麻醉劑MS-222對運輸脅迫黃顙魚抗氧化系統的影響

劉陽 賈貴芳 楊飛

摘 要：為探討MS-222在魚類運輸應激研究中的應用，以黃顙魚為對象，研究麻醉劑MS-222對運輸應激下黃顙魚肝組織抗氧化系統的影響。結果顯示：在運輸后0、2、4、8h，MS-222不同濃度處理超氧化物歧化酶（SOD）活性均低于空白對照，丙二醛（MDA）活性總體呈先降低后穩定的趨勢，過氧化氫酶（CAT）和還原型谷胱甘肽（GSH）活性均顯著高于空白對照。

關鍵詞：黃顙魚;運輸應激;MS-222;生理生化

中圖分類號 S942.1文獻標識碼 A文章編號 1007-7731（2021）05-0067-02

黃顙魚（Pelteobagrus fulvidraco）又名黃沙古、黃姑子、黃角丁等，隸屬于鯰形目（Siluriformes）鲿科（Bagridae）黃顙魚屬（Pelteobagrus），是一種常見的小型淡水經濟魚類[1]。因其肉質富含氨基酸，口味鮮美，營養價值高，無肌間刺，具有藥用價值和滋補作用，深受大眾的喜愛[2]。然而魚體死亡或受傷后會導致其營養價值大大降低。運輸是水產品從漁場到餐桌的一個重要環節，運輸過程中的環境變化如氨氮升高、震蕩顛簸、空間狹小、溶解氧不足等因素，均會影響魚體應激，影響商品魚的品質及外觀，甚至引起死亡，從而導致漁民的經濟損失[3]。

麻醉劑具有使機體局部失去知覺的作用，能夠麻痹、鎮定魚體，使其減少活動，目前在水產運輸、生產、實驗等領域應用廣泛[4]。間氨基苯甲酸乙酯甲磺酸鹽簡稱MS-222，又名魚安定、魚安保等[5]，是一種在漁用上常用的麻醉劑，既安全，效果又理想，在全世界應用廣泛[6]。MS-222常采用藥液浸泡的方式使用。目前，國內外學者在MS-222對鱖魚[7]、尼羅羅非魚[8]、大黃魚[9]、真鯛[10]、半滑舌鰨[11]等的麻醉方面均有研究，但對黃顙魚的麻醉運輸研究較少。本試驗旨在探討MS-222對黃顙魚運輸過程中的生理生化指標的影響，以進一步了解麻醉劑在黃顙魚運輸應激過程中的影響及作用機制，為調節運輸應激提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 試驗材料 試驗黃顙魚購自貴州省銅仁市石阡縣黃顙魚養殖場，體長（16.30±0.25）cm，體重（92.80±0.10）g，用曝氣48h以上的自來水在溫度（20±2）℃、pH7.8±0.2的條件下于實驗室暫養，置于自然光照下，游動活潑，體色亮澤，無疾病，無畸形。

1.2 試驗方法 采用常規運輸辦法進行試驗。首先在漁用運輸塑料袋中裝入8L曝氣水，每個運輸袋隨機選取20尾放入其中，待魚體穩定后加入MS-222。試驗設置3個濃度處理和1個空白對照，MS-222的試驗濃度分別7、14、21mg/L。每個處理3個重復。隨后充入氧氣并捆好口袋，將充好氧氣的運輸袋整齊嚴實擺放在汽車后備箱中開始運輸4h。于運輸結束后的第0、2、4、8h每處理隨機取出3條試驗魚，解剖，取其肝臟，在預冷的磷酸鹽緩沖溶液中漂洗后，濾紙擦干，準確稱重，按1∶9（組織重量）加入預冷的磷酸鹽緩沖溶液（PBS）（0.1mol/L，pH7.2），冰浴勻漿，將制備好的勻漿液放入冷凍離心機中冷凍離心15min（溫度4℃，轉速3000r/min），取上清液保存。樣品蛋白質含量測定采用考馬斯亮藍法，嚴格按照試劑盒說明書（南京建成生物工程研究所）操作測定SOD、MDA、GSH、CAT。

1.3 數據處理 數據處理采用Excel 2007和SPSS 13.0統計分析軟件，用平均值±標準偏差表示，并進行t檢驗和差異顯著性分析。

2 結果與分析

2.1 MS-222對運輸應激下黃顙魚肝組織SOD酶活性的影響 MS-222對運輸應激下黃顙魚肝組織SOD活性的影響如圖1所示。由圖1可知，在運輸后0、2、4、8h，MS-222不同濃度處理SOD活性均低于空白對照。隨著運輸后取樣時間的增加，不同濃度的處理SOD活性總體呈降低趨勢，且差異顯著。

2.2 MS-222對運輸應激下黃顙魚肝組織MDA酶活性的影響 MS-222對運輸應激下黃顙魚肝組織MDA活性的影響如圖2所示。由圖2可知，在運輸后0、2、4、8h，MS-222不同濃度處理MDA活性顯著高于空白對照，且差異顯著。隨著運輸后取樣時間的增加，不同濃度處理的MDA活性總體呈先降低后穩定的趨勢，且差異顯著。

2.3 MS-222對運輸應激下黃顙魚肝組織CAT酶活性的影響 MS-222對運輸應激下黃顙魚肝組織CAT活性的影響如圖3所示。由圖3可知，在運輸后0、2、4、8h，MS-222不同濃度處理CAT活性均顯著高于空白對照，且差異顯著。隨著運輸后取樣時間的增加，不同濃度處理的CAT活性總體變化不大。在相同的取樣時間下，隨著MS-222處理濃度的增加，CAT活性總體表現為先升高后降低的趨勢，且差異顯著。

2.4 MS-222對運輸應激下黃顙魚肝組織GSH酶活性的影響 MS-222對運輸應激下黃顙魚肝組織GSH活性的影響如圖4所示。由圖4可知，在運輸后0、2、4、8h，MS-222不同濃度處理GSH活性均顯著高于空白對照，且差異顯著。隨著運輸后取樣時間的增加，7、14、21mg/L的處理GSH活性總體呈下降趨勢，且差異顯著。

3 結論與討論

運輸應激會使魚體在此脅迫過程中產生自我防御體系，以抵抗外界環境帶來的各種刺激，該反應屬于急性應激，在穩定狀態時體內的抗氧化系統處于動態平衡。但有研究表明，運輸會破換魚體的抗氧化酶活性，導致免疫力降低[12]，鯽魚經過震蕩后測定其血清中的皮質醇含量，結果顯著高于對照組，水平顯著高于正常組[13]。

SOD、MDA、GSH、CAT都是重要的抗氧化指標，在魚類應激中應用廣泛。本試驗通過利用麻醉劑MS-222降低黃顙魚活動力度，以降低運輸過程中的損失。有學者[14]研究MS-222和丁香酚在大口黑鱸幼魚運輸的應用中發現麻醉劑可以顯著降低應激反應，緩解不適，減少機體消耗。高仁法等[5]通過MS-222對鸚鵡魚的麻醉效果研究也發現，MS-222可以有效降低血液生化水平，減少應激損傷，這與本試驗結果一致。本試驗中，不同濃度處理SOD活性均低于空白對照，應激使魚體內產生大量自由基，誘導產生大量SOD以清除自由基，但MS-222不同濃度處理可以降低應激損傷;MDA活性總體呈先降低后穩定的趨勢;CAT和GSH活性均顯著高于空白對照，表明運輸脅迫使黃顙魚肝組織細胞受到損傷，但MS-222會降低損傷程度，這與劉奇奇等研究結果相似[15]。試驗結果表明，MS-222會使運輸后魚體的抗氧化酶活性降低，有效降低了應激反應，為魚類運輸提供了基礎數據支撐和發展方向。

參考文獻

[1]林麗珍，杜明溪，于琳琳，等.MS-222對黃顙魚麻醉效果的研究[J].水產科技情報，2019，46（01）：56-60.

[2]張娟，張其中，張占會，等.黃顙魚HSC70基因及其組織表達分析[J].水生生物學報，2009，33（03）：426-434.

[3]張玉平，劉昊昆，金俊琰，等.模擬運輸對異育銀鯽血液生理生化指標、體色和肉質的影響[J].水生生物學報，2019，43（01）：86-93.

[4]郝長杰，莊平，趙峰，等.MS-222和丁香酚對暗紋東方鲀幼魚麻醉效果的比較研究[J].海洋漁業，2019，41（05）：546-554.

[5]高仁法，劉毅，陳書暢，等.MS-222對鸚鵡魚的麻醉效果研究[J].現代農業科技，2020，（16）：172-174.

[6]王利娟，程守坤，張飲江，等.MS-222在加州鱸魚模擬運輸中的麻醉效果[J].上海海洋大學學報，2015，24（02）：235-241.

[7]郭豐紅，汪之和.MS-222對鱖魚成魚麻醉效果的研究[J].湖南農業科學，2009（07）：150-153.

[8]湯保貴，張健東，陳剛.MS-222對尼羅羅非魚的急性毒性及血液指標的影響[A].中國水產學會.2010年中國水產學會學術年會論文摘要集[C].中國水產學會：中國水產學會，2011：1.

[9]張麗，汪之和.MS-222對大黃魚成魚麻醉效果的研究[J].湖南農業科學，2010（18）：38-40.

[10]OIKAWA S，TAKEDA T，ITAZAWA Y.Scale effects of MS-222 on a marine teleost，porgy Pagrus major[J].Aquaculture，1994，121（4）：369-379.

[11]劉長琳，陳四清，何力，等.MS-222對半滑舌鰨成魚的麻醉效果研究[J].中國水產科學，2008（01）：92-99.

[12]尤孝鵬，汪蘭，熊光權，等.運輸應激對魚類生理特性和肉質的影響研究進展[J/OL].食品科學：1-8[2020-11-29].http：//kns.cnki.net/kcms/detail/11.2206.TS.20200601.1239.010.html.

[13]王文博.環境脅迫、中草藥及基因轉植對魚體非特異性免疫功能的影響[D].北京：中國科學院研究生院（水生生物研究所），2005.

[14]王文豪，董宏標，孫永旭，等.MS-222和丁香酚在大口黑鱸幼魚模擬運輸中的麻醉效果[J].南方水產科學，2018，14（06）：52-58.

[15]劉奇奇，溫久福，區又君，等.塑料袋包裝充氧運輸脅迫對四指馬鲅幼魚抗氧化系統的影響及抗應激劑的作用[J].動物學雜志，2018，53（01）：82-91.

（責編：徐世紅）