四川攀枝花地區(qū)健康成年體檢人群外周血血小板及其相關(guān)參數(shù)生物參考區(qū)間的建立與評(píng)價(jià)

李家明，唐伍濤，李欣霏，楊德娟，鄧明甜，胡昌玲（.攀鋼集團(tuán)總醫(yī)院檢驗(yàn)科，四川攀枝花 67000;.攀鋼集團(tuán)總醫(yī)院實(shí)習(xí)生，四川攀枝花 67000；.大家醫(yī)學(xué)檢測(cè)中心，成都 67)

隨著全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀的廣泛應(yīng)用，分析參數(shù)增加，為臨床醫(yī)生診治提供更多有益幫助。反映血小板參數(shù)除常見(jiàn)的血小板計(jì)數(shù)（platlet count,PLT）外,還有平均血小板體積（mean platlet volume,MPV）、血小板比容（platlet hematocrit,PCT）、血小板體積分布寬度（platlet volume distribution width，PDW）用PDW-SD表示和大型血小板比率（platlet large cell ratio,P-LCR）等[1]。近年來(lái)血小板及相關(guān)參數(shù)價(jià)值越來(lái)越受到臨床重視，但其生物參考區(qū)間目前沒(méi)有統(tǒng)一規(guī)范標(biāo)準(zhǔn)，由于按照國(guó)際化學(xué)委員會(huì)關(guān)于實(shí)驗(yàn)室生物參考區(qū)間建立的方法要求[2],程序復(fù)雜，因此國(guó)內(nèi)實(shí)驗(yàn)室多直接引用行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)[3]或儀器廠家標(biāo)準(zhǔn)，缺乏符合自身實(shí)際的參考區(qū)間，給臨床醫(yī)生診治帶來(lái)困擾。當(dāng)前行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)中和攀枝花地區(qū)均缺乏血小板相關(guān)參數(shù)生物參考區(qū)間，因而有針對(duì)性地建立適合本地區(qū)的參考區(qū)間非常重要[4]，為此，筆者對(duì)攀枝花地區(qū)健康成年人群血小板及相關(guān)參數(shù)的參考區(qū)間進(jìn)行探討?，F(xiàn)報(bào)道如下：

1 材料與方法

1.1 研究對(duì)象 收集2018年4～10月健康體檢9 259例全血樣本，選擇符合要求(包括肝功能、腎功能、血脂、血糖、尿酸、B超、胸透、無(wú)貧血、心電圖等均無(wú)異常、各項(xiàng)化驗(yàn)結(jié)果正常)的健康體檢人群1 026例為研究對(duì)象,其中男性502例，年齡在17～56歲,平均年齡34.3±11.9歲，女性524例，年齡在17～57歲,平均年齡36.3±9.6歲，并按年齡分為A組(17～25歲)、B組(26～44歲)和C組(≥45歲)三組。

1.2 儀器和試劑 SysmexXN-1000 全自動(dòng)血液分析儀，試劑采用原裝配套試劑，校準(zhǔn)物及室內(nèi)質(zhì)控品均采用Sysmex 原裝產(chǎn)品，儀器由工程師定期校正，參加國(guó)家衛(wèi)健委和省臨檢中心室間質(zhì)評(píng)結(jié)果均合格。

1.3 方法 每日進(jìn)行2個(gè)水平的室內(nèi)質(zhì)控分析，在控后進(jìn)行常規(guī)標(biāo)本檢測(cè)，收集健康體檢中心采集由EDTA‐K2抗凝劑的2ml 靜脈全血樣本，專業(yè)技術(shù)人員2h 內(nèi)完成檢測(cè)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 統(tǒng)計(jì)分析血小板計(jì)數(shù)及相關(guān)參數(shù)時(shí)，若血小板參數(shù)中有一項(xiàng)為離群值或儀器未分析出該參數(shù)時(shí)，則這個(gè)樣本所有結(jié)果均被剔除。采用SPSS17.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示健康體檢人群的結(jié)果，按不同性別、年齡分組，并與相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的參考區(qū)間比較。兩組間比較采用兩大樣本均數(shù)比較的u檢驗(yàn)，年齡組間的兩兩比較采用q檢驗(yàn),P-LCR 采用兩樣本率比較的χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

1.5 驗(yàn)證評(píng)價(jià) 根據(jù)WS/T402-2012 要求，本次參考區(qū)間驗(yàn)證試驗(yàn)采用25例（男性13例，女性12例）健康人標(biāo)本，且觀測(cè)值落在參考區(qū)間外的比例低于10%[5]，符合要求。

2 結(jié)果

2.1 健康體檢男女PLT，MPV，PCT，PDW-SD，P-LCR檢測(cè)結(jié)果 見(jiàn)表1。MPV,PCT 和PDW-SD 經(jīng)u檢驗(yàn)，P-LCR經(jīng)χ2檢驗(yàn)，男女差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），可合并參考區(qū)間，MPV 9.5～13.5fl，PCT(0.18～0.36)×109/L，PDW-SD 9.2～19.8fl，P-LCR(21.3～48.7)%；而PLT 男女差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）：男性(156～320)×109/L，女性(164～336)×109/L。

表1 成年男女健康體檢結(jié)果（±s）

表1 成年男女健康體檢結(jié)果（±s）

項(xiàng)目 男（n=502） 女（n=524） u/χ2 P PLT (×109/L） 238±42 250±44 3.849 <0.05 MPV （fl） 11.3±0.86 11.5±0.83 1.156 >0.05 PCT (×109/L） 0.27±0.04 0.29±0.04 0.225 >0.05 PDW-SD（fl） 14.1±2.1 14.3±2.0 0.779 >0.05 P-LCR（%） 34.1±5.9 35.8±5.7 1.382 >0.05

2.2 健康體檢男性A組、B組和C組的PLT，MPV，MPV，PDW，P-LCR檢測(cè)結(jié)果 見(jiàn)表2。男性健康體檢人群不同年齡組PLT，MPV，PCT，PDW-SD 經(jīng)q檢驗(yàn)，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（q=0～1.17，P>0.05）；A組和C組的P-LCR 經(jīng)χ2檢驗(yàn)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=3.41，P<0.05)。

表2 不同年齡組男性健康體檢結(jié)果（±s）

表2 不同年齡組男性健康體檢結(jié)果（±s）

項(xiàng)目 A（n =173） B（n =203） C（n =126）PLT(×109/L） 247±42 230±41 236±42 MPV（fl） 11.1±0.8 11.4±0.9 11.4±0.9 PCT (×109/L） 0.29±0.04 0.26±0.04 0.27±0.04 PDW-SD（fl） 13.6±1.9 14.3±2.2 14.3±2.2 P-LCR（%） 32.4±5.4 35±6.0 35.4±5.9

2.3 健康體檢女性A組、B組和C組PLT，MPV，PCT，RDW，P-LCR檢測(cè)結(jié)果 見(jiàn)表3。

表3 不同年齡組女性健康體檢檢測(cè)結(jié)果（±s）

表3 不同年齡組女性健康體檢檢測(cè)結(jié)果（±s）

項(xiàng)目 A（n =104） B（n =296） C（n =124）PLT(×109/L） 243±42 251±44 255±43 MPV（fL） 11.6±0.8 11.5±0.8 11.5±0.8 PCT(×109/L） 0.28±0.04 0.29±0.04 0.29±0.04 PDW-SD（fL） 14.5±2.0 14.3±2.0 14.0±2.0 P-LCR（%） 36.3±5.7 35.8±5.7 35.6±5.8

女性健康體檢人群MPV，PCT，RDW 經(jīng)q檢驗(yàn)，P-LCR 經(jīng)χ2檢驗(yàn)不同組間檢測(cè)結(jié)果差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（q=0～2.1，χ2=0.24～1.38，均P>0.05）；但女性A組與C組的PLT 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(q=2.92，P<0.05)，A組PLT 均值低。

2.4 生物參考區(qū)間驗(yàn)證 抽檢健康體檢人群25例（男性13例，女性12例），僅1例PDW-SD 不在新建參考區(qū)間范圍內(nèi)，觀測(cè)值落在參考區(qū)間外的比例為4%，低于10%，符合要求。

3 討論

檢驗(yàn)項(xiàng)目生物參考區(qū)間是臨床醫(yī)生評(píng)估受檢者健康與否以及進(jìn)行疾病診斷、治療、預(yù)后判斷的重要依據(jù)，建立適合、可靠的參考區(qū)間對(duì)臨床醫(yī)生至關(guān)重要，更是臨床實(shí)驗(yàn)室做好服務(wù)和質(zhì)量保證的重要職責(zé)。實(shí)驗(yàn)室簡(jiǎn)單地引用文獻(xiàn)或不加驗(yàn)證的直接使用廠商給定的參考范圍存在缺陷[6]。近20年來(lái)，國(guó)內(nèi)一些專家和學(xué)者在參考區(qū)間方面做了很多研究和探討，不斷優(yōu)化參考區(qū)間，只有合適參考區(qū)間的檢驗(yàn)結(jié)果才能為臨床診治提供更好的幫助[7]。2013年我國(guó)衛(wèi)生部發(fā)布的成年人相關(guān)參考區(qū)間是基于平原地區(qū)建立的，與攀枝花地區(qū)實(shí)際情況不同。攀枝花地區(qū)屬南亞熱帶氣候，年平均氣溫20.3℃，日照時(shí)數(shù)是四川盆地的2～3倍，太陽(yáng)輻射強(qiáng)，是四川省年熱量值最高的地區(qū)。不僅有大規(guī)模的工礦企業(yè)，且是典型的移民城，多民族聚居區(qū)，居住海拔多在1 000～1 500 米。筆者對(duì)本地成人健康體檢人群的血小板及其相關(guān)參數(shù)進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)男女間MPV，PCT，PDW-SD，P-LCR 無(wú)差異；而PLT 男女有差異，男性(156～320)×109/L，女性(164～336)×109/L，且女性PLT 平均值較男性高。男性A組和C組P-LCR 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，且隨年齡增長(zhǎng)P-LCR有上升趨勢(shì)。女性A組和C組PLT 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，且隨年齡增長(zhǎng)PLT 有上升的趨勢(shì)。同一性別相同指標(biāo)不同年齡段間個(gè)別存在差異，如：男性A組的PLT，PCT 均值水平較其他年齡組略偏高；而PDW-SD，P-LCR 則相反；女性A組PLT 較其他兩組偏低。

攀枝花地區(qū)成年健康人群PLT 及相關(guān)參數(shù)參考區(qū)間與WS/T405‐2012 標(biāo)準(zhǔn)、儀器廠家以及田斌等[8]報(bào)道的長(zhǎng)沙地區(qū)的相關(guān)結(jié)果比較，見(jiàn)表4。

表4 攀枝花地區(qū)PLT 及相關(guān)參數(shù)參考區(qū)間與相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)比較

與WS/T405‐2012 標(biāo)準(zhǔn)比較：本地男、女性PLT 參考范圍下限均高出標(biāo)準(zhǔn)下限（30～40）×109/L，而上限均低于標(biāo)準(zhǔn)的上限，區(qū)間范圍較標(biāo)準(zhǔn)窄。與儀器廠家范圍比較：本地成年人MPV，PCT 參考范圍與儀器廠家范圍接近，本地MPV 上限略高；本地PDW范圍寬，且上限高；本地P-LR 下限和上限均明顯高于儀器廠家范圍。與田斌[8]報(bào)道的長(zhǎng)沙地區(qū)比較：本地區(qū)PLT 男女有差別，基數(shù)高、范圍寬；MPV 相近；PCT 基數(shù)高、范圍寬；PDW-SD 下限相近、高限低；P-LCR基數(shù)高、高限相近。

血小板數(shù)量反映血小板衰亡與生成的動(dòng)態(tài)平衡；PCT 大小與血小板數(shù)量和體積有關(guān)，反映單位容積中血小板體積所占的百分比；MPV 可用于血小板減少原因的鑒別，反映骨髓造血功能和骨髓巨核細(xì)胞增生情況；PDW 反映血小板體積異質(zhì)性的參數(shù)[9-10]，當(dāng)血小板破壞和消耗增加時(shí)PDW 增加。有研究報(bào)道[11]血小板檢測(cè)參數(shù)在糖尿病血管并發(fā)癥中的應(yīng)用，涉及到血小板生理生化性質(zhì)，結(jié)構(gòu)形態(tài)等多方面改變，以毛細(xì)血管的基底膜增厚和微血栓形成為特點(diǎn)，表現(xiàn)為血小板形態(tài)、功能和活化狀態(tài)異常[12]，血小板黏附、聚集及釋放等，可導(dǎo)致血管內(nèi)凝血，動(dòng)脈粥樣硬化，與血栓形成等[13]，導(dǎo)致血小板數(shù)量及相關(guān)參數(shù)的改變。

參考相關(guān)要求[14]，對(duì)新建的生物參考區(qū)間進(jìn)行了驗(yàn)證：檢測(cè)25例，只有1例的PDW-SD 觀測(cè)值落在參考區(qū)間外，符合要求。

綜上所述，攀枝花地區(qū)血小板生物參考區(qū)間男女有差異，不同年齡組間個(gè)別指標(biāo)也存在差異；與有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)比較也不盡相同。因此有針對(duì)性的建立適合本地區(qū)人群血小板及其相關(guān)參數(shù)的生物參考區(qū)間很有必要，更能為臨床診療提供可信、精準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。