腦腸肽Ghrelin和ICAM-1表達與基底節腦出血患者神經功能缺損及預后的關系*

夏百里 董烜瑋 崔昌盛 柴士平

(1.濰坊醫學院臨床學院，山東 濰坊 261053；2.濰坊醫學院附屬醫院神經外科，山東 濰坊 261031；3.濱州市人民醫院超聲醫學科，山東 濱州 256610；4.日照市中醫醫院神經外科，山東 日照 276826)

腦出血是神經外科的一種危急重癥，該病具有發病急、病情發展迅速、發病率高、致殘率高等特點[1-2]。基底節區是腦出血常發部位，該疾病主要因顱內血管發生病變，破裂所致。患者若為基底節區腦出血，雖經及時有效的治療，預后也較容易引起偏癱等后遺癥，嚴重影響患者的生存及生活質量[3-4]。腦腸肽Ghrelin又稱胃饑餓素，是一種生長激素促分泌素的內源性配體，在人體內廣泛分布，其主要通過結合生長激素促分泌激素受體而發揮作用[5-6]。細胞間粘附分子-1(Intercellular Adhesion Molecule-1，ICAM-1)是粘附分子免疫球蛋白超家族成員之一，可在多種細胞表面表達[7-8]。腦腸肽Ghrelin和ICAM-1與基底節腦出血患者神經功能缺損及預后有關，但至今關于其作用機理及影響的研究甚少。基于此，本研究擬通過檢測基底節腦出血患者血清中腦腸肽Ghrelin和ICAM-1表達情況，探討其表達水平與基底節腦出血患者神經功能缺損及預后的關系，旨在為基底節腦出血的臨床治療提供有價值的參考依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2016年1月～2018年2月濰坊醫學院附屬醫院確診并住院治療的80例基底節區腦出血患者為基底節腦出血組(簡稱腦出血組)，并選取同期因頭痛等原因在該院神經內科建檔并進行常規檢查的人群75例為對照組。基底節腦出血組納入標準：①符合《中國腦血管疾病分類2015》中的基底節腦出血診斷標準[9]。②在該院經頭顱影像CT檢查確診為基底節腦出血者。③患者及家屬選擇在該院接受治療者。④臨床資料齊全者。排除標準：①患有凝血功能障礙等相關疾病者。②患有嚴重肝、腎等疾病及惡性腫瘤者。③依從性較差者。④臨床資料不全者。該研究經醫院道德倫理委員會批準通過，所有樣品采集均取得患者及家屬知情并簽署同意書，且符合《世界醫學協會赫爾辛基宣言》。

1.2 研究方法

1.2.1 樣品采集及保存 血清樣品：清晨采集受試對象空腹靜脈血5 mL，使用離心機(購自于北京若水合科技有限公司，貨號：wi82487)，以3000 r/min速率離心15 min后收集上層血清，置于-20℃冰箱中保存待測。

1.2.2 血清Ghrelin、ICAM-1表達水平的檢測 采用酶聯免疫吸附(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay，ELISA)法檢測各組血清腦腸肽Ghrelin和ICAM-1的表達水平。在標準孔和空白孔中分別加入已配制好的100 uL標準樣品，于第1孔中加入標準樣品100 uL，混合均勻后吸取100 uL加入第2孔并進行稀釋，按照上述步驟重復稀釋至第5孔。在待測孔中加入80 uL樣品稀釋液和待測樣品10 uL，混合均勻后于37 ℃下孵育20 min。棄去酶標板內液體，然后用吸水紙拍干，再加入顯色劑混合均勻，進行顯色。最后加入終止液，并測定其吸光度。

1.3 神經功能損傷評定 采用腦卒中神經功能缺損評分表(Chinese Stroke Scale，CSS)進行CSS評分，主要包括語言、意識、面肌、手肌力、下肢肌力、上肢肌力、步行能力、水平凝視八項，總分為0～45分，分數越高表示患者神經功能缺損越嚴重。

1.4 隨訪及預后評估 對本研究中涉及到的所有患者治療出院后進行門診復查或電話隨訪，并根據相關標準對患者預后進行評估，隨訪時間為1年，末次隨訪時間截止2019年2月28日，死亡患者以死亡時間作為隨訪截止期，本次隨訪的中位隨訪時間為6.23個月，且本研究中未出現失訪情況。

預后評定：根據Rankin量表(Modified Rankin Scale，MRS)對患者進行MRS評分，總分≥3分為預后不良，總分<3分為預后良好。

2 結果

2.1 兩組一般資料的比較 腦出血組和對照組的性別、平均年齡、體質量指數(Body Mass Index，BMI)、吸煙、糖尿病及飲酒比較，差異無統計學意義(P>0.05)；兩組高血壓和高血脂比較，差異有統計學意義(P<0.05)，見表1。

表1 兩組基本資料比較

2.2 兩組血清Ghrelin、ICAM-1表達水平比較 腦出血組血清腦腸肽Ghrelin表達水平顯著低于對照組，血清ICAM-1表達水平顯著高于對照組(均P<0.05)，見表2。

表2 兩組患者血清Ghrelin、ICAM-1表達水平比較

2.3 Ghrelin、ICAM-1高低表達者神經功能缺損的比較 分別以腦腸肽Ghrelin、ICAM-1表達平均值(26.87 μg/L、300.65 ng/mL)將腦出血患者進行分類，高于平均值的為高表達者，低于平均值的為低表達者。高Ghrelin者CSS評分顯著低于低Ghrelin者，高ICAM-1者CSS評分顯著高于低ICAM-1者(均P<0.05)，見表3。

表3 兩組患者神經功能缺損的比較分)

2.4 Ghrelin、ICAM-1高低表達者預后的比較 高Ghrelin者預后不良發生率明顯低于低Ghrelin者，高ICAM-1者預后不良發生率明顯高于低ICAM-1者(均P<0.05)，見表4。

表4 各組患者預后的比較[n(×10-2)]

2.5 影響腦出血患者死亡或殘疾的因素 以腦出血患者死亡或殘疾發生為因變量(0=否，1=是)，血清Ghrelin、ICAM-1表達水平、高血壓、高血脂為自變量，采用Logistic回歸分析。結果顯示，血清ICAM-1表達水平是影響腦出血患者發生死亡或殘疾的獨立危險因素，血清Ghrelin表達水平為腦出血患者發生死亡或殘疾的保護因素，見表5。

表5 腦出血患者死亡或殘疾的危險因素分析

3 討論

腦出血的常發部位為基底節區，基底節區供應動脈血管垂直于大腦中動脈，當人體血壓較高時易引起動脈管壁內膜發生玻璃樣變性或纖維壞死，從而形成動脈瘤并發生破裂導致腦出血[10-11]。腦出血治療后幸存者較易出現認知障礙、偏癱等癥狀，已成為臨床研究關注的重點之一。流行病學研究顯示，中國腦出血患病率呈逐年上升的趨勢，而目前臨床治療腦出血的方法仍不完全有效，基底節腦出血的早期診斷及治療仍是神經外科需要攻克的難題之一。

人腦腸肽Ghrelin是一種由28個氨基酸組成的多肽，分子量為3314 D，廣泛分布于人體內，且常與生長激素促分泌激素受體結合，具有較強的促生長激素分泌的作用[12-13]。有研究顯示，腦腸肽Ghrelin與多種疾病的發生、發展有關。陳陽[14]研究發現，腦腸肽Ghrelin表達水平在腸易激綜合征重疊胃食管反流病患者血漿中低表達，并與腸易激綜合征重疊胃食管反流病的發生密切相關。本研究結果顯示，基底節腦出血組血清腦腸肽Ghrelin表達水平顯著低于對照組，提示腦腸肽Ghrelin可能參與基底節腦出血的發展進程。

ICAM-1是一類分子量為76～114 kDa的膜表面單鏈糖蛋白，屬于免疫球蛋白超家族成員之一，具有調節細胞與細胞、細胞外基質與細胞間相互結合的作用[15-17]。有研究顯示，ICAM-1與多種疾病的發生及發展有關。范素鴻[18]研究發現，子宮內膜異位癥患者血清ICAM-1表達水平升高，且其表達水平在子宮內膜異位癥的發病機制中發揮重要作用。閆文明等[19]研究發現，ICAM-1在宮頸鱗癌組織中表達升高，且與宮頸鱗癌放療抵抗性密切相關。本研究結果顯示，基底節腦出血組血清ICAM-1表達水平顯著高于對照組，提示ICAM-1可能參與基底節腦出血的發展進程。本研究還發現，高Ghrelin者CSS評分顯著低于低Ghrelin者，高ICAM-1組患者CSS評分顯著高于低ICAM-1者，提示腦腸肽Ghrelin和ICAM-1表達水平與基底節腦出血患者神經功能缺損密切相關。此外，高Ghrelin者預后不良發生率明顯低于低Ghrelin組，高ICAM-1者預后不良發生率明顯高于低ICAM-1者，提示腦腸肽Ghrelin低表達和ICAM-1高表達表達水平與基底節腦出血患者預后不良情況發生率密切相關。此外，Logistic回歸分析結果顯示：血清ICAM-1表達水平是影響基底節腦出血患者發生死亡或殘疾的獨立危險因素，血清Ghrelin表達水平為基底節腦出血患者發生死亡或殘疾的保護因素，提示對兩者的監測可為基底節腦出血患者死亡或殘疾預測提供更充分的臨床依據。

4 結論

腦腸肽Ghrelin在基底節腦出血患者中的表達水平明顯降低，ICAM-1表達水平明顯升高，兩者參與基底節腦出血的發生及發展，且其表達情況與患者神經功能缺損及預后密切相關，提示腦腸肽Ghrelin和ICAM-1可作為基底節腦出血患者預后評估的潛在生物學指標，但具體的作用機制還有待深入研究。