血清HIF-1α、DcR3、TSGF 在宮頸癌診斷中的作用及其與患者臨床病理參數的關系

侯麗娟，王文文，翟建軍，孫燕

首都醫科大學附屬北京同仁醫院，北京100176

宮頸癌是臨床常見女性惡性腫瘤，由于其病變位置不易觀察，易被患者忽略，多數患者就診時已進展至中晚期，失去最佳治療時機［1］。目前，腫瘤標志物是篩查宮頸癌及評估病情嚴重程度的重要輔助指標，逐漸成為宮頸癌早期診斷的主要途徑之一。缺氧誘導因子1α（HIF-1α）是缺氧細胞應答的關鍵調節因子，具有促進細胞增殖、抑制細胞凋亡作用［2］。誘騙受體3（DcR3）屬于腫瘤壞死因子受體超家族的新成員，能協助腫瘤細胞實現免疫逃避，參與腫瘤疾病的發生、進展［3］。惡性腫瘤特異生長因子（TSGF）是一種廣譜腫瘤標志物，在肺癌、結直腸癌等多種惡性腫瘤疾病診斷中具有較高的靈敏度［4］。但目前鮮有三者聯合檢測在宮頸癌篩查中的報道。本研究觀察了宮頸癌患者血清 HIF-1α、DcR3、TSGF 水平變化，并探討其在宮頸癌診斷及疾病進展中的作用。現報告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取 2018 年 1 月～2019 年 8 月于我院體檢的女性2 250例，根據體檢及病理診斷結果分為健康組1 342 例、宮頸良性病變組836 例、宮頸癌組72 例。排除標準：①既往有宮頸癌病史；②合并其他部位惡性腫瘤；③合并血液系統疾病；④1 個月內服用抗腫瘤相關藥物。健康組年齡32～65（42.11 ± 4.20）歲，宮頸良性病變組為 33～64（41.80 ± 3.87）歲，宮頸癌組為 31～66（42.46 ±5.02）歲。三組年齡具有可比性。本研究通過醫院倫理委員會審核，參與者均簽署知情同意書。

1.2 血清HIF-1α、DcR3、TSGF水平檢測方法 采用ELISA 法。采集三組清晨空腹靜脈血4 mL，2 500 r/min 離心 15 min，離心半徑為 15 cm，取上清液，-70 ℃保存待檢。采用ELISA 法檢測血清HIF-1α、DcR3、TSGF水平，試劑盒及酶標儀購自美國Ab?cam公司，所有操作步驟嚴格參照試劑盒說明書。

1.3 相關資料采集與分析方法 收集宮頸癌患者的臨床資料，包括年齡、腫瘤直徑、FIGO 分期［5］、淋巴結轉移、組織學分化程度、宮頸浸潤深度，比較不同臨床病理參數的宮頸癌患者血清HIF-1α、DcR3、TSGF 水平。采用SPSS22.0 統計軟件進行數據處理。計量資料以-x±s表示，多組間比較采用單因素方差分析，兩組間比較采用t檢驗。繪制血清HIF-1α、DcR3、TSGF 單獨及聯合診斷宮頸癌的受試者工作特征（ROC）曲線，比較曲線下面積（AUC）、靈敏度、特異度等。P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 三組血清HIF-1α、DcR3、TSGF 水平比較 宮頸癌組血清HIF-1α、DcR3、TSGF 水平均高于宮頸良性病變組、健康組（P均＜0.05）。見表1。

表1 三組血清HIF-1α、DcR3、TSGF水平比較（-x± s）

2.2 血清HIF-1α、DcR3、TSGF 單獨及聯合診斷宮 頸癌的價值比較 見表2。

表2 血清HIF-1α、DcR3、TSGF單獨及聯合診斷宮頸癌的價值比較

2.3 不同臨床病理參數的宮頸癌患者血清HIF-1α、DcR3、TSGF 水平比較 FIGO 分期Ⅲ～Ⅳ期、淋巴結轉移、組織學低分化、宮頸浸潤深度≥2/3 的宮頸癌患者血清HIF-1α、DcR3、TSGF水平均高于FIGO分期Ⅰ～Ⅱ期、無淋巴結轉移、組織學中高分化、宮頸浸潤深度＜2/3者（P均＜0.05）。不同年齡、腫瘤直徑患者血清HIF-1α、DcR3、TSGF 比較差異均無統計學意義（P均＞0.05）。見表3。

表3 不同臨床病理參數的宮頸癌患者血清HIF-1α、DcR3、TSGF水平比較（±s）

表3 不同臨床病理參數的宮頸癌患者血清HIF-1α、DcR3、TSGF水平比較（±s）

臨床病理參數年齡（歲）≥50＜50 FIGO分期Ⅲ～Ⅳ期Ⅰ～Ⅱ期淋巴結轉移有 無組織學分化程度低分化中高分化腫瘤直徑（cm）≥4＜4宮頸浸潤深度≥2/3＜2/3 n 41 31 33 39 30 42 28 44 27 45 25 47 HIF-1α（pg/mL）209.25±39.46 213.48±42.01 240.29±46.17 186.35±35.04 244.18±44.09 187.42±33.16 250.06±50.11 186.26±37.25 212.08±38.42 210.46±40.09 253.64±52.14 188.43±41.07 P 0.663＜0.01＜0.01＜0.01 0.867＜0.01 DcR3（pg/mL）617.14±126.20 612.24±130.19 691.25±130.34 560.59± 90.05 680.37±121.08 568.36± 92.23 683.21±125.30 571.64± 96.79 618.16±117.28 613.15±120.03 687.15±128.19 576.67±102.34 P 0.873＜0.01＜0.01＜0.01 0.863＜0.01 TSGF（U/mL）85.22±14.09 82.64±15.11 100.27±22.23 70.44±10.15 105.18±24.46 69.06±12.20 103.31±21.79 71.89±15.48 85.12±14.27 83.50±16.02 104.25±20.91 73.40±12.33 P 0.458＜0.01＜0.01＜0.01 0.667＜0.01

3 討論

宮頸癌是造成女性死亡的主要惡性腫瘤疾病，其病死率僅次于乳腺癌，患者的5 年生存率與臨床分期顯著相關，故及早確診、及時采取治療措施對延長生存期、提高生存率具有重要意義［6］。腫瘤標志物主要是指預示腫瘤發生的一類物質，可存在于體液、血液、組織、細胞內，多被應用于腫瘤疾病的篩查、診斷［7-8］。因此，積極探索客觀、可靠的腫瘤標志物，對于及早發現、明確診斷宮頸癌至關重要。

研究證實，缺氧是腫瘤發生與進展的共同機制，不僅能改變基因組穩定性、抑制細胞凋亡、加快細胞增殖，也是降低腫瘤放化療敏感性的主要原因［9-10］。HIF-1α 是一種重要的缺氧誘導因子，可結合缺氧應答靶基因，促進葡萄糖轉運、血管生成、細胞增殖、組織轉移等多種細胞生命活動［11］。劉家利等［12］報道顯示，HIF-1α 在子宮內膜癌組織中的陽性表達率升高，說明其參與了子宮內膜癌的發生過程。本研究結果顯示，宮頸癌組血清HIF-1α 水平高于宮頸良性病變組、健康組，與上述研究結果相符。推測原因，HIF-1α 過表達可通過誘導局部缺氧環境，加重局部組織氧化應激反應及炎癥反應，從而提高宮頸上皮細胞病變風險，最終引發宮頸癌［13］。本研究還表明，FIGO 分期Ⅲ～Ⅳ期、淋巴結轉移、組織學低分化、宮頸浸潤深度≥2/3 的宮頸癌患者血清HIF-1α 水平升高，提示HIF-1α 與宮頸癌病情密切相關，可能與其能提高腫瘤細胞活性、增強腫瘤細胞DNA 擴增速度及侵襲能力有關。

DcR3 是一種分泌型蛋白，可特異性結合LIGHT、TLIA、FasL 等配體，并對其介導的細胞凋亡產生負調控作用，達到抑制腫瘤細胞凋亡的目的［14］。研究顯示，DcR3在肝癌、胰腺癌中呈高表達，提示其參與了多種惡性腫瘤的發生［15-16］。JIANG等［17］對12 篇DcR3 與女性生殖系統腫瘤的相關研究進行Meta 分析，結果發現DcR3 在1 127 例女性生殖道腫瘤患者癌組織中高表達，是女性生殖道腫瘤的高危因素。本研究結果顯示，宮頸癌患者血清DcR3 水平較高，且ROC 曲線顯示其單獨診斷宮頸癌的 AUC 高達 0.812，高于 HIF-1α 和 TSGF，可見DcR3 水平檢測對宮頸癌具有較高的診斷價值。DcR3 能通過負調控腫瘤細胞凋亡，提高腫瘤細胞的存活率，還能促進腫瘤細胞免疫逃避，從而加速宮頸癌發生。劉芳等［18］認為，血清DcR3 與腫瘤遠處轉移相關。本研究發現，血清DcR3與宮頸癌FIGO分期、淋巴結轉移、宮頸浸潤深度、組織學分化程度等多種臨床病理參數均密切相關，說明DcR3 可從多方面加快宮頸癌病情進展，可作為判斷病情程度的有效指標。

TSGF 屬于多肽類物質，是一種新型腫瘤標志物，由腫瘤血管生成、分泌［19］。研究顯示，TSGF是與其他腫瘤標志物不相關的獨立物質，可于其他腫瘤標志物未發生改變的癌變早期即呈現出異常表達狀態［20］。本研究結果顯示，與健康者、宮頸良性病變者相比，宮頸癌患者血清TSGF水平明顯升高，且當其＞65.51 U/mL 時診斷宮頸癌的靈敏度為69.44%、特異度為80.85%，說明TSGF 可作為診斷宮頸癌的一項血清學指標。分析原因，TSGF具有促進惡性腫瘤血管增生，加速腫瘤病變形成等作用，從而促使其血清水平在惡性腫瘤早期明顯升高［21］。但本研究結果顯示，血清TSGF 與宮頸癌的FIGO 分期、淋巴結轉移、宮頸浸潤深度、組織學分化程度有關，但與腫瘤直徑無明顯相關性。與余曉輝等［22］研究結果不一致，可能是由于選取研究對象差異性、血清檢測方法不同等因素造成。同時本研究結果顯示，血清HIF-1α、DcR3、TSGF 聯 合 診 斷 宮 頸 癌 的 靈 敏 度 為75.00%、特異度為86.74%，明顯優于三者單獨診斷，提示三組聯合檢測可為宮頸癌的診斷提供更可靠依據。但本研究選取樣本量較少，可能造成數據偏移，需作進一步分析與探討。

綜上可知，宮頸癌患者血清HIF-1α、DcR3、TSGF水平均升高，三者聯合檢測在宮頸癌的診斷中具有可靠價值，且三者與FIGO分期、淋巴結轉移、組織學分化程度、宮頸浸潤深度均密切相關，有助于為臨床評估病情提供參考依據。