藍舌病在全球的分布概況

李茂林，張七斤，徐青元

(1. 中國農業科學院哈爾濱獸醫研究所 獸醫生物技術國家重點實驗室，哈爾濱 150069；2. 內蒙古農業大學 獸醫學院，呼和浩特 010018)

藍舌病(bluetongue，BT)是由藍舌病病毒(bluetongue virus，BTV)引起的多種反芻動物易感的非接觸性蟲媒疫病，該病可以感染多種家養和野生反芻動物，其中綿羊最為易感。因病毒血清型、感染動物種類以及疫病是否首次流行等因素的不同，動物感染BTV后表現出的臨床癥狀有很大差異，可表現為無臨床癥狀、亞臨床癥狀乃至死亡。根據OIE報道，該病對于綿羊的病死率通常為2%～30%，有時可達70%，對于最為易感的綿羊，病死率甚至可達100%[1]。BT最早報道于1876年，發病動物為非洲的綿羊[2]，我國1979年于云南省師宗縣首次證明該病存在[3]。目前，該病在除南極洲外的其他大陸熱帶和亞熱帶絕大部分國家和地區存在，BT的分布范圍原本介于北緯40°至南緯35°之間，但是2006年以后，其流行范圍已擴展到北緯50°。該病對畜牧業的危害包括疫病給生產造成的直接損失和對該疫病的防控費用及影響國際貿易造成的間接損失，平均每年在全世界范圍內造成的經濟損失可達30億美元。BT被世界動物衛生組織(Office International des Epizooties，OIE)列入OIE疫病名錄(OIE-Listed disease),為需通報動物疫病，我國則將其列為一類動物疫病。自1979年在我國云南省師宗地區首次正式報道BT以來，我國已在多個省份和地區開展了BT的血清學調查以及病毒分離工作。

1 BTV病原特性及傳播特點

BTV隸屬于呼腸孤病毒科環狀病毒屬，其核酸由10個分節段的雙股RNA構成，共編碼12種蛋白[4]。其中,VP2和VP5是BTV血清學分型的主要抗原，而VP7是血清學檢測中主要的群特異性抗原[4-5]。不同血清型病毒在自然感染狀態下可以發生基因節段互換。幾乎所有的反芻動物都可以感染BTV，其中，綿羊最為易感且最容易表現出臨床癥狀，其他動物通常表現為亞臨床癥狀或隱性感染。但是在2006年歐洲暴發了毒力更強的BTV-8相關疫情，牛在感染該病毒后也表現出明顯的臨床癥狀。在BTV的傳播過程中，隱性感染動物特別是牛和其他野生反芻動物常作為病毒儲存宿主，在該病的傳播過程中扮演著重要的角色。易感動物間的直接接觸不會傳播本病，通過吸血昆蟲傳播是BTV的主要傳播方式。庫蠓屬蠓類是BTV最主要的傳播媒介，但在1 300～1 400種庫蠓中，只有約30種可以傳播BTV。除庫蠓外，在蚊子體內也分離到了BTV，這表明蚊子在BTV的傳播過程中可能也起著重要作用。傳播媒介一旦感染BTV，將會終生帶毒[6]。BT流行情況與傳播媒介昆蟲的分布、習性和生活史密切相關，并且氣候與環境因素也會影響該病傳播，該病通常呈季節性流行。雖然有報道稱公牛和公羊精液樣品中檢測出BTV并可以傳播給雌性動物，甚至BTV可以通過胎盤傳播給胎兒，但這些傳播方式并非BTV的主要傳播方式，在該病流行過程中的意義不大。

2 BT全球流行概況

BT最早發現于非洲，并且很可能在更早的時期BTV就已經在非洲的野生動物中存在并流行。對于BT臨床癥狀最早的詳細記錄始于1902年，所記錄的患病動物為由歐洲引入南非開普敦殖民地的美利奴綿羊[7]。1905年，首次證實引起BT的病原是一種病毒[8]。1944年，首次證實BT的傳播媒介為庫蠓[9]。Howell等[10]在20世紀60年代首次通過病毒中和試驗對BT進行了血清學分型。20世紀40年代以前，BT僅存在于南非地區。1943年，亞洲國家塞浦路斯發生BT疫情，這是BT首次在非洲之外的地區發生[11]。1952年，美國加利福尼亞州出現BT疫情，標志著BT成功入侵北美洲[12]。1956—1957年期間，在伊利比亞半島出現BT疫情并造成大約18萬只綿羊死亡標志著BT成功入侵歐洲[13]。1976年，澳大利亞鑒定出BTV-20標志著BT成功入侵澳洲[14]，接下來在除南極洲以外的各大洲陸續分離鑒定出BTV，至此BT開始在全世界范圍內流行。鑒于1956—1957年BT給伊利比亞半島畜牧業造成的巨大經濟損失，20世紀60年代，OIE就已將BT列為A類動物疫病。迄今為止，全球已經陸續鑒定出29個血清型的BTV[15-17]。

自BT首次在非洲以外的地區發現以來，已在全球范圍內出現數次暴發，且在多個地區持續存在，表1列出了1943年以來全球BT暴發和病毒分離情況。由于全球經濟水平差異、技術的不平衡性以及信息的滯后性，無法確定各個國家和地區目前有多少個血清型BT在流行。根據現有文獻統計，在1998—2006年，歐洲至少出現了BTV-1、BTV-2、BTV-4、BTV-9、BTV-16 5個血清型的病毒[18-20]，2006年8月，出現了毒力增強的BTV-8，該病毒首次導致牛出現明顯臨床癥狀，并且使BT的傳播范圍突破北緯40°[21]。2008年，在德國、新西蘭和比利時出現BTV-6和BTV-11兩個血清型的病毒，而在2008和2014年，分別在瑞士和法國首次鑒定出BTV-25和BTV-27兩個血清型的病毒[22-23]。在北美洲，1998年以前鑒定出的血清型分別為BTV-2、BTV-10、BTV-11、BTV-13和BTV-17，據統計每年造成的經濟損失超過1億美元，1998年以后，在美國東南部陸續分離鑒定出BTV-1、BTV-3、BTV-5、BTV-6、BTV-9、BTV-12、BTV-14、BTV-19、BTV-22和BTV-24共計10個血清型的BTV[24-25]。在澳大利亞至少鑒定出BTV-1、BTV-2、BTV-3、BTV-7、BTV-9、BTV-15、BTV-16、BTV-20、BTV-21和BTV-23共計10個血清型的病毒，其中，BTV-1和BTV-21曾經是該地區主要流行的血清型[25]。2011年之前，在亞洲已經鑒定出BTV-1～BTV-24共計24個血清型的病毒，2011年，科威特首次分離鑒定出BTV-26，2016年，以色列在綿羊痘和牛結節性皮膚病疫苗內首次分離鑒定出BTV-28，2020年，我國鑒定出BTV-29，目前，亞洲至少存在27個血清型的BTV，其中印度通過中和試驗和病毒分離鑒定的方法證實，該國存在BTV-1至BTV-21和BTV-23共計22個血清型病毒[16, 26-28]。由于缺乏準確的流行病學調查數據，人們僅能粗略地對BT的全球流行概況進行闡述。但從BT在全球的流行來看，該病防控形勢仍然十分嚴峻，特別是新的血清型、亞型以及強毒株的出現，更應引起我國高度重視。

3 我國BT血清學調查情況

1979年，在云南省師宗地區首次證明了BT在我國存在，自此開始在多個省份和地區開展了該病的檢測和監測工作。在檢測方法上，1994年以前，我國主要采用瓊脂免疫擴散試驗(AGID)進行血清學調查，1994年以后，開始使用更為敏感和準確的ELISA方法進行檢測。將我國近40年來有關BT血清學檢測的報道進行總結歸納，結果表明：在我國23個省份中，河北省[29]、山西省[30]、吉林省[31]、遼寧省[29]、陜西省[32]、甘肅省[33]、青海省[34]、山東省[30]、浙江省[35]、臺灣省[36]、湖北省[37]、江蘇省[30]、安徽省[30]、廣東省[38]、四川省[39]、貴州省[40]和云南省[5]均有BTV抗體陽性動物檢出；4個直轄市中，北京[41]和天津[29]有BTV抗體陽性動物檢出；5個自治區中，內蒙古自治區[5]、新疆維吾爾自治區[42]、廣西壯族自治區[5]和西藏自治區[43]有BTV抗體陽性動物檢出；香港和澳門2個特別行政區沒有BTV抗體陽性動物檢出的報道。與其他BTV抗體陽性動物檢出省份不同，河北、天津和遼寧3個省(直轄市)雖有BTV抗體陽性動物檢出的報道，但該報道所記錄的信息十分籠統，每個省份進行檢測的具體地點、檢測動物種類、樣品數量及陽性率均未提及[29]。河南省雖然沒有BTV抗體陽性動物檢出的報道，但是據推測應有BT流行[30]。山東省沒有BTV抗體陽性動物檢出的報道，但是該省分離到1株 血清16型BTV，因此，可以確定該省存在BT抗體陽性動物[30]。目前，沒有BTV抗體陽性動物報道的地區中，重慶市、寧夏回族自治區、河南省、湖南省、江西省和福建省均處于北緯20°～40°，并且被檢出BT抗體陽性動物的省份所包圍，這些因素足以使人懷疑這些地區是否真的沒有BT存在。

4 我國BTV分離鑒定情況

BTV分離的主要方法是將感染動物抗凝血或紅細胞裂解物靜脈接種雞胚，再將特定時間死亡雞胚勻漿后接種易感細胞從而獲得病毒分離株，通常在血清學調查陽性區域放置哨兵動物更容易分離到病毒。自1979年在云南省曲靖地區師宗縣五龍鄉分離到第1株BTV至今的40年來，我國已分離到多株BTV。將我國首次報道的不同血清型BTV分離株進行歸納整理，并對分離時間、分離地點、分離動物和病毒編號進行統計，匯總結果如表2所示。我國目前已經陸續分離到16個血清型的BTV，分別為BTV-1、2、3、4、5、7、9、11、12、14、15、16、17、21、24和29。

這16個血清型BTV分別在我國10個省份(地區)分離到(圖1)，其中，云南分離到的血清型最多，共分離到11個血清型，分別為BTV-1、2、3、4、5、9、12、15、16、21和24。廣東次之，分離到BTV-2、4、5、7、12和16共計6個血清型。新疆分離到3個血清型。江蘇、四川和臺灣各分離到2個血清型。甘肅、廣西、內蒙和山東各分離到1個血清型。此外在新疆分離到一株不與BTV-1至BTV-24陽性血清發生中和反應的未定型病毒，在安徽、湖北、四川、甘肅、新疆等地分離到若干株病毒，但是沒有鑒定所分離病毒的血清型，這些沒有確定血清型的病毒未列入圖1。

從地理分布范圍來看，BTV-16分布最廣，在云南、廣東、四川和山東四省均分離鑒定出該血清型病毒；BTV-1分布于云南、新疆和四川；BTV-2分布于云南、廣東和臺灣；BTV-4和BTV-5分布于云南和廣東；BTV-12分布于與云南、廣東和臺灣；BTV-3、BTV-9和BTV-24只在云南分離到；BTV-7只在廣東分離到；BTV-14和BTV-29只在新疆分離到。從分離時間來看(圖2)，1979—1990年，我國首次分離到BTV-1和BTV-17共計2個血清型病毒；1991—2000年，首次分離到BTV-2、3、4、12、15和16共計6個血清型病毒；2001—2010年，沒有分離到新的血清型的BTV；2011年至今，首次分離到BTV-5、7、9、14、21、24和29共計7個血清型病毒；BTV-11因無法確定分離年限，沒有計入時間軸。病毒中和(VN)試驗是BTV血清型鑒定的金標準，但是隨著近年來基因測序技術的進步，通過序列分析對BTV進行分型的方法也逐漸被大家接受，并成為分離株溯源的重要手段，特別是在病毒發生重組的情況下，對病毒進行全基因組測序顯得尤為重要。目前，我國已經完成BTV血清1型、7型、15型、16型和21型病毒全基因測序工作，這些病毒全基因組測序工作的完成對我國BTV的研究具有重要意義。特別是血清21型病毒5149E株的全基因組測序結果表明該毒株的Segment 6基因節段可能來源于日本分離的BTV-16 KSB-6/C/08株，這意味著我國已有基因重組病毒存在，并且很有可能還存在其他重組病毒。

5 小 結

BTV主要由吸血昆蟲傳播，在2006年以前，BT主要分布于南緯40°和北緯35°之間，但在亞洲、美國西北部以及歐洲北部，BT流行區域可達北緯50°地區[13, 55-56]。在不同的地區，不同血清型甚至不同亞型的病毒，可能其傳播媒介存在差異，由于對BTV傳播媒介的研究相對較少，尚無法準確掌握每個地區BTV的傳播媒介。人們推測BT流行范圍的擴大與全球氣候變化相關，但其流行范圍的變化實際上是與傳播媒介的分布相吻合的，氣候變暖等因素可能首先對媒介昆蟲分布范圍產生影響，進而導致了BT的流行范圍變化[18, 57-58]。BT在全球的流行過程中表現的特征：1)新血清型不斷出現；2)不同基因節段重組病毒陸續出現；3)不斷有新的傳播媒介出現，進而導致BT流行范圍發生變化；4)某一地區可能同時存在多個血清型流行；5)某一血清型病毒可能在多個地區流行，并且病毒在基因水平出現地域特征。這些流行特點為BTV的基因變異提供了更為便利的條件，使強毒株出現的概率大大提高，從而導致畜牧業始終處于BTV的威脅之下。由于數據的缺乏，準確闡述BT在全球的流行情況是非常困難的，但通過對現有數據的整理，仍可發現BT的在全球流行的復雜性。近年來，隨著我國“一帶一路”等國家重大戰略的實施，我國與其他國家的貿易更為頻繁，在此背景下，我們更應對BT等外來動物疫病提高警惕，以免對我國養殖業造成經濟損失。

從我國首次確定BT在我國存在至今已經過去40年時間。在這40年中，不斷有新的省份檢測出BT抗體陽性動物，各地區分離鑒定到的BTV血清型也越來越多。從血清學角度來看，BT在我國全境絕大部分地區存在和流行，目前，大量血清學調查相關的報道僅停留在檢測群特異性抗體陽性水平，很多地區尚無法確定具體流行哪種血清型的BTV。沒有BT抗體陽性動物報道的地區中，寧夏、河南、重慶、湖南、江西和福建被BTV血清學陽性省份所包圍，并且氣候上具備BT流行的條件，對以上地區進行血清學檢測，以確定是否有BT流行十分必要。黑龍江地處我國北部邊陲，氣候寒冷，其氣候條件可能影響了BT的傳播媒介，從而不具備BT流行的條件。上海、香港和澳門未見BT陽性動物報道，這可能與這三個城市畜牧業發展情況有關。海南省地獨特的地理位置應該是沒有陽性動物報道的主要原因。從病原學角度來看，我國只在12個省級行政區域內分離到BTV，只有10個省級行政區對分離的BTV進行了血清型鑒定，尚有12個省級行政區域只有BTV抗體陽性動物報道而沒有分離鑒定BTV。因此，雖然我國已經分離到16個血清型的BTV，但不排除其他血清型BTV存在的可能性。BT是一種蟲媒疫病，并且該病血清型眾多，各個血清型間不能完全交叉保護，因此，防控難度較大，通過對易感動物進行免疫的方法來預防該病需要使用特定血清型的疫苗。在此前提下，對BT流行情況的準確掌握就顯得尤為重要。確切掌握BT的流行情況，不但需要大量人財物的投入，同時，需要相關部門的重視以及各個部門的通力合作。目前，我國BT流行病學調查缺乏系統性，各個地區相關報道的數據數量和質量參差不齊，某些地區監測數據甚至出現必要參數缺失的現象。此外，我國對BTV傳播媒介所掌握的信息嚴重缺失，目前，我國有多少種蚊蟲可以攜帶并傳播BTV？各地BTV的主要傳播媒介是什么？這些問題都需要大量研究來給出答案。

目前，我國流行的BTV是否具有致病性是人們關注的一個焦點。從BT在我國發生的歷史來看，我國早期的BT病例是有臨床癥狀的，特別是1979年師宗首次分離到BTV的案例中，該病不但有明顯的臨床癥狀，還造成了大量動物死亡[3]。但近年來基本沒有BT自然感染病例出現臨床癥狀的報道。因此，有學者認為BTV已經不再對我國畜牧業構成威脅，自然狀態下流行的各個血清型BTV使易感動物處于天然的“免疫保護”狀態，自然狀態下流行的病毒可以看作是天然的“弱毒疫苗”。但實際情況很可能并非如此，第一，該病毒血清型眾多，其基因極易發生突變和重組，即便是弱毒疫苗也發生過和野生型病毒重組的情況，任由病毒流行很可能發生不可預知的結果。如2006年在歐洲流行的BTV-8強毒株就與其他BTV-8毒株有很大差異，該毒株不但可以使感染羊表現出明顯的臨床癥狀，而且對牛也有致病性，在此之前，牛被認為是隱性感染動物[56]；第二，即便是弱毒疫苗也存在一定的致病風險，現階段已有弱毒疫苗引起免疫動物出現臨床癥狀或導致生產性能下降的報道[59]。我國至少有16個血清型的BTV在各地流行，很難保證這些病毒確實都是對動物生產性能不產生任何影響的“天然疫苗”。我國養羊業目前還以散養為主，飼養管理較為粗放，很可能出現一些一過性臨床癥狀或亞臨床癥狀被忽略的情況；第三，我國作為BT的老疫區，即便是該病真的不會給我國動物飼養業造成直接經濟損失，但是作為OIE規定的需通報疫病，該病也必然會對我國的進出口貿易造成不良影響；最后，近年來小反芻獸疫、非洲豬瘟和牛結節性皮膚病等疫病的突然出現給我國造成非常嚴重的影響和損失。人們理應以此為鑒，認真做好BT的儲備研究，不但要準確及時地掌握該病在我國的流行情況，而且要對鄰國疫情適時了解，以防止外來BTV傳入我國。基于以上原因，即便近年來沒有該病在我國造成嚴重經濟損失的報道，人們仍然要重視該病，至少要進行必要的技術儲備，不但要準確掌握該病在我國的流行情況，而且要在突發事件出現時能夠有效應對。