飼料中磺胺類藥物檢測方法研究

高景報(bào)，劉二花，田 梅，馮騰壘，高紅梅，殷娟嶺，何日升

（1.石家莊畜產(chǎn)品和獸藥飼料質(zhì)量檢測中心 050000；2. 石家莊現(xiàn)代農(nóng)業(yè)學(xué)校 050000；3. 石家莊市欒城區(qū)畜產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)測站 050000；4. 石家莊市農(nóng)業(yè)綜合行政執(zhí)法支隊(duì) 050000）

磺胺類藥物是一種化學(xué)合成的抗菌素，其是指具有對氨基苯磺酰胺類結(jié)構(gòu)藥物的總稱。其具有抗菌作用強(qiáng)、抗菌譜廣、性質(zhì)穩(wěn)定、價(jià)格低等優(yōu)點(diǎn)，當(dāng)多種磺胺類藥物同時(shí)使用時(shí)，可使其抗菌效果增強(qiáng)，應(yīng)用范圍擴(kuò)大，因此常被廣泛用作飼料添加劑。但是，過量使用會(huì)造成畜產(chǎn)品中磺胺類藥物超標(biāo)，其通過食物鏈進(jìn)入人體后，會(huì)給人體健康造成傷害，同時(shí)對人體也有一定的致癌性。因此，針對飼料中磺胺類藥物的殘留檢測技術(shù)顯得尤為重要。目前，飼料中磺胺類藥物殘留檢測的分析測定技術(shù)有很多，如液相色譜法、液相色譜－質(zhì)譜法、免疫測定法、滴定法、分光光度法、流動(dòng)注射分析法等，其中液相色譜法應(yīng)用比較廣泛。研究磺胺類藥物的殘留檢測分析方法是我國畜牧業(yè)良好發(fā)展的需要。

1 高效液相色譜法（HPLC）

高效液相色譜法是采用高壓輸液系統(tǒng)，并利用極性不同的化合物在流動(dòng)相與固定相之間的吸附能力的不同，實(shí)現(xiàn)目標(biāo)化合物與雜質(zhì)之間的分離的方法，其具有高效、快速的優(yōu)點(diǎn)，在畜產(chǎn)品及飼料中的藥物殘留檢測方面應(yīng)用廣泛。陳吉之等利用用新型殼核型色譜柱，以0.1%乙酸水溶液與0.1%乙酸甲醇乙腈溶液未流動(dòng)相，梯度洗脫，建立了利用高效液相色譜法檢測飼料中的9種磺胺類藥物的方法。利用該方法，可實(shí)現(xiàn)在10min內(nèi)快速分離9種磺胺藥物，線性范圍良好，回收率達(dá)到80%以上。姜兆興等以乙腈-冰乙酸-水（18+1+81）為流動(dòng)相，采用C18色譜柱，建立了采用反相高效液相色譜測定飼料中的磺胺殘留檢測方法，該方法檢測限達(dá)到10mg/kg。該法具有準(zhǔn)確度高、線性好、高效快速的優(yōu)點(diǎn)。賈濤利用高效液相色譜法實(shí)現(xiàn)了對飼料中6種磺胺類藥物同時(shí)檢測，此方法回收率高，重復(fù)性好。

2 氣相色譜法（GC）

氣相色譜是以氣體為流動(dòng)相，利用分離組分在載氣和固定相之間分配系數(shù)不同，從而實(shí)現(xiàn)分離的檢測方法。Cihvarino等利用氣相色譜法，建立了飼料中9種磺胺類藥物的檢測方法，但由于該方法前處理過程復(fù)雜，且該類化合物不容易氣化，需進(jìn)行衍生化處理，否則檢測結(jié)果重現(xiàn)性差，因此該方法已逐步被液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法、高效液相色譜法淘汰。

3 液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法（LC-MS）

液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法是利用液相色譜分離，質(zhì)譜法檢測的一種方法。其檢測化合物具有靈敏度高、特異性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)，常被用于藥物分析，獸藥殘留檢測等領(lǐng)域。嚴(yán)鳳等利用高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法，建立了快速檢測和定量飼料中19種磺胺類藥物的分析方法。在該方法中，樣品前處理采用乙腈-0.1%甲酸溶液（ 80∶20， V /V） 超聲提取，以 0.1%（ V /V） 甲酸乙腈溶液和 0.1% （ V /V） 甲酸水溶液作為流動(dòng)相，采用靜電場軌道阱全掃描，建立了對飼料中19種磺胺類藥物的快速定性檢測及準(zhǔn)確定量的方法。賈濤等利用液相色譜法串聯(lián)質(zhì)譜法測定了飼料中的多種磺胺類藥物，該方法將飼料樣品用緩沖液提取，固相萃取柱凈化，洗脫并過濾膜后，用于液相色譜-質(zhì)譜儀測定，該方法中回收率均大于70%，檢測限達(dá)到0.01mg/kg，標(biāo)準(zhǔn)曲線線性良好。陳文慧等利用液質(zhì)聯(lián)用法，建立了飼料中9種磺胺類藥物檢測的分析方法。該方法用乙腈為萃取劑，C18柱為分析柱，以甲醇和乙酸銨緩沖液作為流動(dòng)相，采用電噴霧離子源，在正離子模式下，對飼料中9種磺胺類藥物進(jìn)行殘留檢測。該結(jié)果表明9種磺胺類藥物在濃度0-200ug/L之間，線性良好，最低檢測限為2ug/g，回收率在75%以上。

4 酶聯(lián)免疫分析技術(shù)（ELISA）

酶聯(lián)免疫分析方法是一種新型免疫技術(shù)，目標(biāo)化合物的檢測分析主要通過顏色深淺進(jìn)行判斷。該方法具有快速、成本低、分析量大、靈敏度高等特點(diǎn)，并且可用于樣品的批量檢測，因此，該方法發(fā)展迅速，并且在飼料中藥物殘留檢測中應(yīng)用廣范。RobertaGalarini等研究了利用酶聯(lián)免疫吸附法快速定性檢測飼料中的磺胺類藥物的方法。在國內(nèi)，周新民等采用ELISA方法，建立了磺胺對甲氧嘧啶的檢測方法。

5 展望

其他針對磺胺的分析檢測方法如毛細(xì)管電泳法、滴定分析法、分光光度法等也存在色譜法的一些缺點(diǎn): 前處理復(fù)雜、儀器設(shè)備貴、對專業(yè)人員要求較高。所以在現(xiàn)有飼料中的磺胺檢測技術(shù)的基礎(chǔ)上，需要進(jìn)一步開發(fā)靈敏度高、快速、準(zhǔn)確、成本低的定性及定量方法。