子癇前期孕婦IFI16表達水平與ET-1、NO、臨床指標的相關性及對妊娠結局的影響

郝榮，劉清秀，趙富清，陳光

(1.重慶市開州區人民醫院產科，重慶 405400；2.漢中市中心醫院婦科，陜西 漢中 723000)

子癇前期是妊娠期特有疾病，可導致孕產婦心、腦、腎等多臟器功能損傷，并可導致胎兒宮內窘迫，最終致母嬰不良妊娠結局發生[1]。近年來，隨著人們生活水平的提高，生活習慣和飲食結構也發生了明顯改變，作息不規律以及高鹽、高脂飲食成為大部分年輕人的生活常態，加之近年我國二胎政策，高齡孕產婦急劇增加，子癇前期患病率逐年升高，已成為我國孕產婦和圍生兒死亡的主要原因[2]。目前尚無針對子癇前期的統一方案，因此探討其發病機制以尋找有效的治療方案十分重要。國內外研究認為，子癇前期發病過程主要為胎盤灌注不足以及全身血管內皮細胞激活或損傷，導致多系統、多器官不同程度受累，而內皮細胞損傷是子癇前期發病的中心環節[3-4]。研究發現，滋養細胞微粒、抗血管生成因子和細胞游離核苷酸等子癇前期胎盤組織“毒性因子”在子癇前期內皮細胞損傷中占有重要地位[5]。γ干擾素誘導蛋白16(interferon-γ-inducible protein 16，IFI16)作為HIN-200家族成員之一，在上皮細胞、成纖維細胞、內皮細胞和胎盤滋養細胞中均有表達，而氧化應激、細胞密度和炎癥因子等均可引起IFI16表達上調[6-7]。當存在自身免疫性相關疾病時，高水平IFI16可致內皮細胞功能障礙[8]。而子癇前期患者胎盤處于強氧化應激和高炎癥反應狀態，提示IFI16與子癇前期相關，但具體相關機制尚不明確[9]。本研究旨在探討子癇前期患者IFI16的表達情況，并分析其對臨床特征和妊娠結局的影響，現報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2016年6月至2018年6月重慶市開州區人民醫院產科收治的98例子癇前期患者作為子癇前期組，年齡20～40歲，平均(31±6)歲；孕次2～3次，平均(2.78±0.35)次；產次2～3次，平均(2.26±0.21)次；采血時間：妊娠29～35周，平均(32.4±4.3)周。同期選擇行常規孕檢的100名單胎健康孕婦作為對照組，年齡20～40歲，平均(32±5)歲；孕次2～3次，平均(2.82±0.38)次；產次2～3次，平均(2.31±0.25)次；采血時間：妊娠28～35周，平均(32.3±4.2)周。兩組年齡、孕次、產次及采血孕周比較差異無統計學意義(P>0.05)。本研究經重慶市開州區人民醫院倫理委員會批準，所有研究對象及其家屬均知情同意。

1.2納入與排除標準 子癇前期組納入標準：①符合子癇前期診斷標準[10]者；②單胎妊娠；③確診前未給予任何處理；④全程參與且資料完整者。排除標準：①合并其他妊娠期特殊疾病者；②孕前合并高血壓、糖尿病、腎病、自身免疫性疾病及腫瘤等；③有煙酒不良嗜好及傳染病史者。

1.3方法 采集兩組孕婦空腹靜脈血3 mL，以離心半徑13.5 cm，3 000 r/min離心10 min，取上清置于-80 ℃條件下EP管中保存。采用酶聯免疫吸附法檢測血清IFI16、內皮素-1(endothelin-1，ET-1)和一氧化氮(nitric oxide，NO)水平，具體步驟如下。①稀釋標準品；②加樣：設置待測樣品孔、標準孔和空白對照孔，并完成加樣；③孵育：封閉酶標板后于37 ℃恒溫箱中孵育30 min；④洗板5次；⑤加酶標抗體：向待測樣品孔和標準孔中加入酶標抗體；⑥再次孵育及洗板3次；⑦顯色：加顯色劑，37 ℃避光放置10 min；⑧終止：加終止液；⑨檢測：加入終止液后15 min，將酶標板置于酶聯免疫分析儀進行分析。

1.4觀察指標 收集并記錄兩組血壓、24 h尿蛋白定量、血清總蛋白、白蛋白、尿素氮、尿酸、肌酐、β2-微球蛋白、α1-微球蛋白和胱抑素C等臨床特征相關指標，其中血壓為同一時間的電子血壓計檢測，總蛋白、白蛋白、尿素氮、尿酸、肌酐、β2-微球蛋白、α1-微球蛋白和胱抑素C均使用全自動生化儀(美國貝克曼公司生產，型號：AU640型)檢測。記錄兩組妊娠結局，母體不良結局包括子癇、彌散性血管內凝血、急性心衰和肝功能損害；圍生兒不良結局包括死胎、新生兒透明膜病、新生兒窒息和新生兒心臟發育不全等。

2 結 果

2.1兩組血清IFI16、ET-1和NO水平比較 子癇前期組IFI16蛋白和ET-1水平明顯高于對照組，而NO水平明顯低于對照組(P<0.01)。見表1。

表1 兩組血清IFI16、ET-1和NO水平比較

2.2兩組臨床特征相關指標比較 子癇前期組血壓、24 h尿蛋白定量、尿素氮、尿酸、肌酐、β2-微球蛋白、α1-微球蛋白和胱抑素C水平均高于對照組，而總蛋白和白蛋白水平低于對照組(P<0.01)。見表2。

表2 兩組臨床特征相關指標比較

2.3IFI16與ET-1、NO及臨床特征相關指標的關系 Pearson相關性分析結果顯示，子癇前期血清IFI16與ET-1、收縮壓、舒張壓、24 h尿蛋白定量和胱抑素C呈明顯正相關(P<0.05)，與NO、總蛋白和白蛋白呈明顯負相關(P<0.05)；但與尿素氮、尿酸、肌酐、β2-微球蛋白和α1-微球蛋白無明顯相關性(P>0.05)。見表3。

表3 IFI16與ET-1、NO及臨床特征相關指標的相關性分析結果

2.4IFI16、ET-1和NO水平與子癇前期妊娠不良結局的關系 在100名健康孕婦中，2例發生母體不良結局(1例急性心力衰竭、1例肝功能損害)，2例發生圍生兒不良結局(1例新生兒透明膜病和1例新生兒窒息)。在98例子癇前期患者中，56例未發生妊娠不良結局，30例發生母體不良結局(10例子癇、6例彌散性血管內凝血、6例急性心力衰竭、8例肝功能損害)；20例發生圍生兒不良結局(7例死胎、6例新生兒透明膜病、3例新生兒窒息、4例新生兒心臟發育不全)。子癇前期組母體和圍生兒不良結局發生率均高于對照組[(30.61%(30/98)比2.00%(2/100)，20.41%(20/98)比2.00%(2/100)](χ2=29.905，P<0.001；χ2=16.982，P<0.001)；子癇前期患者中，母體不良結局組和圍生兒不良結局組孕婦血清IFI16、ET-1明顯高于妊娠結局正常組(t=11.131、t=7.880,均P<0.001；t=9.768、t=7.295，均P<0.001)，而NO水平低于妊娠結局正常者(t=8.437、t=8.005,均P<0.001)。見表4。

表4 子癇前期患者IFI16、ET-1和NO水平與妊娠不良結局的關系

2.5IFI16、ET-1和NO預測子癇前期患者不良妊娠結局價值的分析 通過繪制并分析ROC曲線顯示，IFI16、IFI16+ET-1、IFI16+NO和IFI16+ET-1+NO在預測子癇前期母體不良結局和圍產兒不良結局方面均具有一定價值(P<0.05)，但三者聯合檢測的預測價值最高，見表5、表6、圖1。

表5 IFI16、ET-1和NO在子癇前期母體不良結局中的預測價值

表6 IFI16、ET-1和NO在子癇前期圍生兒不良結局中的預測價值

IFI16：γ干擾素誘導蛋白16；ET-1：內皮素-1；NO：一氧化氮；ROC：受試者工作特征曲線

3 討 論

據統計，子癇前期的全球發病率為3%～8%，死亡人數占產婦死亡的15%[11-12]，故引起全球廣泛關注。子癇前期早期主要與胎盤植入部位螺旋動脈重鑄障礙相關，隨著病情進展，可致血管內皮細胞損傷，外周血管阻力增加，導致高血壓和蛋白尿出現[13]。ET-1主要存在于血管內皮細胞，是內皮細胞激活和(或)損傷的血清學指標之一[14]。但目前對于內皮細胞損傷致子癇前期產生的具體機制仍不清楚。有學者認為，胎盤來源“細胞因子”與母體內皮細胞相互作用致內皮細胞損傷是胎盤組織和母體血管內皮損傷之間的重要紐帶[15]。此外，目前針對子癇前期的治療方法也僅是對癥治療，而非針對病因的治療，患者癥狀往往持續直至胎盤娩出，故對胎兒和母體的損傷是持續性的[16]。另有學者發現，子癇前期對母嬰的損傷可持續至妊娠及分娩結束后，有子癇前期病史母體和子代(特別是剖宮產兒)未來高血壓和心血管疾病的患病率遠高于正常妊娠者及其子代[17]。因此，明確子癇前期的發病機制，進行病因學治療對子癇前期母嬰近遠期生活狀態均十分重要。

IFI16作為HIN-200家族成員之一，其N端為PYRIN結構域，C端為HIN-200結構域，中間被一段富含絲氨酸-蘇氨酸-脯氨酸的間隔區隔開(S/T/P)，可被信使RNA剪切產生3種亞型：IFI16A、IFI16B和IFI16C[18]。早期研究認為，IFI16蛋白是一種核蛋白，后續發現其可以長度依賴性方式與雙鏈DNA結合，在病毒DNA識別和固有免疫推動方面占有一定地位[19]。近年研究發現IFI16蛋白具有調控細胞生長、分化、凋亡及DNA損傷等細胞生物學功能[20]。本研究中，子癇前期組IFI16蛋白和ET-1水平明顯高于對照組，而NO水平顯著低于對照組，提示IFI16可能參與子癇前期的發生發展，與上述研究結果一致。張展等[21]研究發現，子癇前期患者胎盤組織和血清中的IFI16水平明顯升高，但該研究未涉及妊娠結局。本研究通過Pearson相關分析結果顯示，IFI16與ET-1、NO及部分臨床特征相關指標明顯相關，提示IFI16可能主要通過損傷血管內皮細胞影響子癇前期臨床特征，與上述觀點一致。同時，本研究結果還顯示，子癇前期患者中母體不良結局組和圍生兒不良結局組孕婦血清IFI16、ET-1明顯高于妊娠結局正常組，而NO水平則相對降低，提示IFI16、ET-1和NO與子癇前期妊娠不良結局有關，其原因可能是IFI16和ET-1是子癇前期疾病進展的重要危險因子，而NO是子癇前期的主要保護因子[22]。本研究通過繪制ROC曲線發現，IFI16在預測子癇前期母體不良結局和圍生兒不良結局上均有一定價值，但IFI16、ET-1和NO三者聯合診斷價值最高，為子癇前期孕兒不良結局的預測提供了新的方向。

綜上所述，與正常妊娠孕婦相比，子癇前期患者血清IFI16水平升高，且IFI16水平與ET-1、臨床特征變化及妊娠不良結局密切相關，有望成為預測不良妊娠結局的有效指標。