Linc-RoR 與胰腺癌的研究進(jìn)展

王倩倩 王慧之 徐 岷

1.江蘇大學(xué)醫(yī)學(xué)院，江蘇鎮(zhèn)江 212000；2.江蘇大學(xué)附屬醫(yī)院消化內(nèi)科，江蘇鎮(zhèn)江 212000

胰腺癌是一種惡性程度極高的消化系統(tǒng)腫瘤，起病隱匿，5 年生存率約9%[1]，預(yù)后極差。隨著分子生物學(xué)的不斷進(jìn)步，從基因水平闡明胰腺癌發(fā)生發(fā)展機(jī)制，給腫瘤的早期診斷和靶向治療帶來(lái)了希望[2-4]。近年來(lái)，基因間長(zhǎng)鏈非編碼RNA-重編碼調(diào)控因子（long intergenic non-protein coding RNA，regulator of reprogramming，Linc-RoR）在胰腺癌的診斷、治療及預(yù)后判斷中發(fā)揮的作用逐漸受到研究者的關(guān)注。研究顯示，linc-RoR 在胰腺癌組織和細(xì)胞系中表達(dá)失調(diào)，與胰腺癌細(xì)胞的生長(zhǎng)增殖、侵襲轉(zhuǎn)移、化學(xué)治療耐藥性等病理過(guò)程密切相關(guān)[11-12,17,21-23]。本文就近年來(lái)有關(guān)Linc-RoR在胰腺癌中的研究進(jìn)展做簡(jiǎn)要綜述。

1 Linc-RoR

長(zhǎng)鏈非編碼RNA（long non-coding RNA，LncRNA）是一類長(zhǎng)度超過(guò)200 個(gè)核苷酸的不具備蛋白編碼能力的RNA 分子，其在表觀遺傳、轉(zhuǎn)錄調(diào)控和癌癥的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮重要作用，廣泛參與機(jī)體的生理和病理過(guò)程[5-6]。其中，LncRNA是占比最多的LncRNA 類型，通常表現(xiàn)出顯著的組織特異性，并能特異性調(diào)控鄰近基因的表達(dá)[7]。許多LincRNA 與人類疾病機(jī)制直接相關(guān)，有望成為臨床診斷標(biāo)志物與生物治療的潛在靶點(diǎn)。其中，Linc-RoR 作為目前研究較多的代表性LncRNA中的一種，與胰腺癌的研究較為廣泛。

Linc-RoR，又名ST8SIA3，最初被發(fā)現(xiàn)參與分化細(xì)胞向誘導(dǎo)多能干細(xì)胞的重編程過(guò)程，是NANOG 等多能性轉(zhuǎn)錄因子的直接靶標(biāo)[8]。此外，Linc-RoR 可能作為關(guān)鍵競(jìng)爭(zhēng)性內(nèi)源RNA，在人胚胎干細(xì)胞的自我更新中調(diào)控核心轉(zhuǎn)錄因子和微小RNA（microRNA，miRNA）的表達(dá)[9]。Linc-RoR 在多種類型的癌癥中具有致癌作用，與腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。例如，Linc-RoR 可以誘導(dǎo)上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（epithelial-to-mesenchymal transition，EMT），促進(jìn)乳腺癌[10]、胰腺癌[11-12]、肺腺癌[13]、肝癌[14]等發(fā)生和轉(zhuǎn)移。此外，Linc-RoR 可增強(qiáng)乳腺癌[15-16]、胰腺癌[17]、肝癌[18]等化療耐藥性及結(jié)直腸癌[19]、肝癌[20]等放療抵抗。

2 Linc-RoR 與胰腺癌密切相關(guān)

2.1 Linc-RoR 在胰腺癌中高表達(dá)

多項(xiàng)研究顯示[11,17,21-23]，Linc-RoR 在胰腺癌組織中高表達(dá)，且Linc-RoR 的表達(dá)水平與腫瘤大小呈正相關(guān)，提示Linc-RoR 在胰腺癌中可能發(fā)揮癌基因作用。在胰腺癌細(xì)胞系中也發(fā)現(xiàn)Linc-RoR 高表達(dá)[11-12,17,22-23]，但Linc-RoR 在不同胰腺癌細(xì)胞系中表達(dá)水平不同（表1），有待進(jìn)一步研究。

2.2 Linc-RoR 參與胰腺癌細(xì)胞的增殖、遷移、侵襲

多數(shù)胰腺癌患者在確診時(shí)已是局部晚期或發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，預(yù)后不良[6]。胰腺癌細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲與胰腺癌患者的不良預(yù)后密切相關(guān)。多項(xiàng)體外研究提示Linc-RoR 參與胰腺癌細(xì)胞的增殖、遷移、侵襲。Zhan 等[11]在胰腺癌細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)Linc-RoR 通過(guò)增強(qiáng)鋅指E 盒結(jié)合蛋白1（zinc finger E-box binding home obox 1，ZEB1）表達(dá)，正向調(diào)控胰腺癌EMT 進(jìn)程。在胰腺癌腫瘤組織中發(fā)現(xiàn)，Linc-RoR 與ZEB1 的表達(dá)呈正相關(guān)，并且Linc-RoR 和ZEB1 均與p53 呈負(fù)相關(guān)，提示Linc-RoR 可能通過(guò)抑制p53 表達(dá)來(lái)激活ZEB1 介導(dǎo)的EMT，從而促進(jìn)胰腺癌細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲。Chen 等[12]另發(fā)現(xiàn)linc-RoR 可促進(jìn)Yes 相關(guān)蛋白（Yes-associated protein，YAP）的核易位，激活胰腺癌中的Hippo-YAP 信號(hào)通路，促進(jìn)EMT 進(jìn)程。Fu 等[23]實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證了上述觀點(diǎn)，進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)Linc-RoR 抑制胰腺癌細(xì)胞從G0/G1期向S 期的轉(zhuǎn)化。

表1 Linc-RoR 在不同胰腺癌細(xì)胞系中表達(dá)水平統(tǒng)計(jì)表

同時(shí)，另有報(bào)道指出Linc-RoR 的下游靶點(diǎn)可能是Notch1，Linc-RoR 可誘導(dǎo)胰腺癌BxPC-3 細(xì)胞中Notch1蛋白表達(dá)水平升高，降低DNA 損傷陽(yáng)性細(xì)胞的比例，調(diào)控細(xì)胞的增殖凋亡[21]。

在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中，Linc-RoR 低表達(dá)的胰腺癌AsPC-1細(xì)胞在裸鼠皮下的成瘤能力顯著降低，表現(xiàn)為腫瘤的體積和質(zhì)量明顯減輕[11]。而Linc-RoR 高表達(dá)的胰腺癌BxPC-3 細(xì)胞可促進(jìn)小鼠體內(nèi)胰腺癌細(xì)胞向肺臟和肝臟的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移[11]。

綜上所述，Linc-RoR 可能通過(guò)多條通路調(diào)控胰腺癌細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲，并促進(jìn)其體內(nèi)成瘤和轉(zhuǎn)移能力。Linc-RoR 是否還通過(guò)其他通路調(diào)控胰腺癌的增殖、遷移和侵襲，以及哪條通路起主導(dǎo)作用，還有待研究。將來(lái)還需進(jìn)一步開展Linc-RoR 調(diào)控胰腺癌細(xì)胞的體內(nèi)研究，從而明確Linc-RoR 對(duì)體內(nèi)胰腺癌的增殖、遷移和侵襲的影響。

2.3 Linc-RoR 參與胰腺癌干細(xì)胞的干性維持

腫瘤干細(xì)胞（cancer stem cells，CSCs）是指腫瘤組織中存在的極少量具有干細(xì)胞特性的腫瘤細(xì)胞亞群[24]，其存在于多種腫瘤中，并在腫瘤惡性行為的產(chǎn)生過(guò)程中發(fā)揮重要作用[25-26]。胰腺癌干細(xì)胞（pancreatic cancer stem cells，PCSCs）最初由Li 等[27]分離，具有分裂增殖、自我更新、多向分化、高致瘤性、耐藥性等多種生物學(xué)特性[27-28]。研究顯示，胰腺癌中異常表達(dá)的Linc-RoR 可以發(fā)揮miRNA 的分子海綿作用，抑制miRNA 的表達(dá)，從而促進(jìn)胰腺癌細(xì)胞干性。

Gao 等[22]從胰腺癌細(xì)胞系BxPC-3 和Capan-1 中培養(yǎng)出CD24＋CD44＋CD133＋PCSCs 亞群，并且發(fā)現(xiàn)Linc-RoR 在PCSCs 中高表達(dá)。干擾PCSCs 中Linc-RoR的表達(dá)抑制腫瘤細(xì)胞的增殖、遷移，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并顯著降低其裸鼠皮下成瘤能力。進(jìn)一步沉默Linc-RoR的表達(dá)則增強(qiáng)miR-145 對(duì)多能性轉(zhuǎn)錄因子NANOG的負(fù)調(diào)控。Linc-RoR、miR-145 和NANOG 之間的平衡關(guān)系可能是PCSCs 維持其高增殖率和侵襲率的作用機(jī)制之一[22]。

在胰腺癌細(xì)胞系PANC-1 中也培養(yǎng)出胰腺癌干細(xì)胞樣細(xì)胞（cancer stem-like cells，CSLCs）且干細(xì)胞形成過(guò)程中伴隨Linc-RoR 的表達(dá)上調(diào)[23]。機(jī)制研究顯示[23]，Linc-RoR 可以作為競(jìng)爭(zhēng)性內(nèi)源RNA 作用于多個(gè)抑癌miRNA，特別是let-7 家族的一些成員，促進(jìn)胰腺癌干細(xì)胞特性形成。

盡管上述研究已經(jīng)證實(shí)Linc-RoR 參與PCSCs的干性維持，但是Linc-RoR 調(diào)控胰腺癌細(xì)胞干性的分子作用及機(jī)制有待深入研究，這為胰腺癌的診斷和治療提供新的思路和方法。

2.4 Linc-RoR 參與胰腺癌耐藥

晚期胰腺癌通常首選吉西他濱單藥或聯(lián)合其他藥物治療。但是，吉西他濱治療效果不明顯且不良反應(yīng)較多，多周期治療后出現(xiàn)耐藥往往導(dǎo)致治療失敗[29-30]。研究顯示，Linc-RoR 與胰腺癌細(xì)胞的化療耐藥性相關(guān)。

Li 等[17]研究發(fā)現(xiàn)linc-RoR 通過(guò)誘導(dǎo)自噬使胰腺癌細(xì)胞對(duì)吉西他濱產(chǎn)生耐藥性。研究者進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)linc-RoR 與miR-124 的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)，miR-124 過(guò)表達(dá)顯著降低了胰腺癌細(xì)胞中多聚嘧啶區(qū)結(jié)合蛋白1（polypyrimidine tract-binding protein 1，PTBP1）的表達(dá)水平，M2-型丙酮酸激酶（pyruvate kinase M2，PKM2）水平隨之下降，而PKM2 能夠調(diào)控代謝應(yīng)激下胰腺癌細(xì)胞的生長(zhǎng)和侵襲，進(jìn)而導(dǎo)致吉西他濱誘導(dǎo)的胰腺癌細(xì)胞凋亡[17]。生物信息學(xué)分析驗(yàn)證了Linc-RoR 和miR-124 之間存在兩個(gè)結(jié)合位點(diǎn)，明確了Linc-RoR 通過(guò)調(diào)節(jié)miR-124-PTBP1-PKM2 軸使胰腺癌細(xì)胞獲得對(duì)吉西他濱的耐藥性[17]。

Linc-RoR 還可能通過(guò)其他通路參與胰腺癌的耐藥，有待開展進(jìn)一步的研究。對(duì)Linc-RoR 參與胰腺癌耐藥通路的研究，有望降低胰腺癌耐藥性，為提高胰腺癌藥物治療效果提供理論依據(jù)。

2.5 Linc-RoR 與胰腺癌患者的預(yù)后密切相關(guān)

相關(guān)研究[22-23]通過(guò)分析胰腺導(dǎo)管腺癌組織中Linc-RoR 的表達(dá)與患者的性別、年齡、腫瘤部位、大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況等臨床病理參數(shù)及總體生存率的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)Linc-RoR 的高表達(dá)與患者的不良預(yù)后密切相關(guān)。Linc-RoR 水平的升高可能與胰腺癌的進(jìn)展呈正相關(guān)，尚需更多的臨床樣本加以驗(yàn)證，Linc-RoR 有望成為胰腺癌診斷和預(yù)后的新型潛在生物標(biāo)志物。

Linc-RoR 在胰腺癌中可能發(fā)揮重要的促癌作用。Linc-RoR 在胰腺癌細(xì)胞系和組織中表達(dá)上調(diào)，并可通過(guò)多種途徑促進(jìn)胰腺癌細(xì)胞的增殖、凋亡、遷移、侵襲和耐藥，維持腫瘤干細(xì)胞的干性。隨著對(duì)Linc-RoR研究的深入，Linc-RoR 有望成為胰腺癌新型生物標(biāo)志物和基因治療靶點(diǎn)，為胰腺癌的臨床治療帶來(lái)新的希望。