肝素結合蛋白在腦膜炎患者中的表達及其臨床意義

劉美玲，李瑩瑩，鄭鎧軍，馮淑芳，曹建偉 （廣東中山市人民醫院普通兒科，廣東中山 528400）

腦膜炎是最為常見的感染性中樞神經系統綜合癥，兒童以急性細菌性腦膜炎和病毒性腦膜炎較為常見[1-2]。其中，急性細菌性腦膜炎是導致兒童感染相關性死亡的重要病因之一[3]，在抗生素和重癥監護干預下，患兒的病死率仍可達10%，而幸存者出現永久性神經后遺癥的概率高達30%[4]。病毒性腦膜炎和細菌性腦膜炎在急性期的臨床癥狀具有相似性，給疾病的鑒別帶來一定的困難[5]。肝素結合蛋白(HBP)又稱氮唑蛋白或陽離子抗菌蛋白，是人類中性粒細胞先天防御的一部分[6-7]。我們觀察了HBP 在細菌性和病毒性腦膜炎中的表達差異，以期為疾病的早期診斷和鑒別提供輔助依據。

1 資料和方法

1.1 一般資料

選擇我院2018 年5 月至2019 年5 月收治的急性細菌性腦膜炎患兒27 例、毒性腦膜炎患兒22 病，以及20 例需取腦脊液檢查的非腦膜炎疾病患兒作對照。細菌性腦膜炎患者中男16 例，女11 例，平均年齡(9.1±3.0)歲；病毒性腦膜炎患者男10 例，女12 例，平均年齡(8.2±2.8)歲；非腦膜炎疾病患者男10 例，女10 例，平均年齡(8.6±3.2)歲。3 組間性別、年齡差異無統計學意義(P＞0.05)。腦膜炎的診斷參照《諸福棠實用兒科學》第8 版腦膜炎診斷標準[8]。排除:(1)顱腦外傷、醫源性等因素造成的中樞神經系統感染者；(2)合并中樞神經系統腫瘤性疾病者；(3)合并免疫系統缺陷型疾病者；(4)合并血液系統疾病者；(5)入院前已經接受抗生素治療的患者；(6)隨訪期間自動要求退出的患者。本研究已通過醫學倫理委員會審查。

1.2 方法

腦膜炎患兒在入院后第1 天(抗生素治療前)收集腦脊液5 mL，外周血5 mL,常溫靜置30 min，12 000 r/min離心10 min，收集上清液，樣本于-80 ℃冰箱中保存。采用酶聯免疫吸附法對樣本中的HBP 進行定量檢測，人HBPELISA 試劑盒(#ZN2034，百奧萊博生物)檢測范圍為62.5～4 000.0 μg/L。測定步驟參照試劑盒說明書進行。

1.3 研究指標

1.3.1 HBP 的表達 比較血清和腦脊液中HBP 在各組研究對象間的水平差異，以及評估血清和腦脊液中HBP 的相關關系。

1.3.2 疾病診斷的效率評估 將血清和腦脊液中HBP 水平作為患者早期診斷的因素，繪制受試者工作特征曲線(ROC 曲線)，分析上述指標對疾病早期診斷的價值。診斷金標準為病理學診斷(腦脊液培養)。

1.4 統計學處理

2 結果

2.1 血清和腦脊液中HBP 表達水平的變化及相關性

細菌性腦膜炎患者血清、腦脊液的HBP 水平顯著高于病毒性腦膜炎和非腦膜炎患者，差異有統計學意義(P＜0.01)，見表1。細菌性腦膜炎患者血清HBP的表達與腦脊液中HBP 的表達呈正相關(r=0.468，P＜0.05)，病毒性腦膜炎患者血清HBP 的表達與腦脊液中HBP 的表達無明顯相關性(r=0.264，P＞0.05)。

表1 血清和腦脊液中HBP 的表達水平 (±s，μg/L)

表1 血清和腦脊液中HBP 的表達水平 (±s，μg/L)

與非腦膜炎疾病比較:aP＜0.01；與病毒性腦膜炎比較:bP＜0.01

2.2 HBP 對腦膜炎早期診斷和鑒別診斷的效果

血清、腦脊液HBP 用于細菌性腦膜炎早期診斷的ROC 曲線下面積分別為0.933 和0.884，切割值分別為118.13、99.89 μg/L，靈敏度分別為0.943 和0.875，特異度分別為0.797 和0.764；而用于病毒性腦膜炎早期診斷的ROC 曲線下面積分別為0.463 和0.461，診斷價值較差。見圖1。

圖1 血清、腦脊液HBP 用于腦膜炎早期診斷和鑒別的ROC 曲線

3 討論

腦膜炎是兒童常見的重癥感染性疾病，以病毒性和急性細菌性腦膜炎較為常見[9]。疾病早期臨床癥狀的相似性導致鑒別診斷困難[5]。目前，對疾病早期診斷和鑒別的輔助生化指標較多，如腦脊液乳酸、腦脊液蛋白、腦脊液葡萄糖、腦脊液白細胞、外周血降鈣素原、腺苷脫氨酶及C 反應蛋白等[10-14]，這為臨床醫師早期診斷和鑒別腦膜炎的病理類型提供了有力的幫助。

二代測序等檢驗技術的進步讓我們發現了越來越多的生化指標可用于腦膜炎的早期診斷和鑒別，HBP 就是其中的一個敏感指標。Linder 等[15]的研究指出，與非感染性危重癥患者的血HBP 水平及其他指標相比，嚴重膿毒癥和膿毒癥休克患者血HBP水平升高具有顯著的預測價值，80%的患者HBP水平升高(30 mg/L)，59%的患者降鈣素原水平升高(0.5 mg/L)，10.5 h 后發展為嚴重膿毒癥。Bentzer等[16-18]亦發現，HBP 可作為急性細菌性腦膜炎的一個預測指標，其在急性化膿性腦膜炎患兒腦脊液中的表達水平急劇升高，且作為化膿性腦膜炎診斷指標的敏感度和特異度均接近100%。我們的研究發現，HBP在急性細菌性腦膜炎中的增高水平相對病毒性腦膜炎更為顯著，與黃彩芝等[18]研究相似。Kandil 等[17]結果顯示細菌性腦膜炎患兒中HBP 升高近200 倍，但黃彩芝等[18]研究指出，化膿性腦膜炎患者HBP 增高倍數僅約10 倍。目前對這一數據差異的原因我們尚不明確，分析可能與患兒采樣時的病情程度有關。值得注意的是，雖然細菌性和病毒性腦膜炎患者的HBP水平同樣增高，但僅細菌性腦膜炎患者血清HBP 的表達與腦脊液中HBP 的表達呈正相關，而病毒性腦膜炎患者血清HBP 的表達與腦脊液中HBP 的表達無明顯相關性。因此我們認為腦脊液中HBP 的升高很可能是由炎癥瀑布引發循環白細胞的遷移所造成。本研究還發現，血清、腦脊液HBP 用于急性細菌性腦膜炎早期診斷的ROC 曲線下面積高達0.933 和0.884，而用于病毒性腦膜炎早期診斷的ROC 曲線下面積分別為0.463 和0.461，提示HBP 是細菌性腦膜炎早期診斷的良好指標，而其對病毒性腦膜炎的早期診斷意義不大。