丹參酮ⅡA固體分散體的制備、表征及溶出特性

王慧婷，趙必鑫，詹燕珊，郭思旖，何杰瀅，時軍,2

（1.廣東藥科大學中藥學院，廣東 廣州510006；2.廣東省局部精準遞藥制劑工程技術研究中心，廣東 廣州510006）

固體分散是改善難溶性藥物溶解度策略之一，藥物以分子形態、無定形態或微晶分散于載體材料中，藥物分子增加表面自由能，藥物粒子分散度高[1-2]。制成固體分散體可減小粒徑，改善潤濕性，增大孔隙率，減少結塊，改善藥物的物理狀態，顯著提高藥物溶出度，改善藥物的生物利用度[3-4]。溶劑法是固體分散體制備的常用方法，制備工藝簡單，可連續化操作，生產效率高，可實現工業化生產。

丹參是臨床常用的活血化瘀中藥，具有擴張血管、加快血流、改善微循環、改變血液黏滯性、增加心肌供血量的功效。丹參酮ⅡA（TSA）是丹參的主要有效成分之一，含有醌型結構，易被氧化，參與機體的多種生化反應而具有抗自由基過氧化、抑制人瘢痕成纖維細胞增殖及膠原生成、改善微循環障礙等多種生理活性，可有效抑制肝、肺、腎、腹膜等纖維化[5-6]。TSA 脂溶性強，在水中的平衡溶解度僅為8.10 mg/L，采用直接口服給藥途徑則吸收效率較低，影響藥效作用的發揮[7]。本研究應用溶劑法將TSA 與聚乙烯吡咯烷酮（PVP）制備為丹參酮ⅡA-PVP 固體分散體（TSA-PVP SD），考察其體外溶解度、溶出特性并進行物相鑒別。

1 儀器與材料

Xpert Pro MPD X-射線衍射儀（荷蘭帕納科公司）；DZF-6050 真空干燥箱（上海博迅實業有限公司）；Milli-Q 純水機（美國Millipore 公司）；SHB-3 循環水多用真空泵（河南太康教材儀器廠）；DSC200F3差示掃描量熱儀（德國耐馳儀器制造有限公司）；Nicolet Nexus 410傅里葉紅外光譜儀（賽默飛世爾科技公司）；GENEX 10～1 000 μL 單道可調節移液器（上海寶予德科學儀器有限公司）。

丹參酮ⅡA 原料藥（上海源葉生物科技有限公司，批號Y14M10C82864，質量分數≥95%）；丹參酮ⅡA 對照品（上海源葉生物科技有限公司，批號Y27M19C37812，質量分數≥99%）；PVP K30（FLUKA公司，批號12162-100G）；色譜甲醇（Merck KGa 公司，批號1847607636）。

2 方法與結果

2.1 TSN-PVP SD的制備

精密稱取一定質量比的TSA 與PVP K30，混合均勻，充分溶解于無水乙醇中，減壓回收乙醇，至黏稠狀后轉移至50 ℃真空干燥箱內，干燥4 h 后取出粉碎，過120 目篩，即得紅色粉末狀丹參酮ⅡA-PVP固體分散體（TSA-PVP SD）。

2.2 TSA的含量測定方法[8]

色譜條件：色譜柱為Cosmosil C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流動相為甲醇-水（體積比80∶20）；流速為1.0 mL/min；檢測波長為270 nm；柱溫為30 ℃；進樣量為10 μL。在上述條件下進樣檢測，以TSA 峰面積對質量濃度（μg/mL）進行線性回歸，得標準曲線A=0.984 4C+0.844 9，R2=0.9994，表明TSA質量濃度在1.875～30 μg/mL 范圍內與峰面積的線性關系良好，日內與日間RSD 值均小于2%，平均加樣回收率為（99.94±1.36）%。

2.3 TSA-PVP SD的溶解性能

2.3.1 溶解度實驗 分別取TSA、TSA-PVP 物理混合物（質量比1∶1）及質量比分別為1∶1、1∶2、1∶4、1∶6、1∶8 的TSA-PVP SD 置于20 mL（25±1）℃蒸餾水中，150 r/min磁力攪拌24 h，靜置后置離心機內2 000 r/min離心3 min，過0.22 μm 濾膜后測定TSA 飽和溶解度，結果如圖1 所示?？梢?，TSA 原料藥完全不溶于水，PVP 的加入可明顯提高其溶解度，同時TSA-PVP SD 相較于TSA-PVP 物理混合物溶解性能更優，且隨著TSA-PVP SD 中PVP 比例的增大，其溶解度也逐步增大。

圖1 不同質量比的TSA-PVP SD的藥物飽和溶解度Figure 1 Saturated solubility of TSA-PVP SD in different proportions

2.3.2 體外溶出度測定 照《中國藥典》2020 年版四部通則0931“溶出度與釋放度測定法”中槳法測定[9]。溶出介質：0.5%SDS 溶液900 mL，轉速100 r/min,水浴溫度（37±0.5）℃，投入TSA-PVP 物理混合物及各比例TSA-PVP SD（相當于TSA 5 mg），樣品接觸溶出介質后每隔10 min 取樣5 mL 至240 min，過0.22 μm濾膜，同時補足等量溶出介質，照“2.2”項方法測定TSA 的含量并計算累積溶出百分率，結果見圖2?？梢?，TSA-PVP SD 在溶出介質中的溶出度大于物理混合物，且隨PVP比例的提高而增大，其中質量比為1∶8 的TSA-PVP SD 的溶出速度最快，80 min 累積溶出率即達到90%以上。

2.4 TSA-PVP SD物相鑒別

圖2 不同藥物載體比例對TSA-PVP SD 中丹參酮ⅡA 溶出度的影響Figure 2 Effect of different drug carrier ratio on dissolution of TSA-PVP SD

2.4.1 顯微觀察 分別取適量TSA、PVP K30、TSA-PVP 物理混合物（質量比1∶8，等量遞增法混合均勻后過120 目篩）及TSA-PVP SD（質量比1∶8，后續物相鑒別亦采用此比例的固體分散體）于載玻片上，滴加適量石蠟使樣品粉末分散均勻并小心蓋上蓋玻片，光學顯微鏡下觀察各組樣品物理形態，結果見圖3?？梢姡琓SA呈不規則長條狀的紅色結晶樣；PVP K30為類球形微粒；TSA-PVP物理混合物中可分別清晰觀察到TSA晶體與PVP微粒，二者互無影響；TSA-PVP SD呈不規則紅色塊狀微粒，呈無定型態，未見明顯TSA 晶體結構，表明TSA 已以非結晶狀態均勻分散于PVP載體中，形成固體分散體。

2.4.2 X 射線粉末衍射（XRD） 測量條件：Cu Kα 靶石墨單色器衍射束單色比，高壓40 kV，電流100 mA，掃描范圍設定為5～70°，掃描速度限制為6.5（°）/min，分別對TSA、PVP K30、TSA-PVP 物理混合物及TSA-PVP SD 進行分析，掃描結果見圖4。可見，TSA 的多個結晶特征衍射峰集中位于5～30°；PVP K30為非結晶化合物，無明顯衍射峰；物理混合物中存在TSA 結晶衍射峰，表明TSA 仍以結晶狀態存在其中；TSA-PVP SD 的衍射圖中絕大部分TSA的特征衍射峰部分或全部消失，說明TSA 以非結晶狀態分散于載體PVP K30中。

圖3 TSA-PVP SD與物理混合物的顯微觀察圖Figure 3 Micrographs of TSA-PVP SD and physical mixture(×100)

圖4 TSA-PVP SD與物理混合物的XRD圖Figure 4 XRD patterns of TSA-PVP SD and physical mixture

2.4.3 差示掃描量熱（DSC） 以空白鋁坩堝為參比物，N2為保護氣，流速設定為20 mL/min，掃描范圍設定為0～300 ℃，升溫速度控制在10 ℃/min，采用DSC 分別對TSA、PVP K30、TSA-PVP 物理混合物及TSA-PVP SD 進行分析，掃描結果見圖5。可見，TSA在214.2 ℃有一吸熱峰；PVP K30 在254.9 ℃有一吸收峰；物理混合物同時具有TSA 及PVP K30 特征吸熱峰，說明其內兩種成分僅為簡單混合，并未發生晶型改變；與物理混合物相比，TSA-PVP SD 中不存在TSA特征峰，表明TSA由晶態轉變為無定型狀態，高度均勻分散于載體PVP K30中。

2.4.4 紅外光譜研究（FTIR） 采用溴化鉀（KBr）壓片法制備樣品，掃描范圍設定為300～4 000 cm-1，分別 對TSA、PVP K30、TSA-PVP 物 理 混 合 物 及TSA-PVP SD 進行分析，結果見圖6。可見，TSA 在1 644 cm-1處有一羰基吸收峰，而在TSA-PVP SD 該吸收峰左移至1 637 cm-1，推測為TSA 中羰基與PVP K30 形成了氫鍵所致；物理混合物紅外光譜為TSA與PVP K30 的簡單疊加，且PVP K30 掩蓋了TSA 的部分官能團峰，部分TSA特征峰強度減弱。

圖5 TSA-PVP SD與物理混合物的DSC圖Figure 5 DSC curves of TSA-PVP SD and physical mixture

圖6 TSA-PVP SD與物理混合物的FIIR圖Figure 6 FTIR Spectra of TSA-PVP SD and physical mixture

3 討論

固體分散體是由至少兩種不同的組分，親水性基質和親脂性藥物組成的一組固體產物，藥物可被分散成無定形顆粒（團簇）或結晶顆粒，可改善水溶性差的藥物在藥物組合物中的溶解度，并加快溶解速度，提高藥物的生物利用度[10]。TSA 溶解度較小，溶出速率較慢，口服吸收較差，導致生物利用度較低，為了提高TSA 的體外溶出速率滿足制劑的設計要求，本研究嘗試將TSA 制成固體分散體，以增加其溶解度和溶出速率[11-12]。TSA 固體分散體制備過程中，TSA 與載體之間相互作用改變了TSA 的結晶結構，以無定形態存在，使TSA 的飽和溶解度和溶出度均提高[13]。

作為丹參活血化瘀主要有效成分之一，TSA 具有抗感染，抗菌，改善微循環，抗肝、腎、心臟纖維化疾病等多種藥理作用[14]?，F代藥理學研究發現，TSA 能夠抑制皮膚纖維化疾病的發生，可能與對人皮膚成纖維細胞具有抑制增殖和誘導凋亡的作用有關[15]。本文進行丹參酮ⅡA 固體分散體研究，以期提高藥物與皮膚和黏膜的親和力，增加藥物透皮效率。