聯(lián)合檢測波形蛋白、抑制素A在卵巢癌診斷中的應(yīng)用

王博，范瑞，吳光峰

（南陽市第一人民醫(yī)院病理科，河南南陽 473000）

卵巢癌作為臨床女性生殖器官常見的惡性腫瘤，具有較高的發(fā)病率及病死率。卵巢癌的病因尚未完全明確，多認為與遺傳、內(nèi)分泌等因素有關(guān)，該病可導(dǎo)致患者出現(xiàn)腹脹、腹痛、腹腔積液等臨床癥狀，嚴重威脅患者的生命健康［1］。由于該病早期無明顯癥狀表現(xiàn)，且針對疾病早期的檢測方法不完善，約有70%左右的患者在確診時病情發(fā)展至疾病晚期［2］。因此，尋找一種有效的生物標記物對提高卵巢癌的診斷效能具有重要意義。有研究顯示，上皮間質(zhì)化（EMT）在腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移過程中起到關(guān)鍵作用，而波形蛋白（vimentin）則通過EMT 參與腫瘤病灶的發(fā)生及發(fā)展［3］。抑制素A（INH-A）被證實在卵巢癌的早期呈高表達，且其在大部分卵巢上皮性癌中水平會呈上升趨勢［4］。鑒于此，本探究將探討聯(lián)合檢測vimentin、INH-A 在卵巢癌診斷中的價值，以為臨床制定診療方案提供依據(jù)，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本研究上報南陽市第一人民醫(yī)院并經(jīng)醫(yī)學(xué)倫理委員會審批通過，選擇2018 年4 月至2019 年4月收治的卵巢癌高度疑似患者82 例，年齡35～79歲，平均（54.62±5.38）歲；體重18～26 kg/m2，平均（20.43±2.32）kg/m2。排除標準：①排除合并自身免疫疾病者；②合并心、肝、腎等臟器官障礙者；③合并其他惡性腫瘤疾病患者。

1.2 檢測方法

vimentin、INH-A 均采用免疫組織化學(xué)法檢測，取患者手術(shù)切除組織進行石蠟包埋，切片厚度為4 μm，經(jīng)脫蠟處理后采用梯度乙醇進行水化處理，采用3%過氧化氫（H2O2）進行滅活內(nèi)源性氧化酶，經(jīng)微波抗原后清洗。待清洗完成后，閉封處理10 min，滴加第一抗體并進行12 h 的孵育，溫度維持4℃。采用生物素標記的第二抗體及辣根過氧化物酶標記鏈酶卵白素進行孵育20 min，溫度維持4℃。孵育后進行洗滌處理并滴加氧化二氨基聯(lián)苯胺（DAB）顯色液進行染色5 min；沖洗后，使用蘇木精進行復(fù)染、脫水、封片處理于顯微鏡下進行觀察。

1.3 結(jié)果判定

vimentin、INH-A 陽性判斷：統(tǒng)計陽性染色細胞數(shù)量，根據(jù)染色強度及陽性細胞占比進行評分。①染色強度。其中棕褐色記3 分，棕黃色記2 分，淡黃色記1 分，無色記0 分；②陽性細胞占比。其中陽性細胞占比＞75% 記4 分，51%≤陽性細胞占比≤75 記3 分，26≤陽性細胞占比≤50%記2 分，5%≤陽性細胞占比≤25% 記1 分，陽性細胞占比＜5%記0 分。將上述兩項結(jié)果進行相乘，結(jié)果≤3 分則為陰性，結(jié)果＞3 分則為陽性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

應(yīng)用SPSS 22.0 統(tǒng)計學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)。計數(shù)資料以百分率（%）表示，用χ2檢驗，若期望值＜5，采用連續(xù)校正檢驗；將術(shù)后病理組織病理檢驗結(jié)果作為“金標準”，計算vimentin、INH-A 及兩者聯(lián)合診斷卵巢癌的效能；采用一致性Kappa 檢驗，以K 值評價各指標單獨及聯(lián)合診斷與金標準的一致性（K 值≥0.74 提示一致性好，K 值范圍為0.4～＜0.74 提示一致性一般，K 值＜0.4 提示一致性差）。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 病理診斷結(jié)果

82 例患者均經(jīng)臨床病理診斷檢查，其中確診卵巢癌39 例（47.56%）；卵巢良性病變43 例（52.44%），其中粘液性囊腺瘤7 例（16.28%），漿液性囊腺瘤10 例（23.26%），纖維瘤12 例（27.91%），纖維上皮瘤14 例（32.56%）。

2.2 vimentin 診斷結(jié)果

82 例患者經(jīng)vimentin 檢查，陽性為38 例（46.34%），陰性為（53.66%）。vimentin 診斷卵巢癌與金標準一致性為0.192，一致性較差。見表1。

2.3 INH-A 診斷結(jié)果

82 例患者經(jīng)INH-A 檢查，陽性為39 例（47.56%），陰性為43 例（52.44%）。INH-A 診斷卵巢癌與金標準一致性為0.221，一致性較差。見表2。

2.4 聯(lián)合診斷結(jié)果

82 例患者經(jīng)INH-A 檢查，陽性為43 例（50.00%），陰性為（50.00%）。聯(lián)合診斷卵巢癌與金標準一致性為0.805，一致性好。見表3。

表1 vimentin 診斷結(jié)果（例）

表2 INH-A 診斷結(jié)果（例）

表3 聯(lián)合診斷結(jié)果（例）

2.5 vimentin、INH-A 及兩者聯(lián)合診斷卵巢癌效能比較

聯(lián)合檢測時，規(guī)定其中任何一項檢測方法為惡性時即判定聯(lián)合診斷為惡性。vimentin 與INH-A診斷特異度、陽性預(yù)測值及陰性預(yù)測值比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；3 種診斷方法中，以聯(lián)合診斷敏感度及準確度最高，INH-A 次之，vimentin 最低，3 種檢測方法比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。見表4。

表4 vimentin、INH-A 及兩者聯(lián)合診斷乳腺癌效能比較（%）

3 討論

卵巢癌在早期多無明顯癥狀表現(xiàn)，極易引起患者的忽視，且在臨床早期診斷過程中易出現(xiàn)漏診、誤診情況［5］。大部分患者在確診時多已至晚期，由于腫瘤細胞生物學(xué)特征表現(xiàn)復(fù)雜且多樣，導(dǎo)致單一腫瘤標志物的診斷敏感度及準確度較低，不利于臨床早期疾病的診斷［6］。故尋找多種腫瘤標志物或采用聯(lián)合檢測對早期卵巢癌的診斷具有重要意義。

vimentin 作為中間纖維蛋白質(zhì)的一種，其主要作用是維持細胞骨架的完整性。相關(guān)研究表明，其能夠通過蛋白激酶C 及生長因子通路與細胞漿中的整合素與Ⅰ類膜型基質(zhì)金屬蛋白酶相結(jié)合，參與腫瘤細胞中黏附與遷移的過程［7］。其在肝癌、乳腺癌等多種腫瘤中呈高表達，其與卵巢癌的臨床分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等均密切相關(guān)［8］。INH-A 作為女性卵巢顆粒細胞的異二聚體蛋白質(zhì)激素，其對卵泡刺激素的分泌具有選擇抑制作用［9］。有研究發(fā)現(xiàn)，抑制素及激活素與卵巢甾體激素及下丘腦促性腺激素維持垂體功能的正常運行，而當(dāng)上述指標出現(xiàn)異常時則會影響性腺激素的合成、釋放，導(dǎo)致卵巢上皮細胞發(fā)生異常的增殖轉(zhuǎn)化，導(dǎo)致卵巢癌的發(fā)病率提高［10-11］。本探究結(jié)果顯示，vimentin、INH-A 的陽性表達率分別為46.34%、47.56%，診斷特異度、陽性預(yù)測值及陰性預(yù)測值比較無顯著差異，提示vimentin、INH-A 可以作為卵巢診斷的相關(guān)標志物，但單一診斷效能較低。結(jié)果還顯示，3 種診斷方法中，以聯(lián)合診斷敏感度及準確度最高分別為94.87%、92.68%，而INH-A次之，vimentin 最低。結(jié)果提示聯(lián)合診斷能夠明顯提高卵巢癌的診斷效能，與寇建芳等［12］的研究一致。

綜上所述，聯(lián)合檢測vimentin、INH-A 能夠明顯提高卵巢癌的診斷效能，可為臨床早期診斷卵巢癌提供較為準確的參考依據(jù)。