血清MMP-9 和BDNF 在急性腦梗死患者中的表達水平變化及預后臨床研究

李又佳 韓小妍 黃 燕 羅宋寶 黃根林 黃惠琴 陳 瑩 吳振梅

廣東省肇慶市第一人民醫(yī)院神經內科，廣東肇慶 526000

急性腦梗死（acute cerebral infarction，ACI）是神經科常見疾病，具有高致殘率和高致死率，中國腦梗死的發(fā)病率為每年246.8/10 萬人，死亡率為每年114.8/10 萬人[1]。盡早對ACI 患者進行客觀有效的預后風險評估和預測在臨床工作中有重要意義。目前相關研究多集中于入院時炎癥因子和影像學表現[2-5]，動態(tài)指標變化的研究較少，有必要進一步開展研究。

基質金屬蛋白酶-9（matrix metalloproteinase-9，MMP-9）激活時參與降解形成血腦屏障（blood brain barrier，BBB）基膜的主要成分，與ACI 出現腦水腫密切相關[6]。腦源性神經營養(yǎng)因子（brain-derived neurotrophic factor，BDNF）對神經元發(fā)育分化和神經生長再生起維持促進作用，與損傷后神經恢復相關[7-8]。本研究發(fā)現MMP-9 和BDNF 水平變化與患者預后相關。現報道如下：

1 對象與方法

1.1 研究對象

選取2019 年1 月—6 月在廣東省肇慶市第一人民醫(yī)院（以下簡稱“我院”）就診，確診為ACI 并完成3 個月隨訪的患者42 例為研究組，同期體檢健康人群40 名為對照組。本研究為前瞻性研究，經我院醫(yī)學倫理委員會批準，所有參與研究的患者均簽署知情同意書。

研究組納入標準：①符合《各類腦血管病疾病診斷要點》診斷標準[9]，且經頭顱計算機斷層掃描術（CT）或核磁共振（MRI）證實；②初次發(fā)病；③24 h 內入院治療。排除標準：患腫瘤、嚴重感染、自身免疫性疾病、嚴重肝腎功能不全。

對照組為無心腦血管相關重大疾病，且無腦梗病史的健康人群。

研究組42 例，男22 例，女20 例；平均年齡（56.8±10.2）歲。對照組40 例，男20 例，女20 例；平均年齡（57.2±11.4）歲。兩組性別、年齡比較，差異無統(tǒng)計學意義（P ＞0.05），具有可比性。

按改良Rankin（mRS）量表[10]評分將研究組分為預后良好組24 例，預后不良組18 例。

1.2 方法

研究組行藥物治療，入院后根據患者發(fā)病時間給予尿激酶（麗珠集團麗珠制藥廠，批號：190502）或重組人組織型纖溶酶原激活劑（德國勃林格殷格翰公司，批號：708765）治療，口服阿司匹林或氯吡格雷預防血栓，他汀類藥物穩(wěn)定斑塊。并結合患者情況給予降壓、降糖等治療和生活指導。

研究組所有研究對象均于入院第1 天（T1）以及入院第2 天（T2）、第5 天（T5）分別抽取晨起空腹靜脈血3 mL。對照組體檢時抽取空腹靜脈血3 mL。抽取血液靜置30 min 后，3000 r/min 離心10 min，離心半徑13 cm，取上清200 μL 分裝，-80℃冰箱凍存。

囑患者出院后1 周、1 個月、3 個月門診隨訪病情，不適隨時復診，未及時門診隨訪者電話隨訪。在第3 個月隨訪時行mRS 量表[10]進行評分。

1.3 檢測指標

取凍存血清，使用人MMP-9 酶活試劑盒（上海酶聯生物科技有限公司，批號：ML058617M）和人BDNF酶活試劑盒（武漢菲恩生物科技有限公司，批號：EH0043），采用酶聯免疫吸附測定法，按說明書進行操作，酶標儀在450 nm 波長下測定吸光度，計算MMP-9 和BDNF 濃度。

mRS 量表判讀標注[10]：判斷ACI 患者的神經功能恢復情況屬于哪個級別，則記錄為該級別。需注意：僅考慮疾病發(fā)生后的情況；如果患者可自行借助輔助裝置行走，視為獨立行走；如果兩個級別對患者同樣適用，按指導意見無法區(qū)分，以較為嚴重的為準。0～2 級為預后良好，≥3 級為預后不良。

1.4 統(tǒng)計學方法

采用SPSS 20.0 對所得數據進行統(tǒng)計學分析，計量資料采用均數±標準差（）表示，組間比較采用t檢驗，計數資料采用百分率表示，組間比較采用χ2檢驗或Fisher 確切概率法，對預后良好組與預后不良組不同時間點數據采用重復測量方差分析。以P ＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 研究組T1 時間點與對照組體檢時的血清MMP-9和BDNF 水平比較

在T1時間點，研究組血清MMP-9 和BDNF 水平均高于對照組，差異均有統(tǒng)計學意義（均P ＜0.05）。見表1。

表1 研究組T1 時間點與對照組體檢時血清MMP-9和BDNF 水平比較（ng/mL，）

表1 研究組T1 時間點與對照組體檢時血清MMP-9和BDNF 水平比較（ng/mL，）

注：MMP-9：基質金屬蛋白酶-9；BDNF：腦源性神經營養(yǎng)因子

2.2 預后良好組與預后不良組不同時間點的血清MMP-9 和BDNF 水平比較

整體比較：兩組MMP-9 水平組間和交互作用比較，差異均有統(tǒng)計學意義（均P ＜0.05），時間點比較，差異無統(tǒng)計學意義（P ＞0.05）。進一步分析，T5時間點，預后不良組MMP-9 水平高于預后良好組，差異有統(tǒng)計學意義（P ＜0.05）。

整體比較：兩組BDNF 水平時間點和交互作用比較，差異均有統(tǒng)計學意義（均P ＜0.05），組間比較差異無統(tǒng)計學意義（P ＞0.05）。進一步分析，預后良好組T2時間點BDNF 水平高于T1時間點BDNF 水平，T5時間點BDNF 水平高于T2時間點BDNF 水平，差異均有統(tǒng)計學意義（均P ＜0.05）；預后不良組T2時間點和T5時間點BDNF 水平均低于T1時間點BDNF 水平，差異均有統(tǒng)計學意義（均P ＜0.05）。見表2。

3 討論

ACI 是因供血不足導致的大腦組織缺血性壞死，常見于中老年，致死率和致殘率較高。盡早對ACI 患者進行客觀有效的預后風險預測，以采取相應的處理措施，在臨床上有重要意義。此前臨床ACI 患者預后主要是通過對患者相關信息進行量化，如美國國立衛(wèi)生研究院卒中量表，洛桑卒中量表等[11-12]，再結合炎癥因子、凝血功能指標、影像學等指標進行綜合化分析[13-14]。但是這些方法存在一定問題，量表主觀影響較大，預測價值并不理想[15]，實驗室指標隨病情變化和治療動態(tài)波動[16-18]。目前對于ACI 患者預后指標的動態(tài)變化研究還較為缺乏，本研究選擇了MMP-9 和BDNF 這兩個指標開展相關研究。

表2 預后良好組與預后不良組不同時間點的血清MMP-9 和BDNF 水平比較（ng/mL，）

表2 預后良好組與預后不良組不同時間點的血清MMP-9 和BDNF 水平比較（ng/mL，）

注：與本組T1 時間點比較，*P ＜0.05；與本組T2 時間點比較，#P ＜0.05；與預后良好組比較，ΔP ＜0.05。MMP-9：基質金屬蛋白酶-9；BDNF：腦源性神經營養(yǎng)因子

MMP-9 是基質金屬蛋白酶家族主要成員，MMP-9激活會導致細胞外基質降解，BBB 通透性升高，從而導致腦水腫等病理狀態(tài)[19]。多項研究表明MMP-9 水平與腦微循環(huán)受損程度相關，其水平升高提示ACI 患者預后差[20-21]。本研究發(fā)現MMP-9 水平變化與預后相關，T5時間點，預后不良組MMP-9 水平高于預后良好組，差異有統(tǒng)計學意義（P ＜0.05）。

BDNF 是神經營養(yǎng)因子家族的重要成員之一，與ACI 密切相關[8,22]。既往研究認為患者BDNF 會代償性增高，其增高對缺血后神經損傷有保護性作用[23]，BDNF 水平低提示患者預后差[24]。本研究顯示，BDNF水平變化與預后密切相關，預后良好組T2時間點BDNF水平高于T1時間點，T5時間點BDNF 水平高于T2時間點，差異均有統(tǒng)計學意義（均P ＜0.05），預后不良組入院的BDNF 水平較高，之后，預后不良組T2時間點和T5時間點BDNF 水平均低于T1時間點，差異均有統(tǒng)計學意義（均P ＜0.05），總體與既往研究相符[23-24]。關于入院BDNF 水平，本研究認為疾病最初期BDNF水平上升是機體對缺血性損傷的內源性代償，其高水平提示初始缺血性損傷嚴重。

綜上所述，MMP-9 和BDNF 水平的變化與ACI預后密切相關，在發(fā)病最初期，BDNF 水平高提示預后可能不佳，在治療數日后，MMP-9 水平高，BDNF 降低提示預后不佳，對早期預測ACI 預后具有一定的臨床應用價值。