采用免疫透射比濁法對疑似肝腎疾病患者進行血清視黃醇結合蛋白檢測的意義

劉志偉，陳書恩★，吳小花

（1.深圳市羅湖醫(yī)院集團醫(yī)學檢驗中心，廣東 深圳 518021;2. 深圳市羅湖區(qū)婦幼保健院檢驗科，廣東 深圳 518021）

臨床上常見的肝腎疾病有肝炎、肝硬化、肝癌、腎小球腎炎、糖尿病腎病、腎功能衰竭等。有研究資料顯示，采用免疫透射比濁法對疑似肝腎疾病患者進行血清RBP 檢測診斷其病情的準確率較高[1]。在本次研究中，筆者主要探討采用免疫透射比濁法對疑似肝腎疾病患者進行RBP 檢測的意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本次研究對象是2019 年7 月至11 月期間某醫(yī)院收治的50 例肝病患者、50 例腎病患者及在該院進行體檢的50例健康人。將50 例肝病患者設為A 組。將50 例腎病患者設為B 組。將50 例健康人設為C 組。在A 組研究對象中，男女的比例為30:20 ；其年齡為27 ～81 歲，平均年齡為（54.15±6.23）歲；其中有25 例急性肝炎患者，有17 例肝硬化患者，有8 例肝癌患者。在B 組研究對象中，男女的比例是27:23 ；其年齡為27 ～80 歲，平均年齡為（53.84±6.20）歲；其中有24 例腎小球腎炎患者，有16 例糖尿病腎病患者，有10 例腎功能衰竭患者。在C 組研究對象中，男女的比例為28:22 ；其年齡為25 ～81 歲，平均年齡為（53.58±6.19）歲。三組研究對象的一般資料相比，P ＞0.05，具有可比性。

1.2 方法

1）采用免疫透射比濁法對三組研究對象進行血清RBP檢測，方法為：檢測使用的儀器為全自動生化檢測儀。在清晨采集研究對象的空腹靜脈血4 ml 作為樣本。將研究對象的靜脈血進行離心后獲取4 μl 的血清。在血清樣本中添加240 μl 的試劑A1（由廠家提供），然后放置在37℃的環(huán)境下進行孵育，連續(xù)孵育16 個循環(huán)，并讀出第一點吸光值B1。然后，在血清樣本中添加50 μl 的試劑A2（由廠家提供），在37℃的環(huán)境下進行孵育，連續(xù)孵育16 個循環(huán)，并讀出第二點吸光值B2。待測血清的吸光值B=B2-B1。血清RBP 的水平= 〔（B2-B1）/ 校準品吸光值〕 ×RBP 校準濃度。2）進行空白試驗的方法為：將濃度為0.9% 的生理鹽水作為樣本，按照上述檢測方法連續(xù)檢測三次，并計算樣本的吸光值。3）進行精密度試驗的方法為：根據(jù)美國臨床實驗室標準化協(xié)會（CLSI）規(guī)定，分別取低、中、高三個濃度的血清樣本，按照上述檢測方法重復檢測20 次，連續(xù)檢測20 d。4）進行回收試驗的方法為：獲取新鮮血清一份，分別添加三個不同濃度的標準樣品（由廠家提供），然后按照上述測定方法對標準樣品進行測定。5）進行穩(wěn)定性試驗的方法為：在第0 d、第5 d、第10 d、第20 d、第30 d，對各項參數(shù)均相同的樣本進行RBP 測定。檢測時，分別在2 ～8℃開瓶放置樣本，在2 ～8℃閉瓶放置樣本，在37℃熱破壞樣本的穩(wěn)定性（在第一次校準儀器后對樣本進行檢測，檢測時不再進行儀器校準，直至檢測失控）。每天檢測結束后，及時為樣本擰緊瓶蓋，將樣本密封保存。6）進行干擾性試驗的方法為：選取濃度已知的樣本，加入三種不同濃度的膽紅素、三酰甘油、血紅蛋白，然后對樣本進行檢測，觀察檢測的結果是否受到干擾。

1.3 統(tǒng)計學方法

對本次研究中的數(shù)據(jù)均采用SPSS 22.0 統(tǒng)計軟件進行處理，計量資料用均數(shù)±標準差（± s ）表示，采用t 檢驗，計數(shù)資料用百分比（%）表示，采用χ2檢驗。以P ＜0.05表示差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 三組研究對象血清RBP 的水平

B 組研究對象血清RBP 的水平高于C 組研究對象，C組研究對象血清RBP 的水平高于A 組研究對象，P ＜0.05。詳見表1。

表1 三組研究對象血清RBP 的水平（mg/L，± s ）

表1 三組研究對象血清RBP 的水平（mg/L，± s ）

C 組 50 50.11±12.79 A 組 50 21.91±9.72急性肝炎患者 25 25.76±9.21肝硬化患者 17 20.17±9.08肝癌患者 8 19.81±10.87 B 組 50 90.58±19.44腎小球腎炎患者 24 88.67±19.54糖尿病腎病患者 16 94.78±20.13腎功能衰竭患者 10 88.28±18.65

2.2 進行精密度試驗的結果

進行精密度試驗的結果顯示，不同濃度血清樣本的精密度相比，P ＜0.05。詳見表2。

表2 進行精密度試驗的結果

2.3 進行回收試驗的結果

進行回收試驗的結果顯示，三個不同濃度樣本的回收濃度及回收率相比，P ＜0.05。詳見表3。

表3 進行回收試驗的結果

2.4 進行穩(wěn)定性試驗的結果

進行穩(wěn)定性試驗的結果顯示，本次研究使用的試劑具有較好的穩(wěn)定性。詳見表4。

表4 進行穩(wěn)定性試驗的結果

2.5 進行干擾試驗的結果

進行干擾試驗的結果顯示，對樣本進行血清RBP 檢測時，樣本中的血紅蛋白≤4 g/L、三酰甘油≤10 mmol/L 及膽紅素≤420 μmol/L 對檢測結果無干擾。

3 討論

血清RBP 是維生素A 的轉運蛋白。血清RBP 可與甲狀腺素結合前白蛋白形成復合物[2-3]。健康人體內多余的RBP 可被腎臟代謝。但腎病患者體內多余的RBP 則不能被腎臟代謝完全。因此，血清RBP 的水平是評估腎病患者病情的重要指標之一[4]。有研究資料顯示，肝病患者血清RBP 的水平可出現(xiàn)下降。因此，血清RBP 的水平可作為評估肝病患者病情的指標之一。目前，臨床檢測血清RBP的方法包括免疫透射比濁法、放射免疫分析法、酶聯(lián)免疫法、免疫電泳等[5]。其中免疫透射比濁法是臨床上檢測血清RBP 的主要方法。采用免疫透射比濁法測定樣本時通過測定樣本的濁度與一系列標準品進行對照，即可計算出樣本中抗原的含量[6]。有研究資料顯示，采用免疫透射比濁法測定血清RBP 具有操作簡單、安全性高、對檢測設備的要求比較低、環(huán)保、檢測結果比較準確等優(yōu)點[7]。但有研究指出，采用免疫透射比濁法檢測血清RBP 時對抗體的純度及特異性有較高的要求[8]。

本次研究的結果證實，采用免疫透射比濁法對肝腎疾病患者進行血清RBP 檢測可準確診斷其病情。