正交試驗優選疏風退熱方后下藥物煎煮工藝

黃建明，羅偉良，吳 利

（廣東省佛山市中醫院，廣東 佛山 528000）

疏風退熱方有疏散風熱、透疹利咽功效，由蟬蛻、甘草、薄荷、荊芥穗等10 味藥材組方，方中薄荷、荊芥穗是后下藥，兩者所含揮發油與方劑功效有直接關系，故其煎煮方法對疏風退熱方療效有重要影響。薄荷和荊芥穗揮發油的提取率與煎煮前藥材浸泡時間相關［1-2］，煎煮溫度影響揮發油的提取速率［3］，煎煮壓力影響揮發油提取率［4］。本研究中以薄荷和荊芥穗揮發油的含量為考察指標，對疏風退熱方中薄荷和荊芥穗的煎煮工藝進行優化。現報道如下。

1 儀器與藥材

1.1 儀器

揮發油測定儀（上海玻璃儀器廠）；ES-J120 型電子分析天平（沈陽龍騰電子稱量儀器有限公司，精度為0.1 mg）；KDM 型調溫電熱套（山東省鄄城永興儀器廠）。

1.2 藥材

蟬蛻（批號為 170601）、甘草（批號為 170701）、薄荷（批號為 170801）、荊芥穗（批號為 170801）、桔梗 （批號為191201）、浙貝母（批號為 191101）、防風（批號為 190901）、黃芩（批號為 191001）、玄參（批號為 191201）、天花粉（批號為191101）等藥材飲片均購自廣州至信藥業股份有限公司。

2 方法與結果

2.1 薄荷煎煮工藝優選

揮發油含量測定：由于薄荷和荊芥穗揮發油的相對密度小于1，適合采用2015 年版《中國藥典（四部）》通則2204 揮發油測定法的甲法測定。具體步驟如下，量取供試品溶液各10 mL，置燒瓶中，加適量水及玻璃珠數粒，振搖混合，連接揮發油測定器與回流冷凝管；加水入冷凝管上端至揮發油測定器的刻度部分并流入燒瓶為止；置電熱套中加熱至沸，保持微沸狀態至油量不再增加，停止加熱并放置片刻，將水緩緩從下端的活塞放出至油層上端到0 線上5mm 處；放置1h，開啟活塞至油層上端與0 線平齊，讀取揮發油量，并計算疏風退熱方中揮發油的含量［5］。

正交試驗：以浸泡時間（A）、煎煮時間（B）、煎煮壓力（C）、煎煮溫度（D）為考察因素，以薄荷揮發油的溶出率為考察指標，采用 L9（34）正交試驗設計疏風退熱方中薄荷的煎煮工藝。因素水平見表1，L9（34）正交試驗設計與結果見表2，方差分析結果見表3。由表2、表3 可知，對薄荷揮發油溶出的影響強弱順序為煎煮時間＞浸泡時間＞煎煮壓力＞煎煮溫度，最佳組合為A2B2C1D1，即浸泡 20 min 后，在 100 kPa、100 ℃下煎煮 10 min。

2.2 荊芥穗煎煮工藝優選

以浸泡時間（A）、煎煮時間（B）、煎煮壓力（C）、煎煮溫度（D）為考察因素，以荊芥穗揮發油的溶出率為考察指標，采用 L9（34）正交試驗設計優選疏風退熱方中荊芥穗的煎煮工藝。因素水平見表1，L9（34）正交試驗設計與結果見表4，方差分析結果見表5。由表4、表5 可知，對荊芥穗揮發油溶出影響強弱順序為煎煮時間＞浸泡時間＞煎煮壓力＞煎煮溫度，最佳組合為A2B1C1D1，即浸泡 20 min，在 100 kPa、100 ℃下，煎煮 5 min。

表1 薄荷、荊芥穗煎煮工藝因素水平Tab.1 Factors and levels of Mentha haplocalyx and Spica Schizonepetae tenuifoliae

表2 薄荷煎煮工藝 L9（34）正交試驗設計與結果Tab.2 Design and results of the L9（34）orthogonal test of decoction process of Mentha haplocalyx

表3 薄荷煎煮工藝方差分析結果Tab.3 Results of the variance analysis of decoction process of Mentha haplocalyx

表4 荊芥穗煎煮工藝 L9（34）正交試驗設計與結果Tab.4 Design and results of the L9（34）orthogonal test of decoction process of Spica Schizonepetae tenuifoliae

表5 荊芥穗煎煮工藝方差分析結果Tab.5 Results of the variance analysis of decoction process of Spica Schizonepetae tenuifoliae

2.3 工藝確定

綜合分析，疏風退熱方的最佳煎煮工藝為浸泡疏風退熱方藥材飲片（除薄荷和荊芥穗外）30 min，煎煮至水開后再煎煮30 min，后加入已浸泡20 min 的薄荷，煎煮5 min，再加入浸泡20 min 的荊芥穗，再煎煮5 min，煎煮過程均在100 ℃及100 kPa 氣壓下完成。

2.4 驗證試驗

分別取5 份薄荷或荊芥穗藥材飲片，分別按2.1 項下、2.2 項下方法煎煮，測定薄荷、荊芥穗揮發油含量。并計算溶出率。結果，薄荷揮發油平均溶出率為11.34% 、RSD 為 0.25% （ n ＝ 5），荊芥穗揮發油平均溶出率為 12.32% 、RSD 為 0.25% （ n ＝ 5）。證實了疏風退熱方中薄荷揮發油和荊芥穗揮發油的最佳煎煮工藝穩定可靠。詳見表6。

表6 驗證試驗結果（n ＝5）Tab.6 Results of verification tests（n ＝ 5）

3 討論

3.1 影響因素

藥物煎煮時間對藥物煎煮效果影響很大［6］，對質地疏松的花葉類藥材的影響更甚［7］。由于花類和葉類不像根類藥物質地堅硬，且均分布有氣孔［8］，即使藥物不加熱煎煮，揮發油也會不斷通過氣孔不停散發［9］，在藥液的煎煮中能快速達到溶出平衡，故花葉類藥物的煎煮時間不宜過長［10］，以免揮發油大量散失。薄荷和荊芥穗作為常用解表劑，組織中密布各種不同的氣孔［11］，極易散失揮發油，故兩者的煎煮時間需比一般的后下藥物短［12］，煎煮過久會降低揮發油含量，影響療效［13］。且荊芥穗屬花類，相對更易散失揮發油，提取時間應比薄荷短。

藥物浸泡對藥液質量的影響也很大［14］。充分浸泡使植物細胞膨脹，易破裂，有效成分易滲透溶出［15］。熱水浸泡易引起植物細胞中的蛋白質凝固［16］，細胞不易破裂，有效成分難以溶出［17］，故宜冷水浸泡。本研究中薄荷和荊芥穗浸泡后揮發油的煎出時間要比未浸泡的藥材縮短，含量更高［18］。不同的浸泡時間還會影響揮發油溶出度，充分浸泡的藥物藥液中揮發油含量高，可能與藥材中揮發油散發出來的通道被變性的淀粉堵塞有關。煎煮溫度對薄荷和荊芥穗的揮發油也有一定影響，但由于揮發油在常溫下已開始揮發，故溫度的提升雖也加速了提取，但未達到重要影響的程度。

3.2 不足

本研究中發現，按疏風退熱方的最佳工藝煎煮條件煎煮，所得藥液中含有的薄荷揮發油和荊芥穗揮發油均比各自單一煎煮所得揮發油少。深入探究發現，其中原因之一是揮發油間的密度不同，體積自然不同，混合后的薄荷和荊芥穗揮發油的體積相比于單一成分揮發油的體積有所改變［19］。還因為薄荷揮發油中的成分和荊芥穗揮發油中的成分發生了反應，生成了新物質［20］，減少了揮發油的體積，但上述影響因素尚未在本研究中考慮，留待后續深入研究。

綜上所述，該煎煮工藝操作簡便、穩定可靠，可用于疏風退熱方中后下藥物的煎煮。