空腹條件下卡托普利片生物等效性研究

聶昌盛 趙 翔 崔 靖 陳仁燕

1.仁和堂藥業有限公司，山東臨沂 276600；2.翔宇藥業股份有限公司，山東臨沂 276023

高血壓為臨床上常見的慢性疾病，多選用藥物進行血壓控制，卡托普利吸收迅速，吸收率在75%以上，大部分經腎臟排泄，其中約50%以原形排出[1]，剩余為代謝物，血液透析時可將其清除，在體內很少蓄積，廣泛用于治療高血壓。卡托普利是一種人工合成的非肽類血管緊張素轉化酶抑制劑（ACEI），主要作用于腎素-血管緊張素-醛固酮系統（RAA 系統）[2-4]，具有良好的抗高血壓作用。對于各種原發性高血壓，具有起效快、遠期療效好等優點[5-6]，也常用于心力衰竭[7-8]和腎病[9]、糖尿病[10]的治療。本研究主要評價卡托普利片受試制劑與參比制劑在健康受試者體內是否具有生物等效性，旨在為臨床用藥提供依據，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

2019年9～11月納入24名中國成年健康受試者于鄭州市中心醫院進行卡托普利片受試制劑和參比制劑的生物等效性研究，按照隨機數字表法將其分為R-T 組和T-R 組，每組12名。R-T 組中，男8例，女4例；年齡19～41歲，平均（31.0±8.020）歲；體重指數（BMI）19.7～25.6 kg/m2，平均（23.11±1.644）kg/m2。T-R組中，男8例，女4例；年齡18～46歲，平均（34.3±8.150）歲；BMI 19.3～25.8 kg/m2，平均（23.68±1.676）kg/m2。兩組受試者的一般資料比較，差異無統計學意義（P>0.05），具有可比性。本研究經鄭州市中心醫院藥物臨床試驗倫理委員會審核及同意，所有受試者均知曉本研究情況并簽署知情同意書。

納入標準：①受試者年齡18周歲以上；②受試者中的男性體重應不低于50 kg，女性體重應不低于45 kg，BMI 在19～26 kg/m2范圍；③受試者自篩選之日起至試驗結束后6個月內無生育、捐精或捐卵計劃，自愿采取有效的非藥物避孕措施。排除標準：①既往或目前患有運動系統、神經系統、內分泌系統等慢性疾病或嚴重疾病，研究醫生認為不適宜參加者；②受試者篩選前3個月內接受過手術，特別是接受過會影響藥物吸收、分布、代謝、排泄的手術，或者計劃在試驗期間進行手術者；③受試者篩選前4 周內服用過任何處方藥，或在篩選前2 周內服用過任何非處方藥、維生素產品或中草藥；④有過敏性疾患史或過敏體質者；⑤已知對卡托普利或其輔料中任何成份過敏者。

1.2 試驗設計內容

研究采用空腹給藥、隨機、單劑量、兩制劑、兩周期、交叉試驗設計，按照交叉給藥方案。第一周期：T-R 組口服單劑量卡托普利片受試制劑（仁和堂藥業有限公司，生產批號20190501），R-T 組口服單劑量卡托普利片參比制劑（Bristol-Myers Squibb S.r.l.，生產批號：AAP9604）。間隔5 d 清洗期后，第二周期：T-R 組口服單劑量卡托普利片參比制劑，R-T 組口服單劑量卡托普利片受試制劑。

受試者于每周期試驗前1 d 入住Ⅰ期臨床試驗病房，受試者在試驗前需禁食至少10 h。每周期服藥當天，統一以溫水240 mL 送服1片卡托普利片，服藥前后1 h 內不得額外飲水。兩個周期受試者在相同的預定時間點進食相同的標準餐，不攝取除此以外的飲食。

每名受試者分別于每周期服藥前1 h 內（即服藥后0 h）及服藥后10、20 min、0.5、0.75、1.0、1.25、1.5、1.75、2、2.5、3、4、5、6、8、12、24 h 從前臂靜脈采集血樣，總計18個采血點，每次采血4 mL 至EDTA-K2 真空采血管，輕柔顛倒混勻，開始預處理，儲存于-60℃及以下冰箱中，作為1份樣本，以供藥代動力學分析。本研究的每名受試者周期間隔5 d 清洗期后，體內藥物均已經代謝完畢，第一周期藥物不影響第二周期藥物測定采集結果。本研究中，進行血樣測定的受試制劑和參比制劑的樣本數分別為24份。每名受試者血漿中卡托普利的濃度采用高效液相色譜-串聯質譜（HPLC-MS/MS，包括LC-20AD型高效液相色譜、TURBO V型電噴霧離子源、API 4000型檢測器）[11-12]進行測定。

1.3 統計學方法

采用SAS 9.4 軟件分析數據，對血藥濃度進行非房室模型藥代動力學參數的估算分析，計算主要藥代動力學參數。采用置信區間法對卡托普利進行生物等效性判斷，將主要藥代動力學參數（Cmax、AUC0-t和AUC0-∞）對數轉換后進行進行雙單側t 檢驗，同時計算Cmax、AUC0-t和AUC0-∞的個體內變異系數和把握度，計算兩種制劑的主要藥代動力學參數的幾何均值比的90%CI 并進行等效性比較，Cmax、AUC0-t和AUC0-∞等效區間界值設定為80.00%～125.00%[13-14]。符合正態分布計量資料的均數用均數±標準差（）表示，不符合正態分布的改用中位數和四分位數間距[M（P25，P75）]表示。

2 結果

2.1 試驗入組和完成情況

該研究入組受試者24例，完成24例。

2.2 受試者空腹服用卡托普利片后的血藥濃度-時間曲線

受試者單劑量口服卡托普利片受試制劑和參比制劑25 mg后，血漿中卡托普利的平均濃度-時間曲線半對數圖，見圖1（封四）。

2.3 空腹狀態下卡托普利片受試制劑與參比制劑的藥代動力學參數

空腹狀態下，卡托普利片受試制劑與參比制劑的藥代動力學參數見表1，結果顯示，卡托普利片受試制劑與參比制劑的體內過程一致。

表1 空腹狀態下卡托普利片受試制劑與參比制劑的藥代動力學參數

2.4 空腹狀態下卡托普利片受試制劑與參比制劑的生物等效性評價

受試者在空腹狀態下口服卡托普利片受試制劑與參比制劑后，血漿中卡托普利的主要藥動學參數Cmax、AUC0-t和AUC0-∞的幾何均數比值90%CI 見表2，結果顯示，卡托普利的主要藥動學參數Cmax個體內變異＜30%，不屬于高變異藥物。卡托普利在空腹狀態下的幾何均數比值90%CI 均落在80.00%～125.00%范圍，說明卡托普利片受試制劑和參比制劑具有生物等效性。

表2 生物等效性評價結果

3 討論

1981年卡托普利片最先由百時美施貴寶公司開發上市，適用于治療各種類型高血壓。因其良好的降壓效果及不良反應少、用藥安全性高等特點各企業爭相仿制，一致性評價成為研究工作的重點，由于胃中食物可降低卡托普利的吸收，結合《以藥動學參數為終點評價指標的化學藥物仿制藥人體生物等效性研究技術指導原則》[15]，因此本研究僅進行空腹狀態下的生物等效性研究。

對卡托普利主要藥代動力學參數Cmax、AUC0-t及AUC0-∞的對數值進行方差分析，以序列、周期和制劑作為固定效應，以個體（序列）作為隨機效應，Cmax、AUC0-t、AUC0-∞的序列、周期和制劑無差異；Cmax、AUC0-t、AUC0-∞的個體（序列）有差異，兩制劑在不同受試者體內的吸收代謝存在一定的差異，此種差異對生物等效性評價結果無影響。卡托普利半衰期短于3 h，口服后15 min 起效，1～1.5 h 達血藥峰濃度，能持續6～12 h，所以在服藥后每個試驗周期設置18個采血點，包含吸收、分布、消除相，采樣時間不短于3個末端消除半衰期，滿足生物樣品檢測分析需求。由于卡托普利在血漿中不穩定，本實驗研究中建立了快速、準確、方便可行的人血漿中卡托普利濃度測定法——HPLC-MS/MS，并通過方法學驗證，最低定量下限（LLOQ）能達到10.00 ng/mL，符合血漿中卡托普利濃度檢測要求。卡托普利片受試制劑和參比制劑的Cmax、AUC0-t和AUC0-∞個體內變異均小于30%，受試制劑與參比制劑主要藥代動力學參數幾何均值比值的90%CI 均在80.00%～125.00%，而且沒有嚴重不良事件發生，可以判斷兩種制劑具有生物等效性。