腦小血管病患者運動障礙與血清IMA LP-PLA2 BDNF 水平的相關性研究

王天舒 景黎君 滕軍放 牛瑞娜

鄭州大學第一附屬醫院，河南 鄭州450052

腦小血管疾病（cerebral small vessel disease，CSVD）是指腦小動脈、微動脈、毛細血管、小靜脈等微小血管病變引起的腦部病變，病理改變表現為玻璃樣變、纖維素樣變壞死、小動脈硬化等，腦組織則可發生腔隙性梗死、腦微出血、腦白質疏松、血管周圍間隙增寬等變化［1-3］。研究［4］表明CSVD 占所有腦部血管疾病的83.8%，因其發病隱匿，且進展緩慢，早期易被忽視，預后欠佳。運動障礙是CSVD預后不佳患者的常見癥狀，對患者工作、生活造成極大影響［5］。因此，通過了解影響CSVD 患者運動障礙的相關因素，對于CSVD的治療指導、預后評價有重要意義。血液生化檢查是臨床常用的診療手段，在病變早期無影像學改變疾病的診斷、治療及預后評估有重要意義［6］。研究［7-9］發現血清缺血修飾清蛋白（ischemia modified albumin，IMA）、脂蛋白磷脂酶A2（lipoprotein-associated phospho-lipase A2，Lp-PLA2）、腦源性神經營養因子（brain-derived neurotrophic factor，BDNF）是與心腦血管疾病發生密切相關的因子，參與腦血管疾病的發生發展。目前關于IMA、Lp-PLA2、BDNF的研究主要側重于心腦血管疾病的診斷、預后方面，而與CSVD患者運動障礙的相關研究較少。本研究通過分析CSVD 患者運動障礙與其血清IMA、Lp-PLA2、BDNF水平的相關性，以期為CVSD的診療提供參考。

1 資料與方法

1.1 研究對象 選取2019-01—2020-01鄭州大學第一附屬醫院神經內科住院的CSVD患者82例為腦血管疾病組，另從同期來院體檢的健康者中選取80 例為對照組。腦血管疾病組男49例，女33例，年齡44～85（66.87±8.50）歲；疾病類型：腔隙性腦梗死30例，腦白質病變12 例，微出血23 例，血管周圍間隙擴大17例。對照組男43 例，女37 例，年齡42～80（65.80±9.02）歲。納入標準：（1）腦血管病組均經磁共振或腦部CT等影像學檢查確診，且符合國際血管改變神經影像標準報告小組提出的CSVD神經影像學標準［10］；（2）無顱腦內外動脈重度狹窄史；（3）均接受溶栓、抗血小板等保守治療手段。排除標準：（1）多發性硬化、中毒、嚴重的睡眠呼吸暫停綜合征等特殊原因造成的腦部影像學改變；（2）大面積腦梗死；（3）惡性腫瘤、腦外傷史及顱內感染者。2 組性別、年齡資料比較差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。研究開始前已經醫院倫理委員會批準，受檢者對本次內容均知情同意，簽署知情同意書。

1.2 研究方法

1.2.1 血清IMA、Lp-PLA2、BDNF 水平檢測：抽取受檢者入院48 h 內的空腹肘靜脈血，肝素抗凝，30 min內以3 000 r/min離心15 min，離心半徑10 cm，取上層血清保存于－80 ℃待檢。以酶聯免疫吸附法試劑盒（廣東中山生物工程有限公司）檢測IMA、Lp-PLA2、BDNF，嚴格按照試劑盒說明書步驟操作，將IMA、Lp-PLA2、BDNF和生物素標記的抗體同時溫育，洗滌后加入親和素標記過的過氧化物酶，再次溫育洗滌，取出未結合的酶結合物，加入底物A、B，與酶結合物同時作用，于波長450 nm的酶標儀上讀取吸光度值，根據標準曲線計算待檢樣本濃度。

1.2.2 CSVD 患者運動障礙診斷及分組：簡式Fugl-Meyer（FM）為運動障礙診斷標準［11］，FM 包括上肢部分和下肢部分，總評分0～100分，分數＜100分表示存在功能障礙，且分數越低為運動功能障礙越嚴重，Cronbach’s α系數0.75～0.82。所有患者入院病情穩定后進行FM評估，將FM評分＜100分納入運動障礙組，否則納入未運動障礙組。

1.2.3 收集CSVD 患者運動障礙影響因素：收集CSVD患者的相關資料，包括性別、年齡、入院時BMI、吸煙史、飲酒史、高血壓、糖尿病、頸動脈粥樣硬化、CSVD 類型、總膽固醇（total cholesterol，TC）、三酰甘油（triacylglyceride，TG）、低密度脂蛋白膽固醇（low density cipoprotein-cholesterol，LDL-C）、高密度脂蛋白膽固醇（hight density cipoprotein-cholesterol，HDL-C）、血同型半胱氨酸（Hcy）、血尿酸（uric acid，UA）、紅細胞沉降率（erythrocyte sedimentation rate，ESR）、血紅蛋白（hemoglobin，HGB）、紅細胞比積（header convertor，HCV）、IMA、Lp-PLA2、BDNF。

1.3 統計學方法 采用SPSS 25.0 統計學軟件分析數據，計量資料以均數±標準差（±s）表示，采用t 檢驗；計數資料以率（%）描述，數據比較采用校正χ2檢驗，相關性分析采用Pearson相關性分析。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 2 組血清IMA、Lp-PLA2、BDNF 水平比較 腦血管疾病組血清IMA、Lp-PLA2 水平均高于對照組，血清BDNF 水平低于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

2.2 2 組相關因素比較 CSVD 患者中34 例發生運動障礙為運動障礙組，其余納入非運動障礙組。運動障礙組中頸動脈粥樣硬化占比及血清IMA、Lp-PLA2、Hcy水平高于對非運動障礙組，血清BDNF水平低于非運動障礙組，差異有統計學意義（P＜0.05）。2組性別分布、吸煙史、飲酒史、高血壓、CSVD類型、糖尿病占比，以及年齡、入院時BMI、TC、TG、LDL-C、HDL-C、UA、ESR、HGB、HCV 比較差異均無統計學意義（P＞0.05）。見表2。

2.3 Logistic 回歸分析CVSD 患者發生運動障礙的獨立危險因素 將可能影響CSVD 患者發生運動障礙的影響因素為自變量（X），是否發生運動障礙為因變量（Y），對經單因素分析差異有統計學意義的因素進行賦值，發生運動障礙計為1，未發生計為0，賦值結果見表3。Logsitic 回歸分析顯示，頸動脈粥樣硬化、血清IMA、Lp-PLA2、BDNF、Hcy 水平是導致CSVD變患者發生運動障礙的獨立危險因素（P＜0.05）。見表4。

表1 2組血清IMA、Lp-PLA2、BDNF水平比較（±s）Table 1 Comparison of serum IMA，Lp-PLA2 and BDNF levels in two groups（±s）

表1 2組血清IMA、Lp-PLA2、BDNF水平比較（±s）Table 1 Comparison of serum IMA，Lp-PLA2 and BDNF levels in two groups（±s）

組別腦血管疾病組對照組t值P值n 82 80 IMA（μg/mL）50.32±10.33 80.37±15.25 14.716＜0.001 Lp-PLA2（mg/L）212.30±35.33 138.52±20.58 16.189＜0.001 BDNF（μg/L）10.02±2.28 13.58±3.20 8.137＜0.001

表2 2組相關因素比較Table 2 Comparison of related factors between two groups

表3 Logistic回歸分析賦值Table 3 Assignment of Logistic regression analysis

表4 Logistic回歸分析運動障礙的獨立危險因素Table 4 Independent influencing factors of exercise disorder by Logistic regression analysis

2.4 CSVD 患者運動障礙與血清IMA、Lp-PLA2、BDNF水平的相關性分析 CSVD運動障礙患者的FM評分為（90.23±2.31）分。Pearson 相關性分析顯示CSVD 患運動障礙患者的FM 評分與血清IMA、Lp-PLA2水平呈負相關（r= 0.756、0.670，P＜0.05），與血清BDNF水平呈正相關（r=0.602，P＜0.05）。見表5。

表5 CSVD患者運動障礙與血清IMA、Lp-PLA2、BDNF水平的相關性分析Table 5 Correlation analysis of dyskinesia and serum IMA，Lp-PLA2，BDNF levels in CSVD patients

3 討論

隨著中國人口老齡化的加劇及生活方式的改變，腦血管疾病的危險因素增多，CVSD 的發病率逐漸上升［12-13］。CVSD 進展緩慢，臨床癥狀無特異性，多數患者因病情進展到一定階段急性發作而就診，急性發作以腔隙性腦梗死和腦實質出血最為常見，可使患者出現肌張力障礙、行走困難、震顫等運動障礙表現，對生活質量造成極大影響［14-15］。因CVSD的病變較輕，可自行緩解，但仍有部分患者預后較差，且自行緩解患者在早期仍會對工作、生活及家人造成負擔［16］。因此，了解CVSD患者運動障礙的影響因素，及時做好預防準備對減輕患者負擔有重要意義。

本研究顯示腦血管疾病組血清IMA、Lp-PLA2水平均高于對照組，BDNF水平低于對照組，說明CVSD患者存在血清IMA、Lp-PLA2、BDNF水平異常。IMA最早以心肌缺血標志物受到灌注，機體發生缺血/再灌注時生成大量的氧自由基破壞血清白蛋白的氨基酸序列，血清白蛋白與過渡金屬結合能力改變，更易被生物化學因素降解而破壞，這種因缺血缺氧而被降解修飾的血清白蛋白即IMA［17-19］。CVSD患者中因腦血管病變可造成腦組織能量代謝障礙，導致自由基過度生成，可引起IMA水平升高［20］。MENON等［21］研究發現腦卒中患者血清IMA 明顯高于對照組，可作為早期缺血性卒中篩查的一個敏感和快速的生物標志物。Lp-PLA2是由血管內膜細胞中巨噬細胞、T細胞和肥大細胞分泌的促進氧化磷脂水解的磷脂酶，能氧化水解低密度脂蛋白（ox-LDL）中的氧化磷脂，生成脂類促炎物質，導致血管內皮細胞死亡及功能異常，參與心血管病變［22-23］。研究［24］證實Lp-PLA2是氧化應激和炎癥反應的生物標志物，其水平的升高可增加心血管疾病發生風險。BDNF是具有神經營養作用的蛋白質，在神經系統中廣泛表達［25］。研究［26］發現腦血管疾病患者因存在腦部能量供應障礙，發生炎癥反應、氧化應激等一系列病理改變，神經功能受損，BDNF 被過度消耗，血清水平下降。上述研究證實IMA、Lp-PLA2、BDNF參與CVSD的發生。

本研究中運動障礙組中頸動脈粥樣硬化占比及血清IMA、Lp-PLA2、Hcy 水平高于對非運動障礙組，血清BDNF 水平低于非運動障礙組；Logistic 回歸分析顯示頸動脈粥樣硬化、血清IMA、Lp-PLA2、Hcy、BDNF 水平均是CVSD 患者發生運動障礙的獨立影響因素，說明血清IMA、Lp-PLA2、BDNF 水平的異常可增加CVSD 患者運動障礙風險。IMA 的產生與缺血缺氧造成的能量代謝障礙有關，其水平越高提示缺血缺氧造成的能量代謝障礙越嚴重，對神經細胞、腦皮質及錐體束等影響機體運動功能的組織損傷越嚴重，因此是導致CVSD 患者運動障礙的危險因素［27-28］。Lp-PLA2 造成的血管內皮功能損傷可刺激黏附因子和細胞因子的生成，通過趨化炎癥細胞進一步產生自我強化的循環，加重促炎因子的分泌，形成惡性循環［29-31］。因此Lp-PLA2可加重CVSD損傷，增加運動障礙風險。腦損傷發生后BDNF是促進神經元存活和分化的關鍵，其水平下降能導致神經細胞的凋亡，引起神經功能障礙，增加運動障礙風險。研究認為BDNF修飾的神經干細胞移植可影響脊髓損傷大鼠的軸突再生與后肢運動功能，說明BDNF水平異常參與運動障礙的發生［32-40］。此外，本研究中Pearson相關性分析證實CVSD發生運動障礙患者的FM評分與血清IMA、Lp-PLA2呈負相關，與BDNF水平呈正相關，與上述研究觀點一致，證實血清IMA、Lp-PLA2、BDNF水平參與CVSD患者運動障礙的發生。

CVSD 患者存在血清IMA、Lp-PLA2、BDNF 水平異常，且血清IMA、Lp-PLA2、BDNF 水平是其運動障礙的影響因素，而FM評分與血清IMA、Lp-PLA2水平呈負相關，與血清BDNF水平呈正相關。因此可考慮將IMA、Lp-PLA2、BDNF 作為CVSD 的診斷及預后預測標志物。