頭孢硫脒在4種常用輸液中的穩定性考察

劉 艷，呂 萌

(1 河南省省立醫院藥學部，鄭州 450000；2 鄭州大學附屬兒童醫院藥學部，鄭州 451161)

頭孢硫脒是我國首個自主研發的、用于臨床的頭孢菌素類化合物，屬于第1代頭孢菌素類抗生素，通過抑制細菌細胞壁的合成發揮抗菌作用[1]。其對金黃色葡萄球菌、草綠色鏈球菌、肺炎球菌的作用較強，對腸球菌有獨特的抗菌活性，主要用于敏感菌導致的呼吸系統、肝膽系統、五官、尿路感染、心內膜炎及敗血癥。

注射用頭孢硫脒不良反應主要累及皮膚及其附件、全身、消化系統、神經系統等[2]。2015年原國家食品藥品監督管理總局發布的第69期《藥品不良反應信息通報》提示，關注注射用頭孢硫脒引起的過敏性休克及兒童用藥風險[3]。頭孢硫脒與部分輸液配伍穩定性較差，隨著放置時間的增加，可產生具有過敏原性的雜質，這可能是其藥物不良反應(adverse drug reaction,ADR)發生的原因之一[4]。本文研究了注射用頭孢硫脒在5～15 mg/ml濃度范圍內與臨床常用的0.9%氯化鈉、5%葡萄糖、10%葡萄糖及5%葡萄糖氯化鈉注射液配伍后放置24 h內的穩定性，以期為臨床安全、合理使用注射用頭孢硫脒提供參考。

1 材料

1.1 儀器

Nexera XR高效液相色譜系統、SPD-20A紫外檢測器(日本島津公司)；FA1104分析電子天平(上海上平儀器有限公司)；雷磁PHS-3C型pH計(上海儀電科學儀器股份有限公司)。

1.2 藥品與試劑

標準品：頭孢硫脒標準品(中國食品藥品檢定研究院，批號130523-201203，純度99.0%)；實驗用藥品：注射用頭孢硫脒(廣州白云醫藥集團藥股份有限公司白云山制藥總廠，批號3192049，規格0.5 g)、5%葡萄糖注射液(河南科倫藥業有限公司，批號A19072902A，規格500 ml∶25 g)、10%葡萄糖注射液(安徽豐原藥業股份有限公司，批號190130127，規格250 ml∶25 g)、0.9%氯化鈉注射液(安徽豐原藥業股份有限公司，批號190729125，規格250 ml∶2.25 g)、5%葡萄糖氯化鈉注射液(四川科倫藥業股份有限公司，批號C119061602-1，規格250 ml∶葡萄糖12.5 g+氯化鈉2.25 g)；其他試劑及用品：乙腈為色譜純，無水磷酸氫二鈉、枸櫞酸為分析純，超純水為實驗室自制。

2 方法與結果

2.1 頭孢硫脒標準品溶液的配制

精密稱定頭孢硫脒標準品125.0 mg加蒸餾水溶解，轉移，置于5 ml量瓶中稀釋定容至刻度。

2.2 頭孢硫脒模擬臨床配伍溶液的配制

通過前期調查得知本院靜脈用藥調配中心注射用頭孢硫脒常用配置濃度為4～15 mg/ml，臨床常用輸液為5%葡萄糖、10%葡萄糖、0.9%氯化鈉、5%葡萄糖氯化鈉注射液。分別精密稱定注射用頭孢硫脒0.25、0.25和0.375 g，用2 ml 0.9%氯化鈉注射液溶解后，分別轉移至50、25和25 ml量瓶中，用以上4種注射液定容，制得注射用頭孢硫脒濃度為5、10和15 mg/ml配伍溶液。

2.3 色譜條件

分析柱：Intersil ODS-3 C18色譜柱(150 mm×4.6 mm，5 μm，日本島津有限公司)；流動相：磷酸鹽緩沖液(取磷酸氫二鈉2.760 g與枸櫞酸1.291 g，加水溶解并稀釋到1000 ml)-乙腈(80∶20)；柱溫：30 ℃；檢測波長：254 nm；進樣量：10 μl。

2.4 方法學考察

2.4.1標準曲線的繪制

取“2.1”項下頭孢硫脒標準品溶液，用超純水依次稀釋至濃度為25.0、20.0、12.5、10.0、6.25、5.0、3.125和1.56 mg/ml的標準品溶液，取100 μl用超純水稀釋至1000 μl，按“2.3”項下色譜條件進行測定，記錄色譜圖。以相應色譜峰面積(x)為橫坐標，濃度(y)為縱坐標，進行線性回歸，得到回歸方程y=7×10-7x+0.384 8(r2=0.999 2)，線性范圍：0.156～2.5 mg/ml。

2.4.2精密度試驗

取“2.1”項下頭孢硫脒標準品溶液，以超純水分別配制成理論質量濃度為3.125、6.25和12.5 mg/ml的溶液各3份，配置后即按照“2.3”項下色譜條件進樣，代入線性回歸方程求得測量濃度，以測量濃度的相對標準偏差(RSD)反映精密度。每日各檢測1次，共檢測3天，計算批內及批間精密度。見表1。

表1 頭孢硫脒的精密度、準確度試驗結果

2.4.3準確度試驗

取“2.1”項下頭孢硫脒標準品溶液，以超純水分別配制成理論質量濃度為3.125、6.25和12.5 mg/ml的溶液各5份，配制后即按照“2.3”項下色譜條件進樣，代入線性回歸方程求得測量濃度，以回收率反映準確度。見表1。

2.5 配伍穩定性試驗

2.5.1相對百分含量測定

注射用頭孢硫脒與4種常用輸液制得的配伍溶液放置在(25±1) ℃、不避光的條件下，于0、1、2、4、6、8、12和24 h時，取配伍溶液100 μl，用相應配伍注射液稀釋至1000 μl。按照“2.3”項下色譜條件進樣測定，記錄色譜峰面積，通過外標法計算配伍溶液頭孢硫脒含量。以配伍溶液0 h的頭孢硫脒含量為100%，計算配伍溶液中不同時間點頭孢硫脒的相對百分含量變化，見表2。由表2可見，在 8 h 內，頭孢硫脒與5%葡萄糖、10%葡萄糖、0.9%氯化鈉、5%葡萄糖氯化鈉注射液配伍(濃度5～15 mg/ml)中頭孢硫脒相對百分含量變化為95.40%～102.44%，符合國際上常用的輸液化學穩定性標準(>95%)[5]，提示頭孢硫脒與該4種常用輸液濃度在5～15 mg/ml、8 h內的配伍輸液化學穩定性良好。在12 h內，頭孢硫脒與10%葡萄糖、0.9%氯化鈉及5%葡萄糖氯化鈉注射液(濃度5～15 mg/ml)配伍溶液中頭孢硫脒相對百分含量>95%，配伍穩定性良好。頭孢硫脒與5%葡萄糖注射液配伍，濃度為5 mg/ml時，在12 h內相對百分含量>95%；濃度為10～15 mg/ml時，在8 h內相對百分含量>95%，在12和24 h時間點相對百分含量<95%，表示其配伍溶液穩定性較差。在24 h范圍內，僅有濃度為5 mg/ml的頭孢硫脒與0.9%氯化鈉相對百分含量>95%，配伍溶液穩定性良好，其余配伍溶液穩定性均較差。

表2 注射用頭孢硫脒與4種常用輸液配伍前后的含量變化 %

2.5.2pH測定

在不同時間點取適量上述配伍溶液，測定pH。不同時間點配伍溶液的pH在3.83～5.16(見表3)，各組配伍溶液pH隨著放置時間延長而呈現降低的趨勢。

表3 注射用頭孢硫脒與4種常用輸液配伍前后的pH變化

(續表)

3 討論

隨著注射用頭孢硫脒在臨床的廣泛應用，其不良反應報道日益增多。頭孢硫脒ADR可能是由部分雜質引起[5]，如生產過程中引入的外源性雜質，或生產、貯存、使用過程中產生的內源性的高分子雜質[6]，以及與部分輸液配伍不穩定從而降解產生的雜質[7-9]。鄒明等[10]采用高效液相色譜法(HPLC)研究了注射用頭孢硫脒與0.9%氯化鈉、5%葡萄糖、10%葡萄糖及5%葡萄糖氯化鈉注射液的配伍穩定性。結果表明，放置6 h內，8 mg/ml的注射用頭孢硫脒與上述4種輸液配伍穩定性較好。王映輝等[11]采用紫外分光光度法測定注射用頭孢硫脒與0.9%氯化鈉注射液、5%葡萄糖氯化鈉注射液、10%葡萄糖注射液配伍穩定性。研究發現，8 mg/ml的注射用頭孢硫脒與0.9%氯化鈉注射液、5%葡萄糖氯化鈉注射液在6 h內配伍穩定，但是與10%葡萄糖注射液配伍放置2 h后，吸收曲線圖譜發生明顯變化，考慮其轉化為其他物質，配伍溶液不穩定。何建平等[12]采用HPLC含量測定法分別考察了頭孢硫脒與0.9%氯化鈉注射液、5%葡萄糖氯化鈉注射液的配伍穩定性，結果發現，上述配伍溶液在25 ℃下頭孢硫脒濃度為4 mg/ml時放置8 h內穩定性較好。

本研究通過前期調研[4]，研究了注射用頭孢硫脒與0.9%氯化鈉、5%葡萄糖、10%葡萄糖及5%葡萄糖氯化鈉注射液配伍濃度為5、10和15 mg/ml、放置24 h內的穩定性。結果表明，在5～15 mg/ml濃度范圍內，與上述4種輸液配伍放置8 h內的化學穩定性良好。在12 h內，頭孢硫脒與10%葡萄糖、0.9%氯化鈉、5%葡萄糖氯化鈉注射液配伍穩定性良好；與5%葡萄糖配伍，濃度為10～15 mg/ml時，配伍穩定性較差。在24 h范圍內，僅5 mg/ml的頭孢硫脒與0.9%氯化鈉配伍溶液穩定性良好。其原因可能為頭孢硫脒配伍溶液穩定性不僅與放置時間有關，還與配伍溶液濃度、配伍用注射液種類有關。此外，頭孢硫脒與注射液配伍后，其穩定性容易受溫度影響，在37 ℃、45 ℃條件下，穩定性變差；配伍溶液對光照、pH不敏感[13]。本研究中，頭孢硫脒各組配伍溶液pH隨著放置時間延長而略有降低，范圍在3.83～5.16，考慮pH不是影響頭孢硫脒配伍溶液穩定性的因素。本研究結果提示，濃度在 5～15 mg/ml，頭孢硫脒與0.9%氯化鈉、5%葡萄糖、10%葡萄糖及5%葡萄糖氯化鈉注射液配伍時，放置8 h內配伍穩定。提示在臨床常見配伍環境下(室溫不避光)，頭孢硫脒濃度不宜過高，應現配現用，從而減少過敏原性雜質的產生，降低不良反應發生率。

由于本實驗存在某些局限性，如頭孢硫脒與輸液配伍穩定性的因素還可能受輸液容器材質的影響；本實驗采用量瓶進行供試溶液的配制，對輸液容器的材質影響未做研究。此外，由于條件限制，本實驗未對配伍溶液產生的雜質作進一步的定性、定量分析。因此，頭孢硫脒不良反應發生的影響因素仍需進一步進行臨床研究。