血漿MCP-1、LOX-1 及D-二聚體在急性冠狀動脈綜合征患者診斷、危險分層及預后中的意義

蔣玉燕，郭良堂，項曉覺，吳靜，金永喜，支英豪

急性冠狀動脈綜合征（ACS）是一組急性心肌缺血導致的臨床綜合征，其病情變化較快，具有極高的致殘率和致死率，嚴重威脅患者生命健康[1]。雖然隨著醫(yī)學技術的發(fā)展，介入和溶栓治療極大地提高了患者生存率，但其對時間窗有嚴格要求，故早期診斷十分必要。動脈粥樣硬化（AS）斑塊破裂或糜爛導致血栓形成是ACS的發(fā)病基礎，若能早期發(fā)現硬化斑塊不僅有利于早期識別ACS，也能幫助患者進行危險分層，選擇合適的治療方式，對提升預后具有重要意義。單核細胞趨化蛋白-1（MCP-1）是一種單核細胞趨化蛋白，可在急性炎癥緩解下觸發(fā)更多炎癥因子，形成級聯炎癥反應，促進AS 發(fā)生和發(fā)展[2]145。凝集素樣氧化型低密度脂蛋白受體-1（LOX-1）是一種Ⅱ型糖蛋白，可介導氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）損害血管內皮細胞（VEC）功能，促進AS 形成[3]885。D-二聚體（DD）是交聯纖維蛋白（CLF）特異性降解產物，可反映纖溶亢進、血栓形成及高凝狀態(tài)[4]96。本研究分析ACS患者血漿MCP-1、LOX-1、D-D 水平變化情況，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2018 年1 月至2020 年1 月浙江中醫(yī)藥大學附屬溫州中醫(yī)院收治的93 例ACS 患者，設為ACS 組。納入標準：（1）初次發(fā)病，符合ACS 診斷標準[5]，經冠狀動脈造影確診；（2）臨床資料完整；（3）患者及家屬均知情。排除標準：（1）惡性腫瘤者；（2）重要器官功能不全者；（3）結締組織疾病者；（4）嚴重感染者；（5）近半年內有重大外傷、手術史者；（6）近期服用免疫調節(jié)劑藥物者。另選取46 名體檢健康者為對照組。本研究經本院倫理委員會批準。

1.2 方法

1.2.1 一般資料收集 收集研究對象性別、年齡、體質量指數（BMI）、吸煙、飲酒、病史、心率、收縮壓（SBP）和舒張壓（DBP）。抽取研究對象入院時空腹靜脈血5 ml，3 000 r/min離心10 min，取上清液。氧化酶法（長春匯力生物技術有限公司）測定葡萄糖（Glu）水平；免疫比濁法（浙江伊利康生物技術有限公司）測定敏C 反應蛋白（hs-CRP）水平；邁瑞B(yǎng)S-280 全自動生化分析儀測定總膽固醇（TC）、三酰甘油（TG）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）水平；比色法（杭州康拓生物科技有限公司）測定尿酸（UA）、肌酐（Cr）、尿素氮（UN）水平。

1.2.2 血漿MCP-1、LOX-1、D-D 測定抽取研究對象入院時空腹靜脈血3 ml，EDTA-K2 抗凝，3 000 r/min離心10 min，分離血漿，酶聯吸附法測定MCP-1、LOX-1、D-D水平，試劑盒均由上海慧穎生物科技有限公司提供，所有操作嚴格按照說明書進行。

1.3 危險分層 ACS組患者入院24h內采用全球急性冠狀動脈事件注冊（GRACE）[6]評分評估患者院內死亡風險，≤108 分為低危組（ =21），109 ～140 分為中危組（ =26），＞140 分為高危組（ =46）。

1.4 預后評估 隨訪6 個月，記錄患者心肌梗死、心血管死亡、不穩(wěn)定性心絞痛、支架血栓形成、經皮冠脈介入治療及心力衰竭等主要心血管不良事件（MACE）發(fā)生情況，并根據是否出現MACE 將 ACS 組分為預后不良組（ =28）和預后良好組（ =65）。

1.5 統計方法 選用SPSS 26.0 統計軟件進行處理，計數資料比較采用2或Fisher 檢驗；計量資料以均數±標準差表示，多組比較采用方差分析，多重比較SNK-檢驗，兩組間比較采用 檢驗；相關性分析采用Pearson相關性分析；危險因素分析采用多因素Logistics 回歸分析；診斷效能分析采用 ROC 曲線。＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組一般資料和實驗室指標比較 ACS 組血清Glu、hs-CRP 和血漿MCP-1、LOX-1、D-D水平均高于對照組（均＜0.05），其余指標差異均無統計學意義（均＞0.05）。見表1。

表1 兩組一般資料和實驗室指標對比

2.2 不同危險分層 ACS 患者血漿MCP-1、LOX-1、D-D 水平比較 血漿MCP-1、LOX-1、D-D水平隨著危險分層的增加而提升（均＜0.05）。見表2。

表2 不同危險分層ACS 患者血漿MCP-1、LOX-1、D-D 水平比較

2.3 ACS 患者血漿MCP-1、LOX-1、DD 水平與GRACE 評分的相關性 ACS患者GRACE評分為（120.60±34.27）分，血漿MCP-1、LOX-1、D-D水平與GRACE評分均呈正相關（=0.654、0.728、0.693，均＜0.05）。見封四彩圖1。

圖1 ACS 患者血漿MCP-1、LOX-1、D-D 水平與GRACE 評分的相關性

2.4 ACS組不同預后患者血漿MCP-1、LOX-1、D-D 水平比較 預后不良組血漿MCP-1、LOX-1、D-D水平均高于預后良好組（均＜0.05）。見表3。

表3 ACS 組不同預后患者血漿MCP-1、LOX-1、D-D 水平比較

2.5 ACS 發(fā)生危險因素的多因素分析 以Glu、hs-CRP、MCP-1、LOX-1、D-D為自變量，是否發(fā)生ACS 為因變量，分析顯示MCP-1、LOX-1、D-D 為ACS 發(fā)生獨立危險因素（均＜0.05）。見表4。

表4 ACS 發(fā)生危險因素的多因素Logistics 回歸分析

2.6 血漿MCP-1、LOX-1、D-D 水平對ACS的診斷價值 血漿MCP-1+LOX-1+D-D水平診斷ACS的 AUC[0.911（0.851～0.953）]明顯大于MCP-1[0.820（0.746～ 0.880）]、LOX-1 [0.820（0.746 ～0.880）]、D-D[0.839（0.768 ～0.896）]單獨診斷（≥2.120，均＜0.05），敏感度、特異度、準確度也高于各指標單獨診斷。見圖1。

3 討論

硬化斑塊為ACS 發(fā)生基礎，故理論上篩選易損斑塊患者能在一定程度上預測ACS。AS 是多種細胞、組織參與的復雜病理生理過程，目前公認與炎癥反應、脂質浸潤有關，隨著炎癥反應和脂質浸潤的進一步發(fā)展，可損傷內皮細胞，誘發(fā)凝血-纖溶過程，形成血栓，最終導致冠狀動脈管腔狹窄或阻塞[7]。

MCP-1 是一種可溶性堿性蛋白質，能與趨化因子受體2 結合，并通過細胞膜上G蛋白偶聯磷酸肌醇等信號通路激活單核/巨噬細胞，促使單核/巨噬細胞侵入內皮并吞噬脂蛋白，形成泡沫細胞，產生自由基，導致脂代謝異常和血管痙攣，并參與一系列炎性反應[2]145。Zhuang 等[8]研究發(fā)現，單核細胞趨化蛋白基因治療能有效避免高膽固醇大鼠AS斑塊形成。其認為單核細胞進入血管內膜下層是AS 早期事件，并貫穿其全過程。本研究顯示ACS組血漿MCP-1 水平明顯提升，其為ACS 發(fā)生獨立危險因素（＜0.05）。這可能是MCP-1 通過CR2/蛋白激酶C信號促進血管平滑肌細胞向血管內皮增殖，損傷血管內皮，導致AS形成。

LOX-1 是一個多配基受體，主要由內皮細胞表達，能結合ox-LDL、衰老紅細胞、激活的血小板和細菌、凋亡細胞、熱激蛋白60、4-羥基-2-壬烯醛-組氨酸加成物、CRP、末端糖基化終產物等細胞和產物，其基礎表達受限，但在機械、促氧化因子及炎癥刺激物等刺激下會使其表達明顯提升[3]884。Hofmann 等[9]研究顯示，AS患者頸動脈內膜標本中，內皮LOX-1呈高表達，其中不穩(wěn)定斑塊的表達更高，并伴有基質金屬蛋白酶2 和基質金屬蛋白酶9 表達增加，這進一步證實LOX-1參與了AS 發(fā)生及發(fā)展。本研究顯示ACS組血漿LOX-1 水平提升，其為ACS發(fā)生獨立危險因素（＜0.05）。這可能是LOX-1 能激活LOX-1，誘導內皮細胞內活性氧生成，與NO 反應生成過氧化亞硝酸，滅活NO，影響VEC 舒張功能，同時活性氧還可通過游核因子- B 通路誘導VEC凋亡，促進AS發(fā)生和發(fā)展[3]884。

纖維蛋白溶解系統是人體重要抗凝系統，纖溶過程中，凝血酶水解纖維蛋白原，可釋放纖維蛋白肽，余下可溶性纖維蛋白單體，在凝血因子Ⅻa作用下形成交聯纖維蛋白，在纖溶酶降解過程中釋放D-D[4]96。生理狀態(tài)下纖溶與凝血處于平衡狀態(tài)，若失衡，則更傾向于凝血，導致D-D 大量生成，由于D-D 為交聯纖維蛋白特異性降解產物，因此可以有效反映機體纖溶與凝血狀態(tài)[10]。本研究顯示ACS 組血漿D-D 水平明顯提升，其為ACS 發(fā)生獨立危險因素（＜0.05）。這可能與ACS 患者血管內皮功能受損后激活凝血系統釋放大量D-D 有關。本研究顯示ACS 患者血漿MCP-1、LOX-1、D-D 水平高于對照組，預后不良組高于預后良好組，這說明血漿 MCP-1、LOX-1、D-D 水平與ACS 患者危險分層和預后密切相關。R OC曲線顯示，血漿MCP-1+LOX-1+D-D 水平診斷ACS 的AUC、敏感度、特異度、準確度高于各指標單獨診斷，這說明聯合檢測能提升ACS 診斷價值。

圖1 血漿MCP-1、LOX-1、D-D 水平診斷ACS 的ROC曲線

綜上所述，ACS 患者血漿MCP-1、LOX-1、D-D 水平明顯提升，與危險分層和預后密切相關，為ACS 發(fā)生獨立危險因素，聯合檢測能提升ACS 診斷價值。