RNA甲基化修飾在乳腺癌中的研究進展

李 明，趙 遠，陳 麗，馬 萍，袁 超，袁紅軍，唐文如，盛苗苗

乳腺癌是全球范圍內最常見的惡性腫瘤之一[1]，占每年新發惡性腫瘤病例的10%以上[2]。雖然目前乳腺癌的治療方式多種多樣，但療效并不盡如人意，發病率已位居女性惡性腫瘤的第1 位，死亡率在女性惡性腫瘤中位居第2 位[3]。因此，有必要探索新的乳腺癌診斷方法以及鑒定新的治療靶點。

隨著高通量測序技術的發展，表觀遺傳修飾尤其是甲基化修飾的研究越來越受到重視。人類腫瘤中常見的甲基化修飾包括DNA 甲基化修飾、組蛋白甲基化修飾以及RNA 甲基化修飾等。DNA 甲基化修飾和組蛋白甲基化修飾的研究已較為深入和透徹，目前已有針對相應的甲基化修飾酶的藥物應用于臨床。近年來興起的RNA 甲基化研究正逐漸成為又一個研究熱點，并且在腫瘤研究方面取得了一系列成果。

本文介紹了6-甲基腺嘌呤（N6-methyladenosine，m6A）、5-甲基胞嘧啶（C5-methylcytidine，m5C）和1-甲基腺嘌呤（N1-methyladenosine，m1A）等RNA 甲基化修飾方式，并且對近年來RNA 甲基化修飾在乳腺癌中的相關研究進行綜述，以期為乳腺癌的發生和發展機制研究提供新的方向。

1 RNA 甲基化概述

甲基化是指從活性甲基化合物（如S-腺苷基甲硫氨酸）上將甲基（-CH3）催化轉移至其他化合物的過程，是蛋白質和核酸分子（DNA 和RNA）的重要修飾之一，具有調節基因表達、調控基因轉錄和DNA 修復等多種生物學功能，并且與包括腫瘤在內的多種疾病息息相關。最常見的甲基化類型是DNA 甲基化和組蛋白甲基化，但是近年來有關RNA 甲基化修飾的研究也常見于生命科學研究領域。RNA 甲基化是RNA 的一種重要的修飾方式，其主要作用于環外氮原子、嘌呤和嘧啶的某些特定氮和碳原子以及2’-OH部分的氧原子。迄今為止，已經發現多種RNA甲基化修飾方式，常見的有m6A、m5C 和m1A，此外還有7-甲基鳥嘌呤（N7-methylguanosine，m7G）以及2’-O 甲基化（2’-O-methylation，Nm）等目前研究較少的RNA 甲基化修飾方式。RNA 甲基化是一種動態可逆的修飾，其通過RNA 甲基化修飾相關酶和下游效應因子以調節RNA 甲基化水平，從而影響RNA 的加工和代謝，此后進一步影響細胞的增殖和遷移，調控生理或病理過程。

1.1 RNA 甲基化的m6A 修飾

m6A 是指腺嘌呤上第6 位氮原子（N6）上連接的1 個氫原子（-H）被甲基基團（-CH4）所取代的修飾方式，是真核細胞RNA 中豐度最高的轉錄后修飾，對許多RNA 尤其是mRNA 的各種代謝活動具有重要的調控作用，包括mRNA 的轉錄、衰變、變性和翻譯等，最終調節基因表達[4]。

RNA 甲基化的m6A 修飾是由甲基轉移酶（“writers”）、去甲基化酶（“Erasers”）和識別蛋白（“readers”）參與的動態可逆修飾過程。甲基轉移酶參與了將RNA 轉化為m6A 修飾的RNA 的過程。甲基轉移酶主要包括甲基轉移酶樣3（methyl-transferase-like 3，METTL3）、METTL14 和輔助因子人腎母細胞瘤1 相關蛋白（Wilms tumor 1 associated protein，WTAP）以及新發現的含鋅指CCHC 型蛋白4（zinc finger CCHC-type containing 4，ZCCHC4）[5]、RNA 結合基序蛋白15/15B（RNA binding motif protein 15/15B，RBM15/15B）和類病毒m6A 甲基轉移酶相關蛋白VIRMA（KIAA1429）等。去甲基化酶參與了將m6A 修飾的RNA 轉化為RNA 的還原過程。去甲基化酶主要包括脂肪量和肥胖相關蛋白（fat mass and obesity-associated protein，FTO）以及定位于細胞核中的AlkB 同源物5（AlkB homolog 5，ALKBH5）等。RNA發生甲基化修飾后，需要與特定的m6A 識別蛋白結合才能發揮生物學功能。m6A 識別的蛋白主要包括含YTH 結構域的家族蛋白1（YTH domain-containing family protein 1，YTHDF1）、YTHDF2 和YTHDF3 等YTH 結構域 家族蛋白以及胰島素樣生長因子結合蛋白1（insulinlike growth factor binding protein 1，IGFBP1）和胰島素樣生長因子2 結合蛋白（IGF2BP1、IGF2BP2 和IGF2BP3）[6]等。

m6A 修飾是現階段研究較為深入的RNA 甲基化修飾，其在疾病中的重要作用不斷被揭示。迄今為止，已發現RNA 的m6A 修飾參與腫瘤發生[7]、心血管疾病[8]、發育[9]、心力衰竭[10]、應激反應[11]、自噬[12]和衰老[13]等過程，尤其是在腫瘤領域，已開展了m6A 甲基化修飾與乳腺癌、淋巴瘤[14]、胃腸腫瘤[15]、胰腺癌[16]、肝癌[17]、白血病[18]和非小細胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）[19]的相關研究。

1.2 RNA 甲基化的m5C 修飾

m5C 是指胞嘧啶的第5 位碳原子（N5）發生甲基化，其修飾水平遠低于m6A，廣泛存在于mRNA、轉運RNA（transfer RNA，tRNA）、核糖 體RNA（ribosomal RNA，rRNA）、核內小RNA（small nuclear RNA，snRNA）、微小RNA（microRNA，miRNA）、長鏈非編碼RNA（long no-coding RNA，LncRNA）和增強子相關RNA（enhancer RNA，eRNA）中，其分布具有物種特異性和位置特異性。m5C 修飾主要發生在tRNA和rRNA 中，在mRNA 中也見相關報道。在tRNA 中，m5C 主要分布于可變臂和反密碼環中；在rRNA 中，m5C 則常出現在結合tRNA 發揮翻譯活性的區域；而在mRNA 中，m5C 修飾主要富集在非翻譯區、CG 富集區域以及argonaute 蛋白結合位點附近[20]。

與RNA 甲基化 的m6A 修飾一 樣，RNA 的m5C 修飾也是一個動態可逆的過程。催化RNA中m5C 修飾的RNA 甲基化酶主要包括NSUN（NOL/NOP2/Sun）家族蛋白、DNA 甲基轉移酶2（DNA methyltransferase 2，DNMT2）[21]以 及tRNA 天冬氨酸甲基轉移酶1（tRNA aspartic acid methyltransferase 1，TRDMT1）等。TET2（teneleven translocation 2，TET2）則是參與m5C 修飾的RNA轉化為RNA的還原過程的去甲基化酶，有研究表明TET3 也可能是RNA 的m5C 修飾去甲基化酶[22]。RNA 結合蛋白Aly/REF 輸出因子是目前唯一確定參與識別的識別蛋白。

當前RNA 甲基化的m5C 修飾研究尚處于起步階段。現有研究表明，RNA 的m5C 修飾廣泛存在于細胞中，在各種生理病理過程中均具有重要作用[23]。

1.3 RNA 甲基化的m1A 修飾

m1A 修飾是指在腺嘌呤第1 位氮原子（N1）上引入甲基的修飾方法。m1A 是真核生物tRNA和rRNA 豐度很高的一種轉錄后修飾，也可以調控mRNA 翻譯[24]。m1A 是生理條件下賦予核苷酸正電荷最常見的甲基化修飾方式之一，可以影響被修飾RNA 與相關蛋白的相互作用，同時可以通過破壞堿基互補配對，使tRNA 結構的穩定性提高，并且誘導其正確折疊，進而影響反轉錄和蛋白質的翻譯過程。與RNA 甲基化的m1A 修飾相關的甲基轉移酶包括tRNA 甲基轉移酶10C（tRNA methyltransferase 10C，TRMT10C）、TRMT6、TRMT61A 和TRMT61B 等，去甲基化酶包括ALKBH1 和ALKBH3；而m1A 甲基化結合蛋白尚未見報道。在細胞核中，通過tRNA m1A 甲基轉移酶復合物可以對特異性pre-mRNA進行m1A 修飾，是轉錄后水平調控基因表達的重要因子。由于m1A 是在mRNA 和tRNA 中新發現的修飾，因此有關RNA 甲基化的m1A 修飾的功能研究尚未見廣泛報道。

1.4 RNA 甲基化的其他修飾

目前較常見的RNA 甲基化修飾包括m6A、m5C 和m1A 等，但RNA 甲基化的修飾遠不止這些，例如同樣賦予堿基正電荷的m7G 修飾和修飾RNA 核糖的Nm 修飾。m7G RNA 甲基化是在甲基化轉移酶的作用下，使RNA 鳥嘌呤（G）的第7 位氮原子（N7）上加上甲基的一種修飾，廣泛存在于mRNA 5’帽子結構[25]、mRNA 內部、pri-miRNA、tRNA 和rRNA 中。m7G RNA 甲基化修飾能夠調節mRNA 轉錄、miRNA 生物合成和生物學功能、tRNA 穩定性以及18S rRNA 的核內加工及成熟，對于pre-mRNA 剪接、核輸出和翻譯等均至關重要[26]。

Nm 是指在RNA 甲基化酶或纖維蛋白酶的作用下，核糖RNA 在2N 位置上發生甲基化形成2’-O-甲基化核苷酸的修飾[27]，最常見于rRNA[28]、mRNA[29]、tRNA 和miRNA 等。Nm修飾的發現，揭示了核糖體生物學以及表觀轉錄組學領域的新前景，目前發現的甲基轉移酶為纖維蛋白原（fibrinogen，FIB）、FTSJ3（FtsJ RNA methyltransferase homolog 3）和識別蛋白TAR RNA 結合蛋 白（TAR RNA-binding protein，TRBP）[30]。已有研究表明，Nm 修飾可以影響mRNA 與蛋白的結合、調控rRNA 翻譯效率以及參與tRNA 識別等生物學過程。最近，有研究發現了一種N4-乙酰胞苷（ac4C），該修飾過程由N-乙酰轉移酶10（N-acetyltransferase 10，NAT10）催化產生，能夠增加轉錄本的穩定性和翻譯效率[31]。然而，這些新發現的RNA 修飾研究還處于初級階段，尚不清楚其參與的生物合成途徑及功能，具體機制仍有待探索。

2 甲基化與乳腺癌

2.1 m6A 與乳腺癌

基因表達異常是腫瘤的標志之一，而m6A 是在RNA 分子中發現的最常見的內部表觀遺傳修飾之一[32]。相較于正常組織，基因表達異常往往導致乳腺癌中m6A 相關酶表達量發生改變[33]，進而廣泛影響乳腺癌細胞的增殖、侵襲、轉移和耐藥等生物學過程，因此m6A 甲基化修飾可能是一種潛在的乳腺癌治療靶標。

2.1.1 m6A 與乳腺癌細胞增殖

腫瘤細胞的過度增殖與過度分裂、細胞周期紊亂以及細胞凋亡調控失常等有關。大量研究表明，m6A 修飾在腫瘤細胞的增殖調控中發揮重要作用。

m6A 甲基轉移酶通過甲基轉移酶復合物（METTL3/METTL14/WTAP）發揮作 用[34]，而METTL3 處于復合物的核心位置，是甲基轉移酶復合物中唯一的催化亞基[35]，其在包括肝癌、肺癌、宮頸癌和胰腺癌在內的多種惡性腫瘤中均表達異常，能夠通過調控下游RNA 甲基化水平，繼而調控惡性腫瘤的進展。WANG 等[36]發現，METTL3 表達水平上調可增加乳腺癌中mRNA甲基化水平，抑制乳腺癌細胞凋亡，從而促進乳腺癌細胞的生長；而敲除METTL3 后，則可以觀察到相反的現象。此外，METTL3 能夠通過調節p21 的表達水平來促進乳腺癌細胞的增殖。p21是一種重要的抑癌基因，其與包括乳腺癌在內的多種腫瘤的惡性轉化密切相關。乳腺癌治療的潛在候選藥物二甲雙胍可以通過降低miR-483-3p在乳腺癌中介導的METTL3 的表達水平來降低m6A 的修飾水平，通過miR-483-3p/METTL3/m6A/p21 通路抑制乳腺癌細胞的增殖[37]，在乳腺癌中高表達的METTL3 可以被乙型肝炎X-相互作用蛋白（hepatitis B X-interacting protein，HBXIP）調控，而HBXIP 通過靶向抑制miRNA let-7g 的表達水平而上調METTL3的表達水平；隨著METTL3 表達水平的上調則通過正反饋增加mRNA 中m6A 的修飾，從而提高HBXIP 的表達水平，形成HBXIP/let-7g/METTL3 的正反饋環，從而促進乳腺癌細胞的增殖[38]。有研究表明，同樣作為甲基化轉移酶的METTL14，其在乳腺癌中的表達水平也是顯著升高；在乳腺癌細胞及組織中，METTL14 能夠促進其目標基因（如C-X-C 基序趨化因子受體4和細胞色素P450 家族1 亞家族B 成員1）的表達和穩定性，從而促進乳腺癌細胞的增殖和集落形成，并且抑制乳腺癌細胞凋亡[39]。然而，也有研究發現METTL14 作為抑癌基因在乳腺癌的表達下調，METTL14 和ZC3H13（zinc finger CCCH-type containing 13）的低表達與患者的生存期呈負相關，其異常表達可能通過影響結腸腺瘤性息肉病基因mRNA 的m6A 修飾水平，激活Wnt 信號通路，進而促進乳腺癌的發展[40]。

去甲基化酶FTO 可以調節核mRNA 的加工過程，如選擇性剪切以及對mRNA 的3’端進行加工。NIU 等[41]發現，FTO 在乳腺癌中的表達水平上調，FTO 可介導Bcl-2/腺病毒E1B相互作用蛋白3（Bcl-2/adenovirus E1B 19kDa interacting protein 3，BNIP3）mRNA 3’-非 翻譯區（3’-untranslated region，3’-UTR）中的m6A 去甲基化并誘導其降解，進而降低其表達水平；而BNIP3 是一種促凋亡基因，在FTO 的作用下，BNIP3 表達水平降低，從而促進乳腺癌細胞增殖。有研究[42]指出，同樣作為去甲基化酶的ALKBH5 能夠通過HuR 依賴方式調節miR-107/ 大腫瘤抑制因子2（large tumor suppressor homolog 2，LATS2）軸以降低Yes-相關蛋白1（Yes-associated protein 1，YAP1）的活性，進而抑制體內NSCLC 細胞的生長和轉移。然而，ALKBH5 的功能并非NSCLC 所特有。ALKBH5與缺氧誘導因子（hypoxia inducible factor，HIF）之間存在一定的關聯。在乳腺癌的發展過程中，隨著乳腺癌細胞的不斷增殖，乳腺癌細胞與周圍間質血管之間的距離增加可導致腫瘤內部缺氧，而低氧環境可以誘導ALKBH5 的表達[43]；ALKBH5 能夠通過催化m6A 去甲基化來穩定多能性因子Nanog（nanog homebox）mRNA，進而促進其表達。Nanog是維持干細胞自我增殖和多能性的關鍵基因，其表達增加能夠促進乳腺癌干細胞（breast cancer stem cell，BCSC）的干性，并促進乳腺癌細胞轉移[44]。

KIAA1429 是一種RNA 結合蛋白，并且是m6A“識別蛋白”的組成部分，參與m6A 修飾、mRNA 剪接和加工等過程。QIAN 等[45]研究發現，KIAA1429 可以影響乳腺癌患者的生存期，高表達KIAA1429 乳腺癌患者的生存期明顯短于低表達KIAA1429 的乳腺癌患者。KIAA1429 也可以通過不依賴于M6A 修飾的方式促進細胞周期蛋白依賴性激酶1（cyclin-dependent kinase 1，CDK1）的表達，進而影響乳腺癌細胞的增殖和轉移。此外，IGF2BP1 作為m6A“識別蛋白”的組成部分，在乳腺癌的發展過程中同樣發揮著不可或缺的作用。有研究報道，LncRNA KB-1980E6.3 在乳腺癌組織中的表達水平異常上調，IGF2BP1 在LncRNA KB-1980E6.3 的作用下可形成LncRNA KB-1980E6.3/IGF2BP1/ 骨髓細胞瘤病毒癌基因（cellular-myelocytomatosis viral oncogene，c-Myc）信號軸，c-Myc 能夠調節乳腺癌細胞的增殖和遷移等生物學過程[46-47]，IGF2BP1 則通過此信號軸促進其與m6A 修飾的c-Myc 編碼區不穩定性決定簇（CRD）mRNA 的結合，維持c-Myc mRNA 的穩定性，從而維持BCSC 的干性。

2.1.2 m6A 與乳腺癌細胞的侵襲和轉移

惡性腫瘤轉移是導致患者死亡的主要原因。許多研究已表明，異常的m6A 修飾可能與乳腺癌細胞的侵襲和轉移有關。

m6A 位點在終止密碼子附近和3’-UTR 處富集。有研究發現，m6A 殘基與3’-UTR 處的miRNA 結合位點之間存在關聯[48]。乳腺癌中有許多異常表達的miRNA，如hsa-miR-146a-5p可以調控乳腺癌的發生和發展過程[49]。在乳腺癌中，過表達的METTL14 可以通過促進hasmiR-146a-5p 的表達，增強乳腺癌細胞的遷移和侵襲能力[50]。然而，也有研究表明，METTL3和METTL14 在乳腺癌中可能是抑癌基因。WU等[33]對基因數據庫（Oncomine）和腫瘤基因組圖 譜（The Cancer Genome Atlas，TCGA）數據庫中的乳腺癌組織數據進行了分析，發現包括METTL3 和METTL14 在內的所有m6A 甲基轉移酶在三陰性乳腺癌（triple negative breast cancer，TNBC）組織中的表達水平均被下調。在TNBC 組織中，METTL3 的表達水平低于正常組織，而METTL3 可以通過增加COL3A1 的m6A 修飾水平以抑制COL3A1 的表達，從而抑制乳腺癌轉移；低表達的METTL3 可削弱這一過程，從而增強TNBC 的轉移能力[51]，這一點在細胞實驗中也得到了證實[52]。

XU 等[53]觀察到，m6A 去甲基化酶FTO 在人表皮生長因子受體2（human epidermal growth factor receptor 2，HER2）陽性乳腺癌中高表達。miR-181b-3p 直接與ARL5B mRNA 的3’-UTR結合而抑制ARL5B 的表達，而乳腺癌細胞中高表達的FTO 通過抑制miR-181b-3p 以上調ARL5B 的表達，加速乳腺癌細胞的遷移和侵襲；體內和體外實驗結果均顯示，下調FTO 的表達能夠明顯抑制乳腺癌細胞的增殖和轉移。此外，FTO 也可以通過BNIP3 mRNA 去甲基化修飾以抑制其表達，從而促進乳腺癌細胞的轉移[41]。

腦轉移是惡性腫瘤患者死亡的主要原因之一。在乳腺癌中，YTHDF3 可以通過提升與腦轉移相關的蛋白的表達，并且與腦微環境進行相互作用，從而促進乳腺癌腦轉移。此外，YTHDF3可以通過與自身5’-UTR 中的m6A 殘基結合而調節YTHDF3 mRNA 翻譯以促進其自身蛋白的表達，進而促進乳腺癌腦轉移[54]。此外，ANITA等[52]利用TCGA 數據庫進行研究，結果發現乳腺癌組織中KIAA1429、YTHDF1 和YTHDF3的表達水平均明顯上調，并且表達水平與淋巴結轉移密切相關。

2.1.3 m6A 與乳腺癌耐藥

耐藥是導致惡性腫瘤患者治療失敗的重要原因之一。有研究選取雌激素和孕激素受體均為陽性的乳腺癌MCF-7 細胞及其對多柔比星（adriamycin，ADR）耐藥的細胞株MCF-7/ADR 進行研究，結果發現WTAP 在MCF-7/ADR 細胞中高表達，因而推測WTAP 可能參與乳腺癌MCF-7 細胞的耐藥過程[55]。多藥耐藥基因1（multi-drug resistance gene 1，MDR1）和乳腺癌耐藥蛋白（breast cancer resistance protein，BCRP）已被認為在介導乳腺癌患者的耐藥性中具有重要意義[56]。Che-1 又被稱拮抗凋亡轉錄因子（apoptosis-antagonizing transcription factor，AATF），是基因轉錄、細胞增殖潛力[57]和抗癌藥物抗性的調節劑[58]，而同源結構域相互作用蛋白激 酶2（homeodomain-interacting protein kinases 2，HIPK2）可以通過磷酸化Che-1 而促進其降解。PAN 等[59]發現，METTL3 可以通過調控METTL3/miR-221-3p/HIPK2/Che-1 軸以影響MCF-7/ADR 細胞對ADR 的半數抑制濃度（half maximal inhibitory concentration，IC50），高表達的METTL3 能夠促進MDR1 和BCRP 的表達，從而上調其直接靶標Che-1 的表達，增強MCF-7/ADR 細胞的耐藥性，該結果也同時通過體內移植瘤實驗得到了驗證。此外，LIU 等[60]發現，長期接觸他莫昔芬會誘導METT3 表達增加以及隨之而來的AK4 mRNA 5’-UTR 中m6A修飾水平的升高，從而促進其翻譯，而更高水平的AK4 則抑制線粒體凋亡并促進活性氧（reactive oxygen species，ROS）的產生，進而激活p38，最終導致MCF-7 細胞對他莫昔芬的耐藥性增強。METTL3 水平升高及其在他莫昔芬耐藥中的作用在卵巢癌[61]和胰腺癌[62]等的相關研究中已有所報道，但在乳腺癌中的作用仍需進一步研究，以解決乳腺癌耐藥的問題。

2.2 其他甲基化與乳腺癌

MARCEL 等[63]發現，Nm 修飾的甲基轉移酶FBL 的過度表達可上調rRNA 的甲基化水平，引起核糖體生物合成過程的過度激活，導致翻譯過程異常，最終促進腫瘤的發生。此外，該研究也證實這一過程與乳腺癌患者的低生存率有關，但這一過程可以被抑癌因子p53 所抑制。集落刺激因子1（colony-stimulating factor-1，CSF-1）循環水平可用于疾病檢測以及治療反應的監測，其可能與預后不良有關[64]。有研究發現，在乳腺癌患者中，脫甲基酶ALKBH3 的表達變化能夠調節CSF-1 的表達量。CSF-1 mRNA 中的m1A修飾定位在翻譯起始位點附近的5’-UTR 中，ALKBH3 通過對CSF-1 mRNA 進行去甲基化修飾可延長其半衰期，進而調節CSF-1 mRNA 的穩定性，而ALKBH3 過表達可提高CSF-1 的表達水平以及腫瘤細胞的侵襲能力[65]。有研究發現，m5C RNA 甲基化的調控因子可以預測TNBC 患者的臨床預后風險，有可能成為TNBC 的新型預后標志物。HUANG 等[66]利用TCGA 數據庫進行分析，發現NSUN2、NSUN5 和NSUN6 等甲基轉移酶以及去甲基化酶TET2 在TNBC 中均表達異常，同時發現NSUN2 和NSUN6 均可能與預后相關，并且影響腫瘤微環境，進而影響TNBC 的發展。此外，LI 等[67]研究發現NSUN2催化的m5C 修飾與METTL3/METTL14 催化的m6A 修飾能夠協同上調p21 的表達，這2 個甲基化修飾之間的相互作用促進了氧化應激誘導的衰老細胞中p21 的表達，而p21 在乳腺癌中發揮抑制腫瘤進展的作用[68]，由此揭示甲基化修飾可能在機體中并非單獨作用，而可能是由多種修飾共同協同或拮抗參與了機體的調控過程，從而為RNA 甲基化研究提供了新的思路。

m1A 和m5C 等其他甲基化修飾方式在乳腺癌中的研究目前還較少，但是在乳腺癌的發生和發展過程中同樣發揮著重要作用，未來也可能成為乳腺癌治療和預后研究的重要方向之一。

3 結語與展望

RNA 甲基化修飾與乳腺癌的研究是一個新興的研究方向，目前主要關注于各種甲基化修飾相關酶的異常表達或相互作用。已有許多研究表明甲基化修飾相關酶的異常表達或相互作用可促進乳腺癌細胞的增殖和轉移等過程，而靶向這些甲基化修飾相關酶可能是抑制乳腺癌細胞增殖或轉移的新干預方式，可能有助于延長乳腺癌患者的生存時間。此外，也有研究認為甲基化修飾酶可以作為新的腫瘤標志物和潛在靶點[69]。有研究表明，乳腺癌患者中m6A 調節因子的表達模式與乳腺癌的臨床病理特征、生存結局和免疫調節基因的表達均顯著相關[70]，而乳腺癌患者外周血中RNA 的M6A 修飾水平顯著高于正常對照組，因此有望成為診斷乳腺癌的腫瘤標志物[71]。

RNA 甲基化通過表觀遺傳修飾，能夠動態可逆地調控乳腺癌細胞的增殖、侵襲、轉移和耐藥等過程，以此為靶點可能為乳腺癌的治療研究提供新的方向。然而，由于RNA 甲基化研究尚處于新興階段，對于乳腺癌中RNA 甲基化的生物學功能的認識尚處于初始階段。今后將繼續探究這些新的生物功能和新修飾方式的調節過程，并且與乳腺癌的病理生理過程相聯系，從而進一步闡明RNA 甲基化修飾在乳腺癌發病機制中的潛在作用，以期在不久的將來能夠研發出RNA 甲基化修飾酶的靶向藥物。