新生兒遺傳代謝性疾病篩查中串聯質譜儀的應用探究

賈楠楠

（泰安市婦幼保健院，山東 泰安 271000）

隨著我國社會經濟的快速發展，人們對健康問題的重視程度也在不斷加深，同時科技水平的提升促進了醫學領域的蓬勃發展，所以如何將新生人口的素質進一步提升成為當下預防醫學領域中的熱點所在。相關研究結果表明，新生兒遺傳代謝性疾病是導致身體素質較差的主要因素，對其原因進行分析，是因為遺傳代謝性疾病會導致新生兒的激素水平與生化水平發生改變，所以需要對新生兒進行相應的篩查工作來明確診斷，從而盡早地給予針對性的治療措施，對新生兒的健康成長有著重要的現實意義。本文的研究對象為常規篩查的新生兒，共200例，均為我院2020年1月～2021年1月期間進行，以此來研究分析串聯質譜儀的作用與效果，現報道結果如下。

1 資料與方法

1.1 基礎資料

將我院接受常規篩查的200例新生兒作為研究對象，時間為2020年1月～2021年1月期間，男女比例為130:70，年齡為1.5～6個月，平均年齡為（3.2±0.57）個月，研究已經過醫院倫理委員會的批準通過，并且新生兒家屬知曉此次研究并簽署同意書。研究新生兒均疑似遺傳代謝性疾病，包括抽搐、生長遲緩、肝脾腫大、肌張力不足、智力發育不良、精神行為反常、反復性嘔吐、生化指標異常等。

1.2 試劑與儀器

（1）試劑：肉堿（游離肉堿，乙酰肉堿、丙酰肉堿、丙二酰肉堿、丁酰肉堿、3-羥甲基丁酰肉堿、異戊酰肉堿、異戊烯肉堿、異戊二酰肉堿、3-羥基異戊酰肉堿、己酰肉堿、己二酰肉堿、辛酰肉堿、辛烯酰肉堿、葵酰肉堿、葵烯酰肉堿、葵二烯酰肉堿、十二碳酰肉堿、十二碳烯酰肉堿、十四碳酰肉堿、十四碳烯酰肉堿、十四碳二烯酰肉堿、3-羥基十四碳酰肉堿、十六碳酰肉堿、十六碳烯酰肉堿、3-羥基十六碳酰肉堿、3-羥基十六碳烯酰肉堿、十八碳酰肉堿、十八碳烯酰肉堿、十八碳二烯酰肉堿、3-羥基十八碳酰肉堿、3-羥基十八碳烯酰肉堿）、非衍生化多種氨基酸（丙氨酸、瓜氨酸、精氨酸、甘氨酸、亮氨酸/異亮氨酸、蛋氨酸、鳥氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、纈氨酸）、琥珀酰丙酮（琥珀酰丙酮）串聯質譜測定試劑盒均為美國PerkinElmer公司生產，萃取質控血片以及新生兒濾紙干血片后直接上機測定。

（2）儀器：質譜儀、高效液相儀、自動進樣系統均由美國Waters公司提供。

1.3 實施方法

使用一次性采血針刺新生兒足跟進行采集，深度不超過3mm，將采集后的血液滴在Scheicherand Schuell 903濾紙樣本卡，然后在陰涼處將樣本陰干。濾紙干血片中的酰基肉堿、游離肉堿、氨基酸、琥珀酰丙酮萃取由25種穩定同位素標記的氨基酸、酰基肉堿、琥珀酰丙酮內標的溶劑進行，然后通過MS/MS系統展開相關分析。被測物質分子被質譜電離成各種質荷比（m/z）不同的帶電離子，根據m/z大小，將這些電粒子在時間或者空間上產生分離，最終形成質譜圖譜。對每個分析物以及與之相對應的同位素內標離子峰強度進行測定，根據已知的濃度內標便能夠將所測樣本的各分析物濃度進行自動計算。具體實驗步驟如下：通過3.2mm直徑的打孔器在濾紙血片上取樣，并將其在96孔U型板中放置，同時，將100μL內標工作液在每個孔內加入，利用黏性封膜將其封套密封后，放置恒溫震蕩孵育器中，將其震蕩5min，溫度為45℃，605～750r/min。孵育結束后，將育萃取液75μL轉移到V型底檢測板內，使用鋁膜將其封蓋，然后上機進行檢測。

2 結果

200例血液標本中，檢測結果為陽性的有3例標本，占比為1.5%，2例為甲基丙二酸尿癥，1例為異戊酸血癥。

3 討論

臨床上有很多遺傳代謝性疾病種類，就目前而言，已知的遺傳代謝性疾病種類就有1000多種，許多新生兒有著非特異性臨床表現，比如，嘔吐、抽搐、嗜睡、酸中毒、發育遲緩、肝脾腫大、精神行為反常、肌張力不足等。篩查遺傳代謝性疾病的方法有很多，在以往多采取Guthrie細菌抑制法、放射免疫分析法等，這些方法在臨床上能夠起到一定的應用效果，但這些方法通常只能夠進行一種疾病的篩查工作，隨著檢查項目的不斷增加，使得傳統的篩查方法工作量增加，從而會不斷提高篩查成本，并且工作效率較低，因此難以滿足大規模篩查遺傳代謝性疾病的需求。換而言之，傳統篩查技術所體現出的成本高、工作量大等問題，已經難以滿足人們的實際需求，因此，選擇新型有效的手段對遺傳代謝性疾病進行篩查就顯得尤為重要。

有資料顯示，我國醫科大學附屬第一醫院對串聯質譜分析方法展開了相關研究，其研究對象為172例新生兒，在分析新生兒血液樣本中所含有的酰基肉堿譜與氨基酸譜相關濃度后，其結果顯示陽性檢測結果為6.4%，11例新生兒被檢測出來，其中有機酸代謝類疾病患兒6例，氨基酸代謝類疾病3例，脂肪酸代謝類疾病2例。同時，有相關研究表明，串聯質譜所檢測的遺傳代謝性疾病可以達30多種，并且具有良好的檢測效果。串聯質譜技術所使用的技術原理主要是檢測樣品物質所具有的質荷，從而定量分析以及定性分析樣品物質，與傳統技術相比，串聯質譜技術是能夠檢測血液樣本中的70多種氨基酸與酰基肉堿，因此，能夠快速診斷與篩查30多種脂肪酸、氨基酸、有機酸類代謝性疾病。串聯質譜技術在如今已經得到了世界上多個國家的廣泛應用，是能夠在早期發現遺傳代謝類疾病，我國于2002年開始使用該技術，對于新生兒遺傳代謝類疾病的篩查與診斷有著顯著進步與提高。串聯質譜儀雖然有著許多優勢，但依舊存在不足，因此，難以將傳統檢查方法完全取代，比如，質譜儀有著昂貴的價格，維持和操作串聯質譜儀的費用相對較高等。臨床上對串聯質譜儀的機理認知在逐漸加深，同時，該技術的運用也逐漸趨于成熟，我國相對經濟較發達的地區也正在逐漸開展串聯質譜儀來篩查新生兒遺傳代謝性疾病，但要想構建完善的串聯質譜儀篩查規范以及相關檢測疾病的診治常規，就需要將二級檢測方案應用其中，包括降低假陽性、更多標志物、陽性預測值篩查提升等，串聯質譜儀的不斷穩定與成熟是能夠提高診斷準確率，進而獲得更良好的社會效益。綜上所述，串聯質譜儀的使用是能夠對新生兒遺傳代謝性疾病起到良好的篩查作用，其應用價值良好，能夠有效保障新生兒的健康發育。