血清脂肪細胞型脂肪酸結合蛋白對非酒精性脂肪性肝病的預測價值

汶倩 王曉葉 趙麗 張哲 李武良 趙曙光 陶梅

非酒精性脂肪性肝病 (non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)已成為我國第一大慢性肝病和健康體檢肝酶異常的首要原因[1]。肝組織活檢是 NAFLD診斷的“金標準”，但因其有創且昂貴，臨床應用并不普遍[2]。目前常用的篩查技術有腹部B超、CT、MRI等，也都存在不同的局限[3]。因此，尋找一種簡便、準確的血清標志物預測NAFLD成為研究熱點。本文擬通過研究NAFLD患者血清脂肪細胞型脂肪結合蛋白(A-FABP)水平的變化，提出A-FABP預測界值，評價血清A-FABP預測NAFLD的價值及效能，為A-FABP的臨床應用提供依據。

資料與方法

一、研究對象

選擇2019年6月至2019年7月西安交通大學醫學院附屬西安市第九醫院健康體檢發現的NAFLD患者86例。入選標準：根據中華醫學會肝病學分會2010 年《非酒精性脂肪性肝病診療指南》臨床診斷標準[4]。NAFLD超聲標準：肝區近場回聲彌漫增強,肝腎脾回聲差異,肝回聲>腎脾回聲；遠場逐漸衰減；肝內靜脈結構模糊不清；肝臟輕度或中度腫大,邊緣圓鈍；肝內血流信號減少或不易顯示。肝右葉包膜及橫隔回聲顯示不清。并排除病毒性肝炎、自身免疫性肝炎、藥物性肝損傷、肝硬化、膽道梗阻、嚴重感染、糖尿病、長期飲酒者及遺傳疾病等。同時選取86例年齡、性別相匹配的體檢健康者為對照組。

二、研究方法

(一)超聲檢查 選用PHILPS EPIQ5型號超聲診斷儀,探頭頻率設置在2.0～5.0 MHz,所有研究對象檢查前至少禁食8 h，仰臥位和左側臥位接受腹部超聲掃描,觀察受檢者肝臟外形、肝實質回聲、脈管系統等。所有入選對象超聲檢查均為同一醫生操作。

(二)體格數據測定 測量所有研究對象的身高、體重、腰圍,并計算體質量指數(BMI)=體重/身高(kg/m2)。腰圍的測量分別在肋骨下緣和髂前上嵴的中間水平。

(三) 生化指標的測定 所有研究對象禁食12 h，次晨采靜脈血，分離血清。空腹血糖(FPG)、甘油三酯(TG)、總膽固醇 (TC)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇 (HDL-C)、丙氨酸氨基轉移酶(ALT)、天冬氨酸氨基轉移酶(AST)、γ-谷氨酰轉肽酶(γ-GT)和尿酸(UA)均采用東芝X8儀器，美康生物科技有限公司試劑盒測量。超敏C反應蛋白(hsCRP)采用西門子BNII儀器及其提供的試劑盒進行測量，hsCRP<3.0正常，hsCRP≥3.0 偏高。

(四)血清中 A-FABP和 TNF-α測定 采用ELISA法檢測定血清中 A-FABP 和 TNF-α，試劑盒購自伊艾博科技有限公司。

三、統計學分析

結 果

一、兩組一般情況比較

NAFLD組體重、BMI、腰圍均顯著高于對照組(P<0.01，表 1)。

表1 非酒精性脂肪性肝病和對照組一般指標比較

二、兩組間生化指標的比較

NAFLD組血清ALT、AST、UA、γ-GT、FPG、TG、TC、LDL-C、hsCRP 、TNF-α、A-FABP均顯著高于對照組，而 HDL-C顯著低于對照組 (P<0.05，表2)。

表2 非酒精性脂肪性肝病和對照組生化指標比較

三、A-FABP為診斷NAFLD的ROC曲線

ROC曲線下面積為0.989(95%CI0.979～1)，A-FABP分界點82.43 pg/mL對應的正確診斷指數最大，因此，可以把它作為最佳診斷分界點(圖1)。

圖1

四、A-FABP分界點下預測NAFLD的效能

預測NAFLD的靈敏度97.7%，特異度為93.0%，陽性預測值93.3%，陰性預測值97.6%，總的符合率95.3%，一致性檢驗的統計量Kappa為0.907。

五、NAFLD組血清A-FABP與各指標相關分析

Pearson或Spearman相關分析顯示A-FABP和BMI、TNF-α、UA呈現正相關，和HDL-C呈負相關，相關系數分別是0.296、0.274、0.370、-0.250(表3)。

表3 非酒精性脂肪肝患者血清A-FABP與臨床指標的相關性分析

六、NAFLD組血清A-FABP與相關因素多元線性回歸

以A-FABP為因變量，對其各種可能的影響因素(BMI、TNF-α、UA和HDL)進行多元線性回歸分析顯示 TNF-α及UA進入最后方程,成為影響A-FABP的主要因素(表4)。

表4 A-FABP與相關指標的線性回歸分析

討 論

肝臟脂肪變與肝臟炎癥損傷和纖維化密切相關，并可預測MS和2型糖尿病的發病風險[5-6]。B超臨床應用最多，但診斷輕度脂肪肝敏感性低，特異性亦有待提高。受控衰減參數(controlled attenuation parameter，CAP)較B超容易高估脂肪變的程度，其區分不同程度脂肪變的診斷閾值及其動態變化的臨床意義尚待探索[7]。磁共振波譜分析能夠檢出>5%的肝脂肪變，準確性很高，但因花費高而難以普及[8]。應用BMI、腰圍、血清TG和γ-GT水平等指標組合的肝脂肪變指數、脂肪肝指數等，對脂肪肝的診斷性能存在種族群體、年齡等差異[9]，因此，尋求血清學標志物預測NAFLD一直是研究熱點。A-FABP作為聯系代謝紊亂與炎癥反應的關鍵因素，而受到研究者的重視。

A-FABP又稱 aP2 或 FABP4，屬于小分子量細胞內脂肪酸結合蛋白超家族,主要表達于脂肪組織、巨噬細胞、樹突狀細胞及內皮細胞等。A-FABP通過調節炎癥反應、能量穩態、代謝平衡等不同的作用來調節MS各組分的發展。本研究發現NAFLD患者血清A-FABP明顯增高，與Xu等[10]研究結論相似。NAFLD作為MS的一個臨床特點或者肝臟表現，本研究發現NAFLD組中作為MS的重要指標的TG、TC、LDL-C、HDL-C、UA、FPG與對照組均存在顯著差異，這和以往研究相同[6, 11, 12]。研究證明輕中度肝酶的升高常常是NAFLD臨床癥狀還未出現前唯一異常的指標，可作為NAFLD獨立預測因素[13]，我們的研究顯示NAFLD組AST、ALT、γ-GT 均明顯升高。根據A-FABP診斷NAFLD的ROC曲線，得出其分界點為82.43 pg/mL，在此分界點下得出診斷NAFLD靈敏度為97.7%，特異度93.0%，總的符合率95.3%，一致性檢驗的統計量Kappa為0.907。因此，可以把A-FABP=82.43 pg/mL作為最佳診斷分界點。當然，還需要通過更大的樣本量來驗證其可靠性。

本研究發現NAFLD患者血清A-FABP及TNF-α水平明顯高于對照組，在單因素相關分析及多元線性回歸分析中，A-FABP水平與TNF-α、UA正相關，與Kim等[14]研究結論一致。肝臟庫普弗細胞(Kupffer cell, KC)是防治 NAFLD 的重要靶細胞[15]。KC是肝內唯一產生 A-FABP 的細胞，動物實驗表明A-FABP通過增強代謝性LPS增高誘導KC的炎癥反應，分泌炎癥介質如 TNF-α和白細胞介素IL-1β等, 導致NAFLD 的發生和進展，A-FABP 抑制劑 BMS309403 對急慢性肝損傷有治療作用[16]。因此， NAFLD患者血清A-FABP 表達上調，且與TNF-α、UA正相關體現了其在代謝紊亂及炎癥間的重要中介。

綜上所述， A-FABP作為聯系代謝紊亂與炎癥反應的關鍵因素，其血清水平>82.43 pg/mL作為NAFLD預測指標具有良好的預測價值，其預測價值是否在更大樣本的人群中依然良好需要進一步研究。