血清IgG4與IgG比率在IgG4相關性疾病中的診斷價值

曹穎，王冰瑩，杜鴻，曹偉，楊勇

(蘇州大學附屬第二醫院檢驗科，江蘇蘇州215000)

IgG4相關性疾病(IgG4-related diseases, IgG4-RD)是一種慢性、進行性炎癥伴纖維化的疾病，常累及淋巴結、胰腺、頜下腺、淚腺等多個臟器，并且有IgG4陽性的漿細胞浸潤在累及的組織或者器官中[1]。此病多發生在中老年男性，早期臨床表現缺乏一定的特異性，病變部位易形成腫塊性病變，常被誤診為腫瘤，因此及時診斷IgG4-RD有一定的困難[2]。研究發現，大多數IgG4-RD患者的血清IgG4水平升高[3-4]，血清IgG4水平檢測簡便、快捷且敏感度較高，為IgG4-RD的診治提供了較好的參考依據。2014年，IgG4-RD國際研討會組織全球10個國家的專家提出《IgG4相關性疾病診斷和治療的國際專家共識》，指出根據亞洲和美國Mayo醫學中心提出的IgG4含量為1.35 g/L作為參考值上限的診斷標準，約有5%的健康人和過敏性疾病等患者也會檢出血清IgG4水平升高，并且在一些自身免疫病患者中，血清IgG4也有較高的陽性率[5]。因此，血清IgG4含量不能作為確診IgG4-RD的檢查，IgG4絕對值在IgG4-RD中的診斷效能還需進一步驗證[6-7]。

本研究將血清IgG4絕對值檢測與IgG4/IgG比率2個指標聯合應用于IgG4-RD診斷，分析其在IgG4-RD與其他自身免疫病的鑒別診斷中的意義，為IgG4-RD的實驗室診斷提供依據。

1 材料與方法

1.1標本采集 收集2019年5月至2020年8月蘇州大學附屬第二醫院體檢或就診人群，共3組。健康人對照組：體檢健康者80例，年齡(45±13)歲，其中，男性40例，女性40例，自身抗體及其他所有檢查結果均無異常。IgG4-RD疾病組：IgG4-RD確診患者33例，其中，男性18例，年齡(58±9)歲；女性15例，年齡(62±13)歲，所有患者均符合IgG4-RD亞洲和美國Mayo醫學中心診斷標準[8-9]，均在用藥治療前靜脈采血，且有實驗室和影像學確診的結果，組織活檢顯示IgG4陽性漿細胞/IgG陽性漿細胞>50%，伴有組織纖維化，同時除外其他免疫性疾病和惡性腫瘤。其他自身免疫病組：共150例，包括干燥綜合征患者40例，符合美國風濕病協會與歐洲風濕病防治聯合會2016年制定的干燥綜合征診斷標準，年齡(59±9)歲；SLE患者40例，符合美國風濕病學會2012年制定的SLE診斷標準，年齡(50±12)歲；類風濕關節炎患者40例，符合美國風濕病學會2010年制定的類風濕關節炎診斷標準，年齡(60±11)歲；硬皮病患者30例，符合美國風濕病學會2012年制定的硬皮病診斷標準，年齡(56±11)歲，均采集診斷初期的第一次靜脈采血標本。本研究獲醫院醫學倫理委員會批準(文件編號JD-LK-2020-120-01)，利用以往臨床診療中獲得的醫療記錄和生物標本，不會對受試者的權利和健康產生不利的影響，已申請免除知情同意，并得到批準。

1.2儀器與試劑 IMMAGE 800特定蛋白儀、IgG免疫比濁法測定試劑盒(BECKMAN COULTER公司)、IgG4免疫比濁法測定試劑盒(柏榮診斷公司)。

1.3方法 在高速低溫離心機中以離心半徑10 cm、4 000 r/min離心10 min分離血清，使用免疫比濁法在IMMAGE 800特定蛋白儀上進行血清IgG4、IgG檢測，并計算其血清IgG4與IgG比率(IgG4/IgG)。儀器與試劑均在完成定標和質控品檢測在控后使用。參考試劑說明書相關參數，IgG檢測線性范圍：0.33～60 g/L；精密度：重復性[以變異系數(CV)表示]：3.6%，中間精密度[以CV表示]：2.52%；參考區間：7.51～15.60 g/L。IgG4檢測線性范圍：0.400～4.200 g/L；精密度：批內CV≤10.0%，批間相對偏差(R)≤15.0%；參考區間：0～2.00 g/L。IgG和IgG4試劑在臨床研究前均已進行性能驗證，符合相關標準。

2 結果

2.1各組血清IgG4水平陽性率比較 以血清IgG4水平1.35 g/L作為參考值上限，健康人對照組、其他自身免疫病組、IgG4-RD組陽性率分別為1.25%(1/80)、16.67%(25/150)和100%(33/33)，IgG4-RD組與健康人對照組陽性率差異有統計學意義(χ2=108.306，P<0.05)，對照組與其他自身免疫病組陽性率差異有統計學意義(χ2=12.368,P<0.05)。

2.2各組血清IgG、IgG4、IgG4/IgG結果比較 與健康人對照組比較，IgG4-RD組患者血清IgG、IgG4和IgG4/IgG比率明顯升高，差異有統計學意義(t=-19.011、-31.849、-22.643，P<0.05)，其他自身免疫病組患者血清IgG、IgG4也升高，差異有統計學意義(t=-8.787、-3.885，P<0.05)，但IgG4/IgG未見明顯升高。見表1。

表1 各組血清IgG、IgG4、IgG4/IgG水平比較

2.3ROC曲線分析 以體檢健康者和其他自身免疫病患者為對照組，IgG4-RD患者為實驗組，血清IgG4為2.49 g/L時，敏感性為95.45%，特異性為93.04%，曲線下面積為0.988 4；血清IgG4/IgG為13.44%時，敏感性為95.45%，特異性為96.09%，曲線下面積為0.994 5。見圖1。與IgG4≥1.35 g/L單獨作為IgG4-RD診斷指標(敏感性100%，特異性88.7%)相比，將血清IgG4≥2.49 g/L與IgG4/IgG比率為13.44%聯合應用作為IgG4-RD診斷指標(敏感性95.4%，特異性97.8%)時，其他自身免疫性疾病的IgG4陽性率由16.67%下降至3.33%。

圖1 血清IgG4、IgG4/IgG診斷IgG4相關性疾病的ROC曲線

3 討論

目前，IgG4-RD仍然沒有國際上認定的診斷標準，血清IgG4含量檢測作為一種非有創性檢查方法，廣泛應用于IgG4-RD的篩查和診斷。但應用以IgG4含量為1.35 g/L作為參考值上限的診斷標準時，其他多種疾病(尤其是自身免疫病)也可出現IgG4陽性，IgG4不能作為獨立IgG4-RD的診斷標志物[10]。如何利用實驗室已有的血清IgG和IgG4的檢測結果，提高對IgG4-RD的診斷效能，對IgG4-RD的診斷與鑒別診斷均具有重要的臨床應用價值。

本研究結果顯示，與對照組相比，IgG4-RD組及自身免疫病組患者的血清總IgG均有顯著升高，血清總IgG可以輔助IgG4-RD的診斷，但是特異性較差，僅為65%，不能作為IgG4-RD的獨立診斷指標。以血清IgG4≥1.35 g/L作為參考值上限，收集的263例血清標本中，對照組有1例、自身性免疫病組有25例超過參考值上限，對照組和其他自身免疫病組IgG4陽性率分別為1.25%、16.67%，若以IgG4≥1.35 g/L作為獨立診斷標準，會導致其他自身性免疫病出現較高假陽性。而IgG4/IgG只有在IgG4-RD組中顯著升高，其他自身免疫組與對照組差異無統計學意義(P>0.05)，說明IgG4/IgG可能成為IgG4-RD與其他自身免疫病鑒別診斷的依據。通過繪制血清IgG4、IgG4/IgG診斷IgG4-RD的ROC曲線，發現血清IgG4為2.49 g/L、血清IgG4/IgG比率為13.44%時，敏感性和特異性均較高，其他自身免疫病IgG4陽性率由16.67%下降至3.33%，假陽性率明顯下降。因此，臨床疑似IgG4-RD而血清IgG4升高不明顯時，可與血清IgG4/IgG聯合應用作為IgG4-RD診斷指標，解決臨床診斷IgG4-RD將血清IgG4作為實驗室診斷唯一指標特異性較差的問題，從而提高IgG4-RD的診斷效能。