氣相色譜－質譜聯用技術分析制痂酊中揮發性成分

陸靜金，夏泉，2

級實驗室，安徽合肥230022

制痂酊為安徽醫科大學附屬醫院制劑，由黃柏、黃芩、兒茶和冰片四味中藥，經乙醇浸提制成的中藥復方酊劑，具有清熱燥濕、斂瘡、收斂止痛、抗菌等之功效。臨床用于Ⅰ度、Ⅱ度燒傷、燙傷等，使創面形成藥痂，保持干燥，防止細菌污染和焦痂溶解，其臨床效果確切而收錄入安徽省醫院制劑規范。該院內制劑的前期研究主要集中在以主成分龍腦和異龍腦的質量控制上，此復方中黃柏、黃芩和兒茶也含有揮發性成分。關于這些中藥材的揮發性成分已有一些報道，但各中藥材在制痂酊中組方后其揮發性成分的研究卻鮮見報道。故本研究自2019年3-9月采用GC–MS方法分析制痂酊中揮發性成分的組成，并用面積歸一化法計算各成分的相對百分含量，為其質量控制提供充分依據。

1 儀器與材料

1.1 儀器 美國Agilent Technologies公司HP6890GC/5973MS氣相色譜－質譜聯用儀。

1.2 材料 制痂酊（批次180625）由安徽醫科大學附屬醫院制劑室提供；環己烷等試劑均為分析純。

2 實驗方法與結果

2.1 揮發油的制備 制痂酊搖勻，精密量取4 mL于10 mL容量瓶，加入環己烷定容至10 mL，充分混勻后放置，待分層后取上層環己烷液，即得供試樣品。

2.2 GC條件 色譜柱：石英毛細管柱HP-5MS（30 mm×0.25 mm×0.25μm）；柱溫：起始溫度為40℃，程序升溫，升溫速率3℃/min，升溫至80℃，再5℃/min的升溫速率，升溫至280℃，保持20 min；柱流量為1.0 mL/min；進樣口溫度250℃；柱前壓100 kPa；分流比為5∶1；載氣為高純He；進樣量2μL。

2.3 MS條件 采用EI電離模式；電子轟擊能量為70 eV；接口溫度250℃；離子源溫度230℃；四極桿溫度150℃；質量掃描范圍m/z 35～500 amU；采用wiley7n.1和NIST98.L標準譜庫進行計算機檢索定性。

2.4 實驗結果 按照2.2色譜實驗條件進行分析測定，得到揮發性成分的總離子流的色圖譜，對總離子流圖中的各峰一級質譜圖經計算機檢索以并結合wiley7n.1和NIST98.L標準譜庫數據系統進行匹配，同時查閱文獻數據鑒定，采用峰面積歸一化法得到各揮發性成分的相對百分含量，結果見表1。

表1 制痂酊揮發性成分的主要成分鑒定結果

從制痂酊中共得到17個峰，鑒定出13種化合物，占其揮發性成分總量的99.59%。制痂酊中揮發性成分由單帖類、酸類、酯類組成，主要成分為龍腦（55.18%）、異龍腦（40.99%）、1，3，3-三甲基-二環［2.2.1］庚烷-2-醇（1.01%）和外型-1，7，7-三甲基-二環［2.2.1］庚-2-醇（1.01%）。其中，龍腦和異龍腦的相對百分含量之和達到96.17%。

3 討論

本研究采用GC-MS法對制痂酊的揮發性成分進行測定，研究結果表明制痂酊主要的揮發性成分為異龍腦和龍腦。異龍腦和龍腦是組方冰片（合成龍腦）的主要成分，而天然冰片主要含右旋龍腦。由于資源的限制，天然冰片（右旋龍腦）現較少使用。GC–MS靈敏，操作簡便，可以有效區分冰片（合成龍腦）與天然冰片（右旋龍腦）。傳統中醫認為冰片有開竅醒神、清熱止痛、生肌之效，現代醫學研究表明冰片有抗炎鎮痛、抗菌等功效。這與制痂酊臨床治療燒傷、燙傷的功效密切相關。

通過文獻檢索分析，雷華平等采用超臨界二氧化碳萃取合并GC-MS聯用技術對川黃柏中揮發性成分進行分析，鑒定其含有庚醇、棕櫚酸和十八烯酸甲酯；黃芩揮發性成分的GC-MS分析結果表明黃芩中檢測出庚酮、棕櫚酸和（Z，Z）-9，12-十八碳二烯酸等成分。可推測本實驗中編號2、3、9、10、11及13可能是制痂酊中黃柏的揮發性成分。而編號4、10、11和12則可能為制痂酊中黃芩的成分。但關于兒茶揮發油成分的相關文獻報道較少，故實驗結果中莰烯、外甲基茨尼醇并不能確定是否為兒茶揮發性成分或是制劑產物，有待進一步的實驗驗證。