一例兔斯氏艾美爾球蟲病的診斷和治療

韓 瑩

吉林農業大學動物醫學院，吉林長春 130118

兔球蟲病是由艾美爾科的球蟲引起的一種寄生性原蟲病，隨著規模養殖的迅速發展，該病對我國養兔業的危害日益嚴重，中國是養兔大國，每年由兔球蟲病造成的經濟損失巨大[1]。目前，報道的感染家兔的艾美爾屬球蟲有17 種，其中斯氏艾美爾球蟲的致病力最強、危害最大，它寄生于兔的肝膽管上皮細胞，能引起嚴重的肝球蟲病。隨著我國畜牧產業的迅速發展，家兔養殖集約化程度越來越高，兔球蟲病導致家兔死亡率越來越高，給養殖戶帶來很大的經濟損失，各種品種和不同年齡的兔都可感染，但以1 ～3 月齡的兔最易感而且病情嚴重，死亡率高。成年兔發病輕微，多為帶蟲者，成為重要的傳染源[2]。

1 發病情況及臨床癥狀

吉林省長春市凈月區玉潭鎮一養兔場，飼養5 000 只肉兔，其中有將近500 只40 日齡幼兔出現拉稀，精神沉郁，腹圍增大，觸摸有疼痛感，背毛凌亂，每日死亡20 只左右，自行到獸藥店購買地克珠利藥品治療3 d，效果不明顯，每日幼兔繼續出現死亡現象。

2 臨床檢查

取病死幼兔進行剖檢，發現幼兔腸系膜出血，肝臟有大量白色的結節，取糞便，采用飽和食鹽水漂浮法檢測卵囊，在顯微鏡下觀察，可見大量兔斯氏艾美爾球蟲卵囊，肝臟結節壓片，在顯微鏡下觀察，可見不同發育階段的蟲體和卵囊。

3 實驗室檢查

取病死幼兔肝臟，用剪刀剪碎肝臟，用研磨棒在研磨碗里研磨肝臟，加入適量的蒸餾水，攪拌均勻，將攪拌液過300 目網篩，將濾液以4 000轉的速度離心15 min，棄上清液，白色沉淀即為兔斯氏艾美耳球蟲卵囊。參考康為提取基因組盒子操作說明提取基因組，提取斯氏艾美爾球蟲總DNA。采用巢氏PCR 檢測方法鑒定，斯氏艾美耳球蟲巢氏PCR 18SrDNA 基因引物序列：Es-18S-eF TGAGAAACG GCTACCACA，Es-18S-eR GAAGTATTCAGGGCGACAA，Es-18S-iF TCGAGGTAGTGACGAGAAATA，Es-18S-iR TGACCACGACAGAAATCCA。兩輪反應體系相同，反應體系：2.5 μL 的10×Buffer，2 μL 的dNTP，上游引物和下游引物各1 μL，1 μL 的樣本，0.2 μL 的Taq 酶，17.3 μL 的ddH2O，總體積25 μL。兩輪反應條件相同，反應條件：94 ℃2 min,94 ℃30 s，55 ℃30 s,72 ℃1 min ，72 ℃10 min ,4 ℃保存，30 個循環擴增。對兩組巢氏PCR 產物進行瓊脂糖凝膠電泳，電泳結果顯示，18 SrDNA 基因組擴增出的條帶片段大小約為194 bp，與目的條帶大小一致，紫外燈環境中，切掉膠塊的目的片段并放置在1.5 mL 的離心管中，送到吉林省庫美生物科技有限公司測序，測序結果在NCBI 的BLAST 中比對序列為100%，鑒定結果為兔斯氏艾美爾球蟲。

4 治療

兔斯氏艾美耳球蟲是兔球蟲病中，致死率最高，且難治愈，主要以前期預防為主，治療用磺胺氯吡嗪鈉可溶性粉，在飼喂的兔糧中混入藥物，每1 000 kg 飼料中添加600 g,連用5 ～10 d，休藥期為28 d，不得作為飼料添加劑長期應用。雖然死亡率下降了，但是病兔一般都預后不良，生長緩慢，無經濟價值和實驗價值，肝臟損傷不可逆。

5 防治措施

目前防治措施主要是在飼料和飲水中加入抗球蟲藥來預防兔球蟲病，定期檢測兔場糞便，確定感染球蟲的種類，不要盲目用藥，也不要長期的不科學喂藥，防止產生耐藥蟲株，加強飼養管理，定期清理糞便，飼料槽和飲水槽定期消毒，籠舍采用火焰消毒，或者用10%氨水消毒。定期對成年公兔和母兔進行球蟲檢測，也可以采用中藥復方進行兔球蟲病的預防治療。目前還沒有兔斯氏艾美爾球蟲疫苗。