臨床微生物檢測中應用熒光定量PCR技術的臨床價值

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摘要：目的：為了深入研究不同臨床標本微生物應用熒光定量PCR技術的陽性率結果。方法：選取我院2019年6月至2020年6月期間的微生物檢驗標本66例作為研究對象，應用熒光定量PCR技術檢測，處于2020年1月-2020年6月這一時間區間的標本為參照組，應用常規檢測方法，應用對比兩組標本的陽性結果評分。結果：試驗結束后，研究組陽性評分顯著高于參照組，差異均有統計學意義（P<0.05）。結論：臨床微生物檢測中應用熒光定量PCR技術，有利于提高臨床微生物檢驗準確度，故方案值得推廣。

關鍵詞：臨床微生物檢測;熒光定量PCR技術;臨床價值

【中圖分類號】R446.5 【文獻標識碼】A 【文章編號】1673-9026（2021）01-049-01

真菌、病毒等一切不能通過肉眼看到的生物被統稱為微生物，微生物是機體出現感染的原因之一，對于不同微生物的感染需要采取不同的治療措施，如果治療藥物選擇不當，患者感染情況不僅不能得到緩解，而且治療難度還會進一步加大。因此，對臨床微生物檢測中應用熒光定量PCR技術的臨床價值成為臨床研究的重點。我院選取2019年6月至2020年6月期間的微生物檢驗標本作為研究對象，現報道如下：

1資料與方法

1.1一般資料

選取我院2019年6月至2020年6月期間的微生物檢驗標本作為試驗對象，將其隨機分組，處于2019年6月-2019年12月這一時間區間的標本為研究組，應用熒光定量PCR技術檢測，處于2020年1月-2020年6月這一時間區間的標本為參照組，應用常規檢測方法，所有檢驗標本中，創口標本14例，占比約為21.21%，呼吸道分泌標本25例，占比約為37.88%，尿液標本27例，占比約為49.09%。所有標本的基本資料對比，差異無統計學意義（P>0.05）。

1.2方法

參照組與研究組的微生物標本是不同時間段采取同樣方法采取的標本：（1）創口標本：選取病癥相同、性別一樣、年齡大致和治療方式相同的標本，使用無菌采集方法采集標本并放入無菌器皿中。（2）呼吸道標本：選擇病癥類似的患者，采集患者晨起漱口后的標本，并將無菌器皿中的標本送檢。（3）尿液標本：篩選標準與上述兩類相同，采取標本前讓患者提前飲用大量的水，患者起床后采集標本。

PCR檢測方法：往滅菌的試管中加入1.5毫升增菌液。之后與標本混勻后高速離心干預2分鐘，將上層清液去除后在剩余沉淀物中加入100微升DNA提取液，搖勻后在沸水中放置10分鐘，再高速離心10分鐘，取上層清液在PCR檢測儀中檢測。

1.3觀察指標

觀察兩組標本的陽性評分。詳細記錄相關數據并比較。

1.4統計學分析

本組實驗涉及到的數據信息統一采用SPSS20.0軟件進行分析，計量資料用t檢驗，用均值標準差表示，計數資料用X2檢驗，用%表示，組間比較，差異顯著性水平均為：P<0.05。

2結果

2.1對比兩組陽性評分

干預完成后，研究組創口標本陽性評分為（65.45±9.47），呼吸道標本陽性評分為（68.52±9.18），尿液標本陽性評分為（48.75±6.59），參照組創口標本陽性評分為（55.44±7.71），呼吸道標本陽性評分為（56.46±8.07），尿液標本陽性評分為（39.75±8.67），研究組陽性評分顯著高于參照組，差異均有統計學意義（P<0.05）。

3討論

病原微生物會對人類和動物產生各種各樣的的損害，導致各種各樣的疾病，影響人和動物的身體健康。如何檢查這些病原微生物，把提害降到最低，這就是臨床微生物檢驗存在的意義[1]。要保證微生物檢驗報告的準確性，檢測方法尤為重要。但是樣本采集也需要注意：采集時間最好是病程早期、急性期或癥狀典型時，而且必須在使用抗生素或其他抗菌藥物之前采集[2]。采集的標本應無外源性污染。在采集無菌標本時，應注意對局部及周圍皮膚的消毒，嚴格進行無菌操作;對于從正常菌群寄生部位（如口腔）采集的標本[3]，應明確檢查的目的菌，在進行分離培養時，采用特殊選擇性培養基。采集的標本均應盛于無菌容器內，盛標本的容器須先經高壓滅菌、煮沸、干熱等物理方法滅菌[4]，熒光定量PCR技術對于病毒類項目具有極大的優勢。為了我們的檢驗質量，為了病人的身體健康，對于臨床微生物檢測中應用熒光定量PCR技術的臨床價值進行研究有重要的意義[5]。本次研究中，對比不同時間相同方法采集的陽性標本，結果顯示，干預完成后，研究組創口標本陽性評分為（65.45±9.47），呼吸道標本陽性評分為（68.52±9.18），尿液標本陽性評分為（48.75±6.59），參照組創口標本陽性評分為（55.44±7.71），呼吸道標本陽性評分為（56.46±8.07），尿液標本陽性評分為（39.75±8.67），研究組陽性評分顯著高于參照組，差異均有統計學意義（P<0.05）。表明對微生物標本檢驗的陽性結果進行研究有利于臨床微生物研究。

綜上，臨床微生物檢測中應用熒光定量PCR技術，有利于提高臨床微生物檢驗準確度，故方案值得推廣。

參考文獻

[1]張若楠， 于雷， 王釗，等. 多重熒光定量PCR在動物檢測中的應用[J]. 山東畜牧獸醫， 2020， v.41;No.273（04）：77-80.

[2]盧慶文， 許青霞， 田育佼. 實時熒光定量PCR技術在檢測復發性口腔潰瘍患者口腔微生物菌群改變中的應用[J]. 中國微生態學雜志， 2019， 031（008）：899-902.

[3]王菲， 張玲， 楊佳怡，等. 基于實時熒光定量PCR檢測的沙門氏菌標準物質驗證[J]. 食品與發酵工業， 2020， v.46;No.404（08）：223-229.

[4]馮俊麗， 孟璐， 戴志遠，等. 熒光定量PCR對鮐魚中腐敗微生物的檢測法及所用引物：， CN105525019B[P]. 2019.

[5]蔣雪紛. 熒光定量PCR技術在臨床微生物檢測中的應用價值[J]. 臨床檢驗雜志（電子版）， 2020， 009（003）：P.344-345.

1.西藏高原醫學研究所;2.西藏自治區人民醫院檢驗科 850000