胰腺導管腺癌組織中人表皮生長因子受體2的表達及臨床意義

崔自強 竇劍 高慶軍 趙鑫 高峰 姜翀弋 曹經(jīng)琳 王巍

1河北醫(yī)科大學第三醫(yī)院肝膽外科，石家莊 050051；2河北醫(yī)科大學第三醫(yī)院病理科，石家莊 050051；3復旦大學附屬華東醫(yī)院普外科，上海 200040；4復旦大學附屬腫瘤醫(yī)院胰腺外科，上海 200032

胰腺癌惡性程度高，預后極差，且發(fā)病率和死亡率均呈上升趨勢。人表皮生長因子受體2(human epidermal growth factor receptor 2，HER2)為表皮生長因子受體家族的二號成員，是具有酪氨酸蛋白激酶活性的跨膜蛋白[1]。HER2是細胞生長、分化及存活的重要調(diào)節(jié)基因。有研究證明，HER2在乳腺癌等多種實體腫瘤中過表達，導致惡性腫瘤發(fā)生，且預示患者預后差[2]。但HER2在胰腺癌中的表達及其與患者預后的關系尚不明確。本研究檢測PDAC患者腫瘤組織HER2的表達，探討HER2的表達與胰腺癌發(fā)展及預后的關系。

材料與方法

一、胰腺組織標本

收集2001年1月至2012年12月間上海復旦大學附屬華東醫(yī)院病理科存檔的PDAC組織石蠟標本109例，其中男性67例，女性42例，年齡35～82(61.7±10.1)歲，中位年齡63歲。納入標準：(1)行胰腺癌根治性手術；(2)病理診斷為PDAC；(3)患者術前未行放化療；(4)腫瘤無遠處轉(zhuǎn)移；(5)癌腫未侵犯腹腔干或腸系膜上動脈；(6)無圍手術期死亡。另收集上海復旦大學附屬華東醫(yī)院病理科存檔的正常胰腺組織石蠟標本27例作為對照組。

患者出院后通過門診復查及電話隨訪了解其病情發(fā)展，94例獲得預后結(jié)局，隨訪截止日為2020年12月。患者的生存期定義為入組時間至死亡時間或隨訪終止時間。

二、胰腺癌組織HER2蛋白表達檢測

所有標本常規(guī)切片，厚度為4 μm，采用免疫組織化學Envision二步染色法檢測胰腺組織HER2蛋白表達，步驟嚴格按試劑盒說明書進行。兔抗人HER2抗體、GT1009系列抗體稀釋液和GTVisionⅢ抗鼠/兔通用型檢測試劑盒均購自DAKO公司。由兩名病理科醫(yī)師獨立閱片，參考Hercep Test評分判定標準[3]，根據(jù)細胞膜染色程度和陽性細胞占比進行評定。細胞膜染色陽性細胞占比<10%為陰性(-)；細胞膜呈淡黃色，占比≥10%為弱陽性(+)；細胞膜呈黃色，占比≥10%為陽性(++)；細胞膜呈棕黃色，占比≥10%為強陽性(+++)。陽性和強陽性定義為過表達。

三、統(tǒng)計學處理

結(jié) 果

一、PDAC組織與正常胰腺組織HER2蛋白表達

109例PDAC組織中32例(29.4%)HER2蛋白表達為-，39例(35.8%)+，28例(25.7%)++，10例(9.2%)+++，過表達率為34.9%(圖1)。27例正常胰腺組織中，HER2蛋白表達為-或+，無過表達者。PDAC組織HER2過表達率顯著高于正常胰腺組織，差異有統(tǒng)計學意義(χ2=13.063，P=0.000)。

注：PDAC為胰腺導管腺癌；HER2為人表皮生長因子受體2圖1 PDAC組織HER2蛋白陰性(1A)、弱陽性(1B)、陽性(1C)、強陽性(1D)表達(免疫組織化學 ×100)

二、HER2蛋白表達與PDAC臨床病理特征的相關性

HER2蛋白過表達與患者年齡顯著相關，≥65歲的PDAC患者顯著多于<65歲患者，而與患者性別、腫瘤部位、分化程度、T分期、N分期、神經(jīng)侵犯和切緣陽性均無關(P值均>0.05，表1)。

三、HER2表達與PDAC患者術后生存期的相關性

單因素Cox比例風險分析顯示，手術切除標本切緣陽性及HER2表達與PDAC患者術后生存期相關，而與患者性別、年齡及腫瘤部位、分化程度、T分期、N分期、神經(jīng)侵犯等均無關(表2)；多因素Cox比例風險分析顯示，手術切除標本切緣陽性、HER2表達是影響PDAC患者生存期的預后因素(表3)。Kaplan-Meier法生存分析顯示，HER2表達+++患者的術后中位生存期為128.43個月，HER2表達-、+、++的患者術后中位生存期為21.53個月，HER2表達+++組患者的生存期明顯長于HER2表達-～++組，差異有統(tǒng)計學意義(P=0.038，圖2)。

表1 HER2蛋白表達水平與胰腺導管腺癌患者臨床病理特征的關系[例(%)]

表2 94例胰腺導管腺癌患者術后生存期的單因素分析

表3 94例胰腺導管腺癌患者術后生存期的多因素分析

注：PDAC為胰腺導管腺癌；HER2為人表皮生長因子受體2圖2 PDAC患者HER2不同表達水平的術后生存曲線

討 論

HER2基因最早由Shih等[4]提出，定位于人17號染色體長臂上，分子質(zhì)量約為185 000，是具有酪氨酸蛋白激酶活性的跨膜蛋白[1]。在特定條件下，過度表達的HER2可形成二聚體并發(fā)生自身磷酸化，進而激活Ras蛋白，通過TPK-Ras-MAPK途徑，導致基因轉(zhuǎn)錄或關閉，最終調(diào)節(jié)細胞生長、增殖和分化[2]。因此，HER2在很多實體腫瘤的發(fā)生和發(fā)展過程中扮演著重要的角色。曲妥珠單抗通過抑制乳腺癌中HER2二聚體的形成，從而發(fā)揮抑制腫瘤生長的作用[5]。HER2的規(guī)范化檢測為乳腺癌的治療帶來了革命性的改變。鑒于胰腺癌的高度惡性和有限的臨床干預，且有關胰腺導管腺癌HER2表達及其與預后關系的國內(nèi)外臨床研究較少，本研究檢測HER2蛋白在接受根治性切除術的PDAC患者標本中表達情況，并分析HER2表達與患者預后的關系。

本研究發(fā)現(xiàn)，109例PDAC的HER2蛋白過表達率為34.9%，而在27例正常胰腺組織中過表達率為0。PDAC組織中HER2過表達率顯著高于正常胰腺組織，提示HER2表達在PDAC的發(fā)展過程中可能起重要作用，HER2可作為胰腺正常組織和PDAC組織鑒別的標志物。

本研究結(jié)果顯示，HER2表達與年齡相關，其中≥65歲的PDAC患者HER2過表達率顯著高于<65歲患者(P=0.043)，此一發(fā)現(xiàn)為首次報道。Komoto等[6]對129例無遠處轉(zhuǎn)移、無腹腔播散的PDAC根治性切除腫瘤標本進行研究，認為HER2表達與T分期相關，但本研究的T分期與HER2表達未見明顯相關性。

國內(nèi)外關于胰腺癌HER2表達與患者預后關系的研究較少，且兩者的關系存有爭議。Lei等[3]研究顯示，HER2蛋白過表達者占47.6%，HER2蛋白過表達胰腺癌患者生存期僅為(7.3±3.8)個月，而HER2蛋白不表達和正常表達患者生存期長達(19.1±11.7)個月，兩組差異有統(tǒng)計學意義，胰腺癌患者HER2蛋白過表達提示預后差。Koka等[7]對308例胰腺癌患者研究發(fā)現(xiàn)，僅48例HER2過表達，約占16%，HER2過表達者生存期為11個月，不過表達者生存期為7個月，結(jié)果與上述研究相反。Ata等[8]檢測30例胰腺癌組織HER2表達，并分析其與預后的關系，認為HER2過表達對胰腺癌患者預后無預測價值。本研究單因素生存分析顯示，HER2表達+ ++者術后中位生存時間為128.43個月，HER2表達為-、+、+ +患者術后中位生存時間為21.53個月，PDAC組織HER2表達+ ++患者術后生存時間明顯長于HER2表達-～+ +患者(P=0.038)。多因素COX比例風險分析也顯示HER2表達+ ++的PDAC患者術后生存時間較HER2表達-～+ +患者顯著延長，HER2表達是影響PDAC預后的獨立因素，提示HER2可考慮作為評價PDAC生物學行為及評估預后的指標。

利益沖突所有作者均聲明不存在利益沖突