雅培Architect i2000與羅氏Cobas e602檢測乙肝血清標志物的結果差異分析

錢紅，朱美芹，陳衛偉，劉東聲

（1.南京鼓樓醫院集團宿遷市人民醫院檢驗科，江蘇 宿遷223800；2.徐州市兒童醫院檢驗科，江蘇 徐州221000）

乙型病毒性肝炎是我國常見的傳染病之一，約有9 000多萬乙肝攜帶者，約3 000萬為慢性乙型肝炎患者[1]。目前，乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）感染引起的慢性乙型肝炎仍是我國肝細胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）的主要原因，HCC占我國肝癌總數高達80%以上[2-3]。臨床上判斷是否感染乙型肝炎病毒最簡單有效的方式是進行乙肝血清標志物的檢查，因此，準確檢測乙肝血清標志物對診斷乙型肝炎尤為重要。近年來，化學發光法在臨床應用廣泛，其較膠體金法、酶聯免疫分析法（ELISA）具有簡便、高效、靈敏、準確等優勢[4-5]。現選用雅培Architect i2000與羅氏Cobas e602兩臺儀器對105例臨床樣本進行乙肝血清標志物檢測，分析檢測結果，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料選取2019年2月至2020年1月在本院就診的患者中用雅培Architect i2000檢測乙肝血清標志物，篩選HBsAg≥0.05 IU/mL的樣本105例。其中，男69例，女36例；年齡20～80歲，平均年齡39歲。

1.2 方法抽取患者靜脈血液5 mL送至檢驗科，當天分離血，清后用雅培Architect i2000檢測乙肝血清標志物。同時收集該類患者血清樣本，置于-80℃冰箱保存，再用羅氏Cobas e602進行檢測。整個操作過程嚴格按照SOP進行，由免疫室專業人員操作，在兩臺儀器正常運行的情況下，采用相應儀器配套質控及北京康徹斯坦公司生產的第三方質控品進行室內質控，且當天室內質控在控，檢測完成后記錄結果。

1.3 觀察指標比較兩種不同方法檢測乙肝血清標志物（HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb）的陰陽性符合率。生物參考區間：①雅培Architect i2000，HBsAg＜0.05 IU/mL、HBsAb＜10 IU/L、HBeAg＜1 S/CO、HBeAb＞1 S/CO、HBcAb＜1 S/CO；②羅氏Cobas e602，HBsAg＜0.05 IU/mL、HBsAb＜10 IU/L、HBeAg＜1 COI、HBeAb＞1 COI、HBcAb＞1 COI。該生物參考區間均來自各廠家配套試劑的原版說明書，檢測結果用陰性和陽性表示，在參考區間內判定為陰性，超出參考區間則判定為陽性。

1.4 統計學方法采用SPSS 22統計學軟件進行數據分析，將雅培Architect i2000檢測的HBsAg定量結果記為Xn，羅氏Cobas e602檢測的相應結果記為Yn，進行線性方程、相關性分析及圖表制作。

2 結果

2.1 兩種方法檢測結果模式分析雅培Architect i2000與羅氏Cobas e602檢測檢測結果的模式分析詳見表1。

表1 兩種方法檢測結果模式分析

2.2 兩臺儀器檢測各標志物的陰陽性符合率比較兩臺儀器檢測HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb的陰陽性符合率分別為100.0%、88.6%、94.3%、96.2%、100.0%，見表2。

表2 兩臺儀器檢測各標志物的陰陽性符合率比較

2.3 兩臺儀器檢測HBsAg定量結果直線相關和回歸分析雅培Architect i2000與羅氏Cobas e602檢測HBsAg的定量結果進行回歸分析，發現其具有較好的相關性，HBsAg的直線回歸方程為Y=1.1163X-29.181，決定系數r2=0.9137。

3 討論

乙型病毒性肝炎是由乙型肝炎病毒引起的以肝臟病變為主要表現的一種傳染病，起病慢，傳播途徑廣泛，包括母嬰傳播、性傳播、密切接觸傳播、輸血傳播等，廣泛流行于世界各國，已成為全球性共同面臨的傳染性疾病之一。乙型肝炎病毒屬于嗜肝DNA病毒科，耐熱、耐低溫、耐紫外線，該病毒侵入機體后，通過相關受體粘附于肝細胞表面，而后通過內吞作用進入肝細胞進行復制繁殖，這一過程導致機體產生的免疫應答，會引發大面積肝細胞的損傷或壞死，導致重癥肝炎；而免疫力低下者則無法有效清除病毒，使感染遷延不愈而慢性化，若治療不及時甚至會惡化為肝癌。病毒基因組（rcDNA）在細胞核內可能通過細胞的DNA復制機制轉化成共價閉合環狀DNA（cccDNA），cccDNA有高度的穩定性，在細胞核內可維持數月至數年，提高了治療難度，甚至導致治療后的反彈。我國盡管實施了以預防為主的綜合性防控策略并取得了顯著成效，但仍是世界上乙型病毒性肝炎最嚴重的國家[6]。因此，定量監測患者乙肝血清標志物，可為臨床制定治療方案提供有效依據，同時，對乙肝患者的療效監測及預后判斷等方面也有重要的意義。

雅培和羅氏兩家公司生產的化學發光分析儀，均可用于檢測乙肝病毒血清標志物，同時，對HBsAg和HBsAb均可達到定量檢測的目的，但在其檢測原理和試劑等方面存在一定的差異。雅培Architect i2000采用的是建立在微粒子捕捉免疫發光技術上的微粒子酶免疫分析法，主要用于檢測大分子物質，如病毒抗原、蛋白質等。由于檢測過程中所使用的微粒子直徑小（0.5μm），從而增大了接觸面積，提高了檢測的靈敏度。此外，微粒子的比重與水相仿，親水性較好，且其與玻璃纖維間的結合不可逆，這極大提高了檢測的特異性。

羅氏Cobas e602是采用生物素-鏈霉親和素放大技術、電化學發光技術，以磁性微粒為固相載體，用三聯吡啶釕標記抗原或抗體，三丙胺為電子供體，而設計的一種自動分析儀。三聯吡啶釕可產生穩定、高效的連續發光，且在反應過程中可循環利用，使發光得以增強和穩定。生物素-鏈霉親和素多級放大技術及發光信號檢測的寬線性，在待測抗原（抗體）極微量或達到病理期極限時，均能準確測定。

HBsAg是乙肝血清標志物中最重要的指標之一，提示有完整的病毒顆粒存在，能直接反映患者是否存在乙肝病毒感染。在乙肝的血清標志物中，HBsAg定量檢測一直受到臨床的重視。HBsAg水平與病毒復制和疾病的進展有較高的相關性，在一定程度上能反映疾病的自然進程。HBsAg水平的高低在抗病毒治療應答方面有重要的指導意義，在臨床診療中已達成共識[7-9]。本研究中兩臺儀器檢測HBsAg均采用雙抗原夾心法，均為定量結果，報告單位為IU/mL，但線性范圍存在差異。105例用雅培Architect i2000檢測HBsAg為陽性的樣本，用羅氏Cobas e602檢測也同樣為陽性。定量分析決定系數r2=0.9137,相關性分析顯示兩臺儀器檢測HBsAg的符合程度較好。提示，在臨床治療中，兩種儀器對于HBsAg定量的檢測有相同的參考價值。

HBsAb是體內對乙肝病毒的免疫和保護性抗體，提示人體對乙肝已有抵抗力。乙型肝炎經過治療如能完全消除病毒，則HBsAg會逐漸降低直至消失，血清中逐漸產生HBsAb。本研究中，兩臺儀器檢測HBsAg均為陽性，若HBsAb同時陽性，則為HBsAg、HBsAb雙陽性的樣本，可能由于HBV發生基因突變導致，發生率為2.30%～4.18%[10-13]。本研究中，雅培Architect i2000檢出HBsAg、HBsAb雙陽性的樣本2例，占1.90%；而羅氏Cobas e602檢出12例，占11.4%，相對較高，與楊平等[13]報道不一致符。原因可能為由于抗體的多樣性，導致HBsAb的測定值可根據檢測方法的不同而改變，可相差4～10倍。

HBeAg是急性感染的早期標志，代表體內病毒復制活躍。HBeAb為機體受HBeAg刺激而產生的抗體，陽性說明病毒復制減少，傳染性減弱。HBeAg/HBeAb的血清學轉換對病情轉歸和療效判斷有參考作用。而HBcAb則是乙肝病毒急性感染早期或既往感染指標。本研究結果顯示，2臺儀器檢測HBeAg、HBeAb和HBcAb符合率分別為94.3%，96.2%，100%，均較高。

綜上所述，不同發光儀器檢測乙肝血清標志物時，結果可能存在差異，雅培Architect i2000與羅氏Cobas e602定量檢測HBsAg的符合度較高，在臨床診療中可有相同的參考價值。此外，乙肝患者在就診過程中，臨床醫生如發現不同檢測機構報告乙肝模式不相符，應考慮是否是由于不同儀器和方法檢測造成，患者也應盡量在同一機構用相同方法檢測乙肝血清標志物，更有利于療效觀察。