稀釋比例問題只能配少量母羊，采精和配種兩邊都要有人，耗費人力，種羊利用效率低下。

2 技術方案

通過測試羊原精pH 值及滲透壓，將羊鮮精稀釋液配方調整至和原精基本一致，然后稀釋觀察鮮精活力、運動狀態(tài)及頂體完整率、畸形率的質量指標及存放時間，達到延長保存時間、減少活力衰減等效果。

采集新鮮公羊精液，在37℃對精子的表觀活率、活力及密度進行質量評定：用帶有刻度的集精杯計算每次采精體積；在顯微鏡100 倍視野下觀察鮮精的表觀活率，0級為沒有波動，5 級為快速漩渦狀波動；在400 倍視野下評定鮮精活力，用密度儀測出精液密度；只有精液表觀活率為4 級，活力大于0.65且密度大于20億/ml才能用于稀釋配種；等溫加入稀釋液，按原精與稀釋液1∶5～1∶10 比例稀釋。稀釋后用保溫棉套罩住集精杯配種待用。

3 專用稀釋液與現有稀釋液對比

3.1 不同稀釋比例常溫保存時間對比（見表1）

用同只羊精液等分后用不同稀釋液按不同比例稀釋，放置常溫環(huán)境下定時用顯微鏡觀察活力，直至精子停止運動，對比各稀釋液保存時間。結論：目前常用稀釋液常溫保存稀釋比例1∶2 以內可保存2～3 h，稀釋比例大于1∶3 時，保存時間在1 h 以內。而專用稀釋液稀釋比例越大保存時間越長，最長可達16 h。

表1 不同稀釋液常溫保存時間及稀釋比例情況

3.2 專用稀釋液與常用稀釋液不同稀釋比例受胎率對比（見表2）

表2 不同稀釋液不同稀釋比例受胎率對比

結論：常用稀釋液稀釋比例一般在1∶3 以內，大多1∶1或1∶2稀釋，超過1∶3稀釋受胎率會有影響，而專用稀釋液在1∶10以內均有較高受胎率。按照每只羊輸精1次0.2 ml（兩次輸精），1只種羊兩次采精平均2 ml，專用稀釋液可配50～100只母羊（見表3）。

表3 1只種羊可配母羊頭數

4 討論

羊專用稀釋液能夠有效延長鮮精保存時間，只需常溫避光隔熱保存，簡單實用，可有效提高種公羊利用效率，增加良種覆蓋率，減少人工授精人員配置，提高勞動效率。同時鮮精稀釋液制作工藝操作簡單，生產成本低，可有效提高人工授精受胎率及人工授精效率，便于大規(guī)模推廣應用。