莪術油對人子宮內膜癌HEC-1-B細胞增殖、凋亡及Caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白表達的影響*

李偉宏，田莉，劉俊保

1.鄭州澍青醫學高等?？茖W校，河南 鄭州 450064；2.河南省人民醫院，河南 鄭州 450003

子宮內膜癌是女性最常見的惡性腫瘤之一，且預后不良［1-2］。中藥誘導腫瘤細胞凋亡治療腫瘤是有效的治療手段，應用中藥治療腫瘤得到了廣泛的關注。莪術油有較好的抗腫瘤、抗炎、抗病毒、細胞凋亡［3-4］等作用；其主要有效成分為莪術酮、莪術二酮等。但關于莪術油對子宮內膜癌細胞的研究報道較少，本研究將探討莪術油對HEC-1-B細胞的增殖、凋亡及其可能的作用機制。

1 材料

1.1 細胞株和細胞培養HEC-1-B細胞株由上海歌凡生物科技有限公司提供。將細胞培養于DMEM培養基（10%胎牛血清）中，放入5%CO2、37℃培養箱中孵育［10］。

1.2 藥品及試劑DMEM培養基（美國康寧公司，批號：C2413118）；標準胎牛血清（standard FBS，天津灝洋生物制品科技責任有限公司，批號：20191230）；四甲基偶氮唑藍（methylthiazolyl tetrazolium，MTT，美國Sigma公司，貨號：88417）；DMSO（美國Amresco公司，貨號：472301）；Hoechst 33258染色劑（美國Sigma公司，貨號：BK17520）；Caspase-3、Bax與Bcl-2抗體（美國Cell signaling technology公司，貨號分別為：9622、5023、15071）；ECL化學發光液（碧云天生物技術有限公司，貨號：P0018AS）；莪術油注射液（徐州萊恩藥業有限公司，批號：H20067076）。

1.3 儀器倒置顯微鏡及照相裝置（日本Olympus公司）；CO2培養箱（日本SANYO公司）；SW-CJ-2FD型超凈工作臺（蘇州安泰空氣技術有限公司）；低速離心機（北京醫用離心機廠）；MP200A型電子天平（上海精科天平）；DNM-9602G酶標分析儀（北京普朗新技術有限公司）；Mini-REPOTEANⅡ（Bio-Red公司）；DYY-Ⅲ型電轉移槽（北京六一儀器廠）。

2 方法

2.1 MTT法檢測莪術油對HEC-1-B細胞增殖抑制作用將生長達到80% ～90%的HEC-1-B細胞棄掉培養液，PBS沖洗后加入0.25%胰酶細胞消化液，當細胞密度達到1×104·mL-1時將此注入96孔板內，每……