大黃素對重癥急性胰腺炎大鼠肺損傷的保護作用及對MAPK通路的影響

新鄉醫學院第三附屬醫院 河南，新鄉 450003

急性胰腺炎（acute pancreatitis，AP）是臨床上病情兇險、并發癥多、病死率高的急腹癥，臨床表現為腹痛、嘔吐、發熱以及淀粉酶和脂肪酶升高，約有20%的患者由于病情較重而發展為重癥急性胰腺炎（severe acute pancreatitis，SAP）[1]。SAP可導致胰腺及其周圍組織壞死，這種壞死和炎癥反應可能涉及到遠端器官，導致多器官衰竭[2]。急性肺損傷是SAP患者死亡的重要原因，可進一步發展為急性呼吸窘迫綜合征（acute respiratory distress syndrome，ARDS），而ARDS是SAP最嚴重的肺部并發癥[3]。有研究顯示，絲裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase，MAPK） 信號通路參與多種原因誘導的肺損傷，抑制MAPK信號通路的活化則可緩解肺組織病理性損傷，抑制炎癥反應，減少細胞凋亡[4-5]。大黃是我國傳統中藥材，具有清熱瀉火、涼血解毒、利濕退黃的作用，與其他藥物配伍可用于治療Ap、急性膽囊炎、急性腸梗阻等急腹癥[6-7]。大黃素（Emodin）是大黃的主要有效成分，研究證明大黃素可顯著減輕AP模型大鼠胰腺組織損傷，降低血清淀粉酶和脂肪酶的水平，是治療SAP的有效天然產物[8]，但目前大黃素在SAP合并肺損傷中的作用研究較少，其機制尚不清楚。本研究通過建立SAP肺損傷大鼠模型，以MAPK信號通路為切入點，觀察大黃素對SAP大鼠肺損傷的影響并初步探究其機制，為AP及其并發癥的藥物治療提供理論依據。

1 材料和方法

1.1 實驗動物 無特定病原體（specific pathogen free，SPF）級SD大鼠80只，雌雄各半，6周齡，體質量180～220g，購于北京維通利華實驗動物技術有限公司[實驗動物生產許可證號碼：SCXK（京）2017-0011]，飼養于河南省實驗動物中心實驗室獨立動物房[實驗動物使用許可證號碼：SYXK（豫）2016-0002]。飼養條件：室溫（22±2）℃，濕度（50±10）%，每天定時換氣，保持12h:12h光暗照明，食水不限。研究方案獲本院倫理委員會批準。

1.2 藥品與試劑 大黃素購于上海一基實業有限公司（純度＞98%，批號：518-82-1）；牛黃膽酸鈉、蘇木精-伊紅（hematoxylin-eosin，HE）染色試劑盒、中性樹膠、羧甲基纖維素鈉（carboxymethylcellulose sodium，CMC-Na）均購于北京索萊寶科技有限公司（批號：T8510、G1121、G8590、IS9000）；脂肪酶、淀粉酶、腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、白細胞介素-6（interleukin-6，IL-6）酶聯免疫吸附檢測（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）試劑盒均購于武漢伊萊瑞特生物科技有限公司（批號：EEL-M2448c、E-EL-R2545c、E-EL-R2856c、E-ELR0015c）；超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、丙二醛（malondialdehyde，MDA）檢測試劑盒均購于南京建成生物工程研究所有限公司（批號：A001-3-2、A003-1-2）；B淋巴細胞瘤-2基因（B-cell lymphoma-2，Bcl-2）、Bcl-2相關X蛋白（Bcl-2-associated X protein gene，Bax）、磷酸化p38絲裂酶原激活蛋白激酶 （phosphorylated p38 mitogen-activated protein kinase，p-p38 MAPK）、磷酸化細胞外信號調節激酶（phosphorylated extracellular signal-regulated kinase 1/2，p-ERK1/2）、磷酸化c-Jun氨基末端激酶（phosphorylated c-Jun N-terminal kinase，p-JNK） 兔源單克隆抗體均購于美國CST公司 （批號：3498、5023、4511、4370、4668）；羊抗兔二抗購于達文生物有限公司（批號：DW-GAR007）；RevertAidTMFirst Strand cDNA Synthesis Kit購于美國Thermo Scientific公司 （批號：K1622）；蛋白定量試劑盒購于武漢博士德生物工程有限公司（批號：AR0146）。

1.3 儀器 GEM Premier 3000血氣分析儀購于Instrumentation Laboratory Company公司；DW-86L626超低溫冰箱為海爾集團產品；IX53顯微鏡購于日本奧林巴斯公司；G:BOX多功能凝膠成像系統購于Syngene公司；Multiskan MK3酶標儀購于Thermo Fisher Scientific公司；TGL16MB高速冷凍離心機為長沙湘智離心機儀器有限公司產品。

1.4 方法

1.4.1 分組與造模 將80只SD大鼠隨機分為對照組、模型組、大黃素高劑量組和大黃素低劑量組，每組20只。除對照組外，其余組大鼠均使用?；敲撗跄懰徕c建立SAP大鼠模型[9]。造模方法：大鼠提前12h禁食，腹腔注射10%水合氯醛麻醉，麻醉劑量為0.3mL·100g-1，仰臥位固定，腹部備皮、消毒，沿腹中線打開腹腔，暴露胰腺，找到十二指腸乳頭，在十二指腸乳頭旁用26G留置針穿破腸壁，進入胰管，微血管鉗夾閉肝門處胰管，以0.1mL·min-1的速度泵入3.5%?；敲撗跄懰徕c，劑量為0.1mL·100g-1，2min后取下微血管鉗。觀察大鼠胰腺組織變化，如胰腺出現充血、水腫、點狀出血、皂化斑和壞死等現象則說明造模成功，隨后將胰腺復位，縫合腹部。對照組大鼠僅開腹，適當翻動胰腺后關腹。模型組、大黃素高、低劑量組均造模成功，造模完成后無大鼠死亡。

1.4.2 給藥方法 于造模完成大鼠蘇醒后的1h及6h給藥。根據預實驗結果，大黃素高、低劑量組大鼠分別以60mg·kg-1、30mg·kg-1大黃素（臨用前用0.5% CMC-Na混合均勻）灌胃，給藥體積為1mL·100g-1，對照組和模型組大鼠灌服等量0.5% CMC-Na。

1.4.3 血清脂肪酶、淀粉酶、TNF-α、IL-6含量檢測 造模12h后大鼠腹主動脈穿刺取血，4℃靜置2h，3 000r·min-1離心10min，離心半徑為12.5cm，分離血清檢測大鼠血清脂肪酶、淀粉酶、TNF-α、IL-6的含量，操作按照試劑盒說明進行。

1.4.4 氧分壓（partial pressure of oxygen，PaO2）、二氧化碳分壓（partial pressure of carbon dioxide，Pa-CO2）、氧合指數（oxygenation index，OI）、肺組織濕干重比（wet-to-dry weight ratio，W/D）檢測 大鼠腹主動脈取血3mL，采用血氣分析儀檢測PaO2、PaCO2，并計算OI。OI=PaO2/FiO2，FiO2即吸氧濃度，未吸氧情況下FiO2值為空氣中氧濃度0.21。隨后分離各組大鼠右上肺葉用于W/D檢測，其余肺葉一部分以4%多聚甲醛固定用于HE染色，另一部分-80℃凍存用于ELISA、實時熒光定量聚合酶鏈式反應（Real-time quantitative polymerase chain reaction，RT-qPCR）和Western blot。以吸水紙擦干肺組織表面水分后稱重，記錄為濕重（wet weight，W），隨后將肺組織放入80℃恒溫干燥箱中烘干，24h后稱重，記錄為干重（dry weight，D），并計算W/D。

1.4.5 HE染色觀察肺組織病理變化 取各組大鼠肺組織，以4%多聚甲醛固定48h，蒸餾水洗滌，梯度乙醇脫水，制作組織蠟塊，冰上預冷4μm切片，二甲苯脫蠟30min，梯度乙醇復水，使用蘇木精和伊紅染液分別染細胞核和細胞質，脫水、透明后中性樹膠封片，鏡下觀察各組大鼠肺組織病理變化。

1.4.6 肺組織SOD活力、MDA含量檢測 取適量大鼠肺組織，加入預冷的磷酸鹽緩沖溶液（phosphate buffer saline，PBS），冰上研磨勻漿，10 000r·min-1離心10min后取上清液，離心半徑為12.5cm，EP管分裝，-80℃保存。按照試劑盒說明書步驟測定肺組織SOD活力和MDA含量。

1.4.7 RT-qPCR檢測肺組織Bcl-2、Bax mRNA表達 稱取0.1g大鼠肺組織，冰上研磨，加1mL Trizol裂解液提取組織總RNA，使用RevertAidTMFirst Strand cDNA Synthesis Kit逆轉錄試劑盒合成cDNA，作為熒光定量模版。引物由日本Takara公司設計合成，所有樣品均以甘油醛-3-磷酸脫氫酶（glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase，GAPDH）為內參。反應體系：dNTPs 0.5μL，5×Buffer5μL，Taq酶0.3μL，MgCl21.5μL，cDNA模板2μL，上下游引物分別為1μL，加去離子水至總體積25μL。反應條件：95℃預變性5min，95℃變性30s，62℃退火30s，72℃延伸30s，重復40個循環，最后72℃延伸10min，4℃ 5min終止反應。反應完成后，從PCR儀導出并確認各基因擴增曲線和熔解曲線。實驗重復3次，采用2-△△CT的方法計算目的基因mRNA相對表達水平。引物序列見表1。

表1 引物序列Tab.1 Primer sequences

1.4.8 Western blot檢測肺組織Bcl-2、Bax、p-p38 MAPK、p-ERK1/2、p-JNK蛋白表達 稱取0.1g大鼠肺組織，研磨后離心取沉淀，加入裂解液提取肺組織蛋白，二喹啉甲酸（bicinchoninic acid，BCA）蛋白定量試劑盒測定蛋白濃度，配置15%的分離膠和5%的濃縮膠進行十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳（sodium dodecylsulfate-polyacrylamide gelelectrophoresis，SDS-PAGE），上樣后80V電泳2h，60V轉膜2h，5%脫脂奶粉封閉2h，隨后將膜放入10mL Bcl-2、Bax、p38 MAPK、p-p38 MAPK、ERK1/2、p-ERK1/2、JNK、p-JNK兔源一抗稀釋液中，稀釋比例均為1:1 000，4℃孵 育12h。次日以Tris-Tween緩沖鹽溶液（Tris buffered saline tween，TBST）洗滌3次，每次10min，然后加入羊抗兔二抗（稀釋比例1:2 000）中，37℃孵育2h，TBST清洗3次后滴加電化學發光液，反應1min后置于凝膠成像系統顯影。以GAPDH為內參蛋白，采用Image J軟件分析各條帶灰度值，計算蛋白的相對表達量，蛋白相對表達量=目的蛋白灰度值/內參蛋白灰度值。

1.5 統計學分析 采用SPSS 25.0統計軟件進行統計學分析，實驗重復3次，計量資料以±s表示，多樣本比較采用單因素方差分析，兩樣本比較采用SNK-q檢驗。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 各組大鼠血清脂肪酶、淀粉酶、TNF-α、IL-6含量比較 各組間總體比較，血清脂肪酶、淀粉酶、TNF-α、IL-6含量差異均有統計學意義（P＜0.01）。進一步比較顯示，與對照組比較，模型組、大黃素高、低劑量組大鼠血清中脂肪酶、淀粉酶、TNF-α、IL-6含量升高，差異有統計學意義（P＜0.05）；與模型組比較，大黃素高、低劑量組脂肪酶、淀粉酶、TNF-α、IL-6含量均降低，差異有統計學意義（P＜0.05）；與大黃素高劑量組比較，大黃素低劑量組脂肪酶、淀粉酶、TNF-α、IL-6含量升高，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表2。

表2 各組大鼠血清脂肪酶、淀粉酶、TNF-α、IL-6含量比較（±s，n=3）Tab.2 Comparison of serum lipase，amylase，TNF-α，IL-6 content in each group（±s，n=3）

表2 各組大鼠血清脂肪酶、淀粉酶、TNF-α、IL-6含量比較（±s，n=3）Tab.2 Comparison of serum lipase，amylase，TNF-α，IL-6 content in each group（±s，n=3）

注：與對照組比較，*P＜0.05；與模型組比較，#P＜0.05；與大黃素高劑量組比較，△P＜0.05Note:Compared with control group，*P＜0.05;compared with model group，#P＜0.05;compared withe modin high-dose group，△P＜0.05

組別 脂肪酶（U·mL-1） 淀粉酶（U·mL-1） TNF-α（ng·L-1） IL-6（ng·L-1）對照組 29.41±4.26 105.52±8.67 30.95±4.68 49.84±4.87模型組 278.36±11.41* 588.97±15.26* 85.65±8.65* 120.36±10.62*大黃素高劑量組 65.11±7.69*# 184.26±13.52*# 55.48±6.36*# 76.95±7.21*#大黃素低劑量組 103.67±9.54*#△ 257.89±14.66*#△ 64.73±5.88*#△ 85.44±8.97*#△F值 72.61 58.42 92.91 86.94 P 值 ＜0.01 ＜0.01 ＜0.01 ＜0.01

2.2 各組大鼠肺組織W/D及PaO2、PaCO2、OI比較 各組間總體比較，W/D、PaO2、PaCO2、OI差異均有統計學意義（P＜0.01）。進一步比較顯示，與對照組比較，模型組、大黃素高、低劑量組W/D和PaCO2顯著升高，PaO2和OI顯著降低，差異有統計學意義（P＜0.05）；與模型組比較，大黃素高、低劑量組W/D和PaCO2均降低，PaO2和OI均升高，差異有統計學意義（P＜0.05）；與大黃素高劑量組比較，大黃素低劑量組W/D和PaCO2升高，PaO2和OI降低，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表3。

表3 各組大鼠肺組織W/D及PaO2、PaCO2、OI比較（±s，n=20）Tab.3 Comparison of W/D，PaO2，PaCO2，OI of lung tissues in each group（±s，n=20）

表3 各組大鼠肺組織W/D及PaO2、PaCO2、OI比較（±s，n=20）Tab.3 Comparison of W/D，PaO2，PaCO2，OI of lung tissues in each group（±s，n=20）

注：1mmHg=0.133kPa。與對照組比較，*P＜0.05；與模型組比較，#P＜0.05；與大黃素高劑量組比較，△P＜0.05Note:1mmHg=0.133kPa.Compared with control group，*P＜0.05;compared with model group，#P＜0.05;compared with emodin high-dose group，△P＜0.05

組別 W/D PaO2（mmHg） PaCO2（mmHg） OI對照組 4.12±0.44 92.26±7.11 35.28±2.88 439.33±16.51模型組 6.23±0.38* 52.95±3.65* 60.84±4.95* 252.14±10.36*大黃素高劑量組 4.86±0.39*# 85.62±5.84*# 40.88±2.54*# 407.71±9.17*#大黃素低劑量組 5.26±0.25*#△ 70.48±4.17*#△ 51.61±3.77*#△ 335.62±10.65*#△F值 13.41 24.44 16.95 28.94 P 值 ＜0.01 ＜0.01 ＜0.01 ＜0.01

2.3 各組大鼠肺組織病理學變化比較 HE染色結果顯示，對照組大鼠肺組織結構正常，肺泡完好，無增厚和炎癥細胞浸潤；與對照組比較，模型組大鼠肺泡壁明顯增厚，肺間質充血、水腫，并有大量炎癥細胞浸潤；與模型組比較，大黃素高、低劑量組大鼠肺組織肺損傷改善，肺泡壁增厚和肺組織充血現象減輕，炎癥細胞浸潤減少。見圖1。

圖1 各組大鼠肺組織病理變化（HE染色，200×）Fig.1 Pathological changes of lung tissues in each group （HE staining，200×）

2.4 各組大鼠肺組織SOD活力、MDA含量比較 各組間總體比較，大鼠肺組織SOD活力、MDA含量差異均有統計學意義（P＜0.01）。進一步比較顯示，與對照組比較，模型組、大黃素高、低劑量組大鼠肺組織SOD活力降低，MDA含量升高，差異有統計學意義（P＜0.05）；與模型組比較，大黃素高、低劑量組SOD活力升高，MDA含量降低，差異有統計學意義（P＜0.05）；與大黃素高劑量組比較，大黃素低劑量組SOD活力降低，MDA含量升高，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表4。

表4 各組大鼠肺組織SOD活力、MDA含量比較（±s，n=3）Tab.4 Comparison of SOD activity and MDA content in lung tissues in each group（±s，n=3）

表4 各組大鼠肺組織SOD活力、MDA含量比較（±s，n=3）Tab.4 Comparison of SOD activity and MDA content in lung tissues in each group（±s，n=3）

注：與對照組比較，*P＜0.05；與模型組比較，#P＜0.05；與大黃素高劑量組比較，△P＜0.05Note:Compared with control group，*P＜0.05;compared with model group，#P＜0.05;compared with emodin high-dose group，△P＜0.05

組別 SOD（U·mg-1） MDA（μmol·g-1）對照組 36.28±4.27 132.95±13.24模型組 20.22±3.44* 201.28±15.38*大黃素高劑量組 29.96±3.79*# 152.69±14.87*#大黃素低劑量組 25.80±2.81*#△ 180.67±15.65*#△F值 55.39 82.64 P 值 ＜0.01 ＜0.01

2.5 各組大鼠肺組織Bcl-2、Bax mRNA及蛋白表達水平比較 各組間總體比較，肺組織Bcl-2、Bax mRNA和蛋白表達水平差異均有統計學意義（P＜0.01）。進一步比較顯示，與對照組比較，模型組、大黃素高、低劑量組大鼠肺組織Bcl-2 mRNA和蛋白表達水平均降低，Bax mRNA和蛋白表達水平均升高，差異有統計學意義（P＜0.05）；與模型組比較，大黃素高、低劑量組Bcl-2 mRNA和蛋白表達水平升高，Bax mRNA和蛋白表達水平降低，差異有統計學意義（P＜0.05）；與大黃素高劑量組比較，大黃素低劑量組Bcl-2 mRNA和蛋白表達水平降低，Bax mRNA和蛋白表達水平升高，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表5、圖2。

表5 各組大鼠肺組織Bcl-2、Bax mRNA表達水平比較（±s，n=3）Tab.5 Comparison of Bcl-2 and Bax mRNA expression levels in lung tissues in each group （±s，n=3）

表5 各組大鼠肺組織Bcl-2、Bax mRNA表達水平比較（±s，n=3）Tab.5 Comparison of Bcl-2 and Bax mRNA expression levels in lung tissues in each group （±s，n=3）

注：與對照組比較，*P＜0.05；與模型組比較，#P＜0.05；與大黃素高劑量組比較，△P＜0.05Note:Compared with control group，*P＜0.05;compared with model group，#P＜0.05;compared with emodin high-dose group，△P＜0.05

組別 Bcl-2 mRNA Bax mRNA對照組 1.12±0.09 0.35±0.02模型組 0.26±0.02* 1.06±0.08*大黃素高劑量組 0.63±0.05*# 0.52±0.06*#大黃素低劑量組 0.44±0.03*#△ 0.81±0.07*#△F值 15.36 21.84 P 值 ＜0.01 ＜0.01

圖2 各組大鼠肺組織Bcl-2、Bax蛋白表達水平比較Fig.2 Comparison of Bcl-2 and Bax protein expression levels in lung tissues in each group

2.6 各組大鼠肺組織p38 MAPK、ERK1/2、JNK蛋白磷酸化水平比較 各組間總體比較，肺組織蛋白pp38MAPK/p38MAPK、p-ERK1/2/ERK1/2、p-JNK/JNK比值差異有統計學意義（P＜0.01）。進一步比較顯示，與對照組比較，模型組、大黃素高、低劑量組大鼠肺組織蛋白p-p38 MAPK/p38 MAPK、p-ERK1/2/ERK1/2、p-JNK/JNK比值升高，差異均有統計學意義（P＜0.05）；與模型組比較，大黃素高、低劑量組p-p38 MAPK/p38 MAPK、p-ERK1/2/ERK1/2、p-JNK/JNK比值降低，差異均有統計學意義（P＜0.05）；與大黃素高劑量組比較，大黃素低劑量組p-p38 MAPK/p38 MAPK、p-ERK1/2/ERK1/2、p-JNK/JNK比值升高，差異有統計學意義（P＜0.05）。見圖3。

圖3 各組大鼠肺組織p38 MAPK、ERK1/2、JNK蛋白磷酸化水平比較Fig.3 Comparison of p38 MAPK，ERK1/2 and JNK protein phosphorylation levels in lung tissues in each group

3 討論

AP是多種誘因導致胰酶在胰腺腺泡內激活所致的胰腺及全身炎癥反應，臨床表現為突發左上腹劇痛、惡心嘔吐、尿和血清淀粉酶增高，其發病率逐年升高，部分患者病情較重，可發展為SAP，病死率可達15%[10]。SAP病情兇險，變化較快，引發的炎癥級聯反應可波及多個組織器官，其中肺臟是SAP發病過程中最易受到影響的重要臟器，SAP合并肺損傷是SAP患者死亡的主要原因[11]。研究表明，MAPK是典型的促炎信號通路，與機體的炎癥反應和氧化應激損傷密切相關[12]。Wan等[13]研究證明，抑制MAPK信號通路可減輕胰腺組織損傷，改善腸道菌群失調，抑制炎癥因子釋放。大黃素是中藥大黃的主要有效成分，研究顯示大黃素治療炎性疾病具有很好的效果，可降低AP大鼠血清TNF-α、IL-6、IL-1β的水平，增強腹膜巨噬細胞的吞噬作用，減輕胰腺損害[14]。盡管已知大黃素對AP具有治療作用，但其對SAP合并肺損傷是否具有改善作用尚不清楚，因此本研究建立了SAP大鼠肺損傷模型，以MAPK信號通路為切入點，研究大黃素對SAP大鼠肺損傷的影響及其作用機制。

肺組織是SAP發病過程中最易受累的器官，SAP患者肺損傷主要表現為PaO2和PaO2/FiO2降低，血清脂肪酶、淀粉酶和炎癥因子TNF-α、IL-6等含量升高，肺組織結構模糊，并伴有水腫和炎癥浸潤等現象[15-16]。本研究結果顯示，與模型組比較，大黃素可顯著降低大鼠肺組織W/D和PaCO2，升高PaO2和OI，作用呈劑量依賴性。HE染色顯示，模型組大鼠肺泡壁明顯增厚，肺間質充血、水腫，并有大量炎癥細胞浸潤，大黃素可顯著改善大鼠肺組織肺損傷，減輕肺泡壁增厚和肺組織充血現象，減少炎癥細胞浸潤。ELISA結果顯示，模型組血清脂肪酶、淀粉酶、TNF-α、IL-6含量均高于對照組，而大黃素可顯著降低血清脂肪酶、淀粉酶、TNF-α、IL-6含量，其中大黃素低劑量組作用弱于高劑量組，差異有統計學意義。

氧化應激是肺損傷的基本病理過程，伴隨大量的炎癥因子釋放和活性氧產生[17]。Tian等[18]研究顯示，大黃素對博來霉素誘導的大鼠肺損傷具有保護作用，能夠增加SOD活力，降低MDA含量，抵抗氧化應激。與上述研究結果一致，本研究也發現大黃素可提高SAP大鼠肺組織SOD活力，減少MDA含量，表明大黃素可顯著抑制氧化應激反應，對SAP大鼠肺損傷具有保護作用。

Takeyama[19]認為，細胞凋亡在SAP相關發病和死亡中起重要作用，控制細胞凋亡可能是改善SAP臨床療效的有效策略。本研究發現大黃素可顯著提高大鼠肺組織Bcl-2 mRNA和蛋白表達水平，降低Bax mRNA和蛋白表達水平，其中大黃素低劑量組作用弱于高劑量組，表明大黃素可調控并顯著減輕SAP導致的肺組織細胞凋亡，而且作用呈現劑量依賴性。

目前，雖然SAP合并肺損傷的發病機制尚未完全闡明，但已有多項研究證明，MAPK信號通路在各種原因導致的肺損傷中發揮重要調控作用[20-21]。唐興娟等[22]研究顯示，丙泊酚通過抑制MAPK/ERK信號通路對SAP大鼠模型肺損傷具有保護作用，并能夠降低炎癥因子水平，減輕大鼠肺組織病變。本研究結果顯示，與對照組比較，模型組肺組織p38 MAPK、ERK1/2、JNK蛋白磷酸化水平增加，而大黃素可顯著降低p38 MAPK、ERK1/2、JNK蛋白磷酸化水平，其中大黃素低劑量組作用弱于高劑量組，表明大黃素可能通過抑制MAPK信號通路關鍵蛋白的活化而起到對SAP大鼠肺損傷的保護作用，而且作用呈現劑量依賴性。

綜上所述，大黃素對SAP大鼠肺損傷具有保護作用，能夠改善大鼠肺組織病理變化，抑制炎癥反應和氧化應激損傷，其作用機制與抑制MAPK信號通路的活化有關。然而，抑制MAPK信號通路僅是大黃素發揮保護作用的機制之一，后續仍需大量的體內和體外實驗對其作用機制加以深入探討。