HIE患兒的神經行為評分與外周血NPY、Cys C、TNF-α水平的相關性

朱萍，趙杰，程雪蓮，李德亮，高航

（南陽市中心醫院 新生兒重癥監護室，河南 南陽 473000）

缺氧缺血性腦病 （Hypoxic Ischemic Encephalopathy，HIE）是新生兒期嚴重致殘性疾病，發病率占活產新生兒2%，重度HIE致死率高達25%[1]，部分存活者可在生產發育后期出現運動發育障礙，引發智力低下、腦癱、神經發育遲緩、視覺障礙等，不僅影響小兒生存質量，還給家庭、社會帶來沉重負擔，故需盡早診斷、發現、治療[2-3]。目前臨床認為，HIE發生與免疫炎癥反應和腦部缺血缺氧有關，血清腫瘤壞死因子（tumor necrosis factorα，TNF-α）、胱抑素C（Cystatin C，Cys C）能夠客觀反映炎癥狀態，在腦缺血發作、腦出血等疾病中，可顯著增高，參與神經元修復和損傷過程[4-5]；神經肽Y(Neuropeptide Y，NPY)是一種重要神經遞質，存在于中樞神經系統中，當交感神經受到刺激后，可升高NPY，但具體作用機制尚未闡述。而本文不僅分別闡述了NPY、Cys C、TNF-α在HIE患兒神經行為功能狀態中作用機制以及相關性，還分析了NPY、Cys C、TNF-α是否可作為影響HIE患兒神經功能狀態的獨立影響因子以及疾病的預測價值，探討范圍較廣。報告如下。

1 資料和方法

1.1 資料 回顧性分析380例HIE患兒。性別：男性193例，女性187例；分娩方式：順產238例，剖宮產142例；胎齡：≤37周124例，＞37周256例；病情嚴重程度：輕度242例，中度81例，重度57例。此次試驗在2019年3月至2020年3月期間開展。同時根據神經行為評分分為2組，即神經功能正常組（n=78；≥35分），神經功能異常組（n=45；＜35分）。

納入標準：⑴符合HIE臨床診斷標準[6]；⑵母孕期身體健康。排除標準：⑴存在腎臟病、心臟病、嚴重感染性疾病者；⑵因先天性疾病、遺傳代謝病、感染病致腦損傷；⑶出現吸入性肺炎、顱內出血者。神經功能評分采用新生兒行為神經測定(neonatal behavioral neurological assessment；NBNA)評分[7]，評估一般估價、3項原始反射、4項被動肌張力、4項主張肌張力、6項行為能力，最高分40分，＜35分判定神經功能異常，≥35分神經功能正常（35～36分為可疑階段；≥37分為神經功能正常）。

1.2 方法 檢測方式：抽取受檢者3 ml肘靜脈血，采用高速離心機分離血清，3000 r/min，維持10 min，提取血清后，運用雙抗體夾心ELISA檢測法檢測TNF-α、Cys C，放射免疫法測定NPY，γ放射免疫分析儀為HH6003型（由北京核海高技術有限公司提供），試劑盒購自上海強生試劑公司或解放軍總醫院科技中心提供。嚴格按照試劑盒說明書執行操作。

1.3 觀察指標 ⑴經單因素分析兩組各項基本資料（包括分娩方式、性別、胎齡、嚴重程度、Cys C、TNF-α、NPY），再對存在差異的指標進行二元Logistic回歸分析；⑵經Pearsom法分別分析，神經行為功能狀態與TNF-α、NPY、Cys C相關性；嚴重程度與TNF-α、NPY、Cys C相關性；⑶分析Cys C、TNF-α、NPY的預測價值以及特異性、敏感性。

1.4 統計學處理 采用統計軟件SPSS22.0處理數據，相關性采用Pearsom法；計數資料用（n，%）表示，行χ2檢驗；計量資料用（±s）表示，行t檢驗；多因素采用二元Logistic回歸分析；預測價值評估采用ROC曲線分析。P<0.05為差異有統計學意義。相關性散點圖運用Graghpad Prism軟件繪圖分析。

2 結果

2.1 單因素分析 經單因素分析，兩組對比性別、分娩方式、胎齡不存在統計差異性（P＞0.05），而對比嚴重程度、Cys C、TNF-α、NPY存在明顯差異性（P＜0.05）。見表1。

表1 對比兩組各項資料

2.2 多因素分析 以“神經行為功能狀態”為因變量（賦值：0=是，1=否），以“嚴重程度、Cys C、TNFα、NPY”為自變量，納入Logistic回歸分析（賦值見表2）。多因素Logistic回歸分析顯示，嚴重程度、Cys C＞800μg/L、TNF-α水平＞100 ng/L、NPY≥33 ng/ml均為影響HIE患兒神經功能狀態的獨立影響因子（P<0.05），見表3。

表2 多因素Logistic回歸賦值

表3 HIE患兒神經功能狀態影響因素的多因素Logistic回歸

2.3 分析各指標間相關性 神經行為功能狀態與TNF-α、NPY、Cys C呈負相關性（P＜0.05）；病情嚴重程度與TNF-α、NPY、Cys C呈負相關性（P＜0.05）。如表4所示。同時HIE患兒中102例神經功能異常組，神經功能評分（32.58±3.86）分，TNF-α（156.86±12.35）ng/L、NPY（65.89±10.26）ng/ml、Cys C（3.16±0.43）mg/L。具體相關散點圖見圖1～3。

表4 分析神經功能狀態、病情嚴重程度與TNF-α、NPY、Cys C相關性

圖1 神經行為功能評分與TNF-α相關性

2.4 預測價值TNF-α的AUC預測值0.703，NPY的AUC預測值0.703，Cys C的AUC預測值0.628。如表5所示。依據AUC及標準誤，采用Z檢驗AUC差異。TNF-α與Cys C的AUC比較：Z=（0.703-0.628）/（0.030*0.030+0.033*0.033）^（0.5）=1.682，P值=[1-NORMSDIST（1.682）]*2=0.072，NPY與 Cys C 的 AUC 比 較：Z=（0.703-0.628）/（0.030*0.030+0.033*0.033）^（0.5）=1.682，P值=[1-NORMSDIST（1.682）]*2=0.072。以ROC曲線靠左上方約登指數的最大切點作為最佳臨界值，該點預測敏感度、特異度。ROC曲線見圖4。

表5 分析各項指標預測價值

圖4 TNF-α、NPY、Cys指標分別對神經功能狀態的ROC預測曲線

圖2 神經行為功能評分與NPY相關性

3 討論

圖3 神經行為功能評分與Cys C相關性

HIE是因腦組織缺血缺氧引起的神經行為功能障礙性病變，常發生在新生兒期，由于新生兒生理結構特殊，機體嬌嫩，一旦發生腦組織缺血缺氧，可迅速導致腦動脈邊緣損害，誘發血管源性腦水腫，同時還可隨著血壓波動，使得血管破裂、出血，損傷基底節區和神經元，故對于HIE患兒需選用準確、有效的特異性指標評估預后[8]。NBNA評分具有良好可信度，聯合實驗室指標，可更準確評估HIE神經功能狀態。

本研究結果顯示，經Pearsom法分析，神經行為功能狀態與TNF-α、NPY、Cys C呈負相關性，說明血清指標能夠在一定程度上評估HIE患兒神經行為功能狀態。Cys C最早在六十年代發現，由122個小分子蛋白組成，常在術后、腫瘤患者中具有高表達性[9]。機體正常狀態下，Cys C在體內細胞、組織內表達較小，當腦組織損傷時，損傷的腦血管皮質細胞和神經膠質細胞可產生大量保護性Cys C，通過血腦屏障進入血液循環，促使Cys C水平升高。本文結果顯示，Cys C與HIE患兒神經功能異常評分的r=0.322,P＜0.001，說明血清Cys C可在一定程度上反映神經系統損傷程度，與受損程度呈正相關性。TNF-α是腦缺血、缺氧時產生的重要炎癥介質[10]。適量TNF-α對機體可起到保護作用，但釋放過度，可造成機體損傷。當腦組織損傷后，血管內皮細胞、星狀膠質細胞神經元、小膠質細胞可分泌大量TNF-α，導致TNF-α水平明顯升高。張蕾[11]學者在一文中雖與本次研究相同，證明了血清TNF-α可參與HIE患兒腦損傷過程，且與NBNA評分密切相關，但僅限于血清炎癥因子探討，而本文進行了多項指標研究。NPY屬于神經遞質，當機體交感神經受到外界刺激后，可協同去甲狀腺素，作用局部微小血管，增強5-羥色胺縮血管效應，引發痙攣[12-13]。尤其當新生兒腦組織缺血缺氧狀態越嚴重時，體內代謝可出現功能性紊亂，導致血小板聚集破壞，引發微循環障礙，促使NPY水平異常升高[14-15]。此外，本次通過二元Logistic回歸分析顯示，病情嚴重程度、Cys C、TNF-α、NPY均為影響HIE患兒神經功能狀態的獨立影響因子，能夠在一定程度上反映HIE患兒真實神經功能狀態。經ROC曲線分析，TNF-α的AUC預測值0.703，NPY的AUC預測值0.703，Cys C的AUC預測值0.628，說明Cys C、TNF-α、NPY三項指標在評估HIE患兒神經功能異常狀態時，均具有一定預測價值。