SysmexUF-5000全自動尿液有形成分分析儀流水線性能驗證分析

曹春花，周丹

（青海省人民醫院 檢驗科，青海 西寧）

0 引言

尿液有形成分檢測是診斷泌尿生殖系統疾病及相關疾病重要實驗室依據，其檢測結果的及時準確性與臨床診斷密切相關[1-2]。SysmexUF-5000尿液有形成分分析儀的檢測原理與UF-1000i的原理一樣，是基于流式細胞檢測技術和細胞化學染色技術2種技術相結合，具有快速篩選異常標本、精密度高、偏差小等特點，是現代臨床實驗室不可缺少的儀器之一。根據ISO15189醫學實驗室認可標準的要求，本檢驗中心對所引進的SysmexUF-5000尿液有形成分分析儀進行了性能驗證驗證參數包括紅細胞（Red Blood Cell, RBC）白細胞（White Blood Cell, WBC）、上皮細胞（Epithelial cell,EC）、管型（CAST）、細菌（Bacteri Uin, BACT），現報告如下。

1 材料與方法

1.1 標本來源

2019年5～6月就診于青海省人民醫院門診患者及健康體檢者的尿液標本。

1.2 儀器和試劑

Sysmex公司UF-5000尿液有形成分分析儀及配套試劑、質控品和校準品。所用試劑、質控品、校準品均為該公司配套產品。試劑在有效日期內，每日室內質控均在控。

1.3 方法

1.3.1 精密度驗證

（1）批 內 精 密 度：各 參 數（WBC、RBC、EC、CAST、BACT）均選擇高值和低值2個濃度，收集新鮮尿液樣本12份，充分混勻后連續做20次測定，計算平均值（），標準差（s）和變異系數（CV）。所有測定在2 h內完成。參照EP15A方 案，結 果 需 符 合1/4TEa CLIA’88要 求：RBC＜10.0%、WBC＜10.0%、EC＜30.0%、CAST＜40.0%、BACT＜20.0%。

（2）批間精密度：采用原裝定值高、低值質控品，按照說明書要求混勻測定，每日測定1次，連續測定20次，計算平均值（），標準差（s）和變異系數（CV）。

1.3.2 線性范圍

取富含對應項目的高值尿樣5份（紅細胞、白細胞、細菌數在10000/μL左右，EC在200/μL左右，CAST在30 μL左右）以鞘液做1:2，1:4，1:16，1:64，1:256……的系列等比稀釋，每個稀釋度測定3次，取均值作為測定值。以理論值為橫坐標，實際檢測值為縱坐標，進行相關和回歸分析，計算回歸方程（y=ax+b）和相關系數（r）。要求：a值在（1.00±0.05），相關系數r≥0.975。

1.3.3 攜帶污染率驗證

先對3份高值尿液標本（建議RBC和WBC＞5000/μL、EC＞100/μL、CAST＞20/μL、BACT＞5000/μL）混 勻 后 連續檢測3次（H1、H2、H3）；然后立即對接近預期3份低值尿液 樣 本（建 議RBC和WBC＜20/μL、EC＜5/μL、CAST＜2/μL、BACT＜100/μL）混勻連續檢測3次（L1、L2、L3），按照以下公式計算：攜帶污染率=（L1-L3）/（H3-L3）×100%。要求：RBC、WBC、EC、CAST、BACT攜帶污染率≤0.05%。

2 結果

2.1 批內、批間精密度

5個定量參數批內、批間精密度高、低值的CV均在標準CV的范圍內，具體見表1和表2。

2.2 線性范圍

5個定量參數回歸方程和線性范圍與廠商給定范圍較一致，具體見表3。

3 討論

尿液有形成分分析儀通過對尿液中有形成分計數和形態學分析，可提供紅細胞、白細胞、上皮細胞、管型、細菌等定量結果，還可以對某些異常成分進行提示性報告[3-4]。目前國內大多數實驗室使用的尿液有形成分分析儀主要有兩種，一種是基于流式細胞核酸熒光染色技術的尿沉渣儀，比如SysmexUF系列，另一種是基于數字成像自動識別的分析儀。本實驗室使用的就是前者，SysmexUF系列生產的UF5000全自動尿液分析系統，它可用藍色半導體激光束照射經過核酸熒光染色后在鞘流貫流分析池中形成的鞘流樣本，并通過對從各粒子產生的前方散射光、側向散射光、消偏振的側向散射光以及側向螢光信號轉換成的光電信號進行分析，從而對各個粒子進行識別[5-6]。根據從細胞中染色元素發出的熒光可基于熒光標記抗體和熒光顏料的屬性對細胞表面、胞漿屬性和細胞核（RNA和DNA數量）等細胞特性進行定量測定?；诹魇郊毎麅x原理，全自動尿有形成份分析儀UF-5000可將尿液中的粒子分離為RBC（紅細胞）、WBC（白細胞）、EC（上皮細胞）、Squa.EC（上皮細胞）、CAST（管型）和 BACT（細菌）等，并予以定量標示。尿液有形成分分析儀的廣泛使用有效地減少了鏡檢，提高了工作效率，也因此對于分析儀的性能有了更高的要求[7-8]。每個實驗室都應建立一套規范且適合的驗證方案對儀器性能進行驗證及評估，以保證儀器檢測結果的準確性及可靠性。

表1 批內精密度

表2 批間精密度

表3 UF-5000各參數線性范圍檢測結果

此次驗證的結果表明，RBC、WBC、EC、CAST、BACT各項參數均在生物參考區間內，該生物參考區間可直接使用。由于衛生部和省級室間質量評價項目只有干化學檢測項目而沒有尿液有形成分定量的檢測，因此通過測定廠家配套的定值質控品獲得RBC、WBC、EC、CAST、BACT的偏倚程度。結果顯示，5項定量指標的相對偏差偏倚程度均在廠家所要求范圍內，由此可見，UF5000尿液有形成分分析儀具有良好的重復性、精密度較好，攜帶污染率較低、線性范圍較寬、準確度較高、結果具有可比性等特點，是一臺性能優良的全自動尿沉渣分析儀，可用于臨床尿液有形成分的定量分析。UF5000新增加的消偏振側向散射光（Depolarized Side Scatter Light），能捕捉具有雙折射性的結晶等，以更高的精度分離紅細胞和結晶，可以減少結晶對細胞計數的干擾作用。尿液標本成分多樣，黏液絲、膿細團胞、細菌等對管型成分容易產生干擾，易出現假陽性[9-10]。所以對儀器篩查結果結晶、管型、真菌等為陽性的標本，應采用離心尿顯微鏡檢法或尿沉渣定量計數板法進行人工確認，陽性結果以鏡檢結果為準。減少假陽性率和假陰性率。合理的使用該儀器，充分發揮尿液有形成分在臨床診斷中的作用。