同步放化療治療中晚期直腸癌療效及對腫瘤細胞Bax、Ki-67表達的影響

徐 軍，白 劼

(1.陜西省核工業二一五醫院腫瘤科,陜西 咸陽 712000；2.榆林市星元醫院痔瘺醫院一病區,陜西 榆林 719000)

直腸癌為臨床上最常見的消化道惡性腫瘤之一，隨著飲食結構的改變與人口的老齡化，直腸癌的發病率和病死率呈上升趨勢，同時呈年輕化發展[1-2]。很多患者在就診時已處于中晚期，單純行根治手術的效果比較差，或者已失去手術治療時機，也容易出現術后轉移與復發[3]。細胞凋亡下降與Ki-67表達升高是惡性腫瘤重要的生物學特點，也是引起腫瘤轉移與復發的重要原因[4]。隨著醫學技術的發展，同步放化療得到了廣泛應用，其能消滅亞臨床病灶，延長患者的生存時間。但是放化療的應用效果與患者自身體質、藥物耐受程度、機體免疫水平等存在相關性，也容易導致患者出現毒副反應[5-6]。特別是放射抵抗是影響直腸癌患者放療療效的重要原因，改變照射方法與提高照射劑量也很難杜絕腫瘤復發情況[7-8]。基于此，本文具體探討了同步放化療對中晚期直腸癌患者腫瘤細胞凋亡與Ki-67表達的影響，以明確其治療機制。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2015年7月至2020年8月選擇診治的中晚期直腸癌患者60例作為研究對象，病例納入標準：符合局部進展期直腸癌的診斷標準；具有放化療指征，無手術指征；年齡18～75歲；臨床分期為Ⅱb-Ⅲ期；初治患者；Karnofsky評分大于70分；患者或家屬均知情同意且經醫院倫理委員會批準；心肺功能良好，無放化療禁忌證。排除標準：合并其他惡性腫瘤者；有其他重要器官器質性病變者；妊娠期或哺乳期女性患者；有精神疾病不能合作者；合并嚴重感染者；存在藥物過敏史、易過敏體質者；存在遺傳性疾病史、自身免疫缺陷性疾病。根據隨機信封抽簽原則把患者分為研究組(n=30)與對照組(n=30)，兩組患者的一般資料對比差異均無統計學意義(均P>0.05)，有可比性，見表1。

表1 兩組患者一般資料對比

1.2 治療方法 對照組：給予化療治療，口服卡培他濱片(國藥準字H20073023)825 mg/m2，2次/d，14 d為一周期，治療觀察6周期。研究組：在對照組治療的基礎上給予同步放療治療，采用三維適形放療，單次劑量1.8～2.0 Gy，總劑量45～50 Gy，放療治療結束后繼續口服卡培他濱，治療觀察6周期。在放療中，患者取仰臥位，CT定位。臨床靶區(CTV)主要包括瘤床、骶前軟組織等，下界為閉孔下緣，上界為L5椎體下緣。計劃靶區(PTV)在CTV基礎上擴大1～1.5 cm。

1.3 觀察指標 ①按照《實體瘤療效評價標準》進行評定，完全緩解：腫瘤病灶全部消失；部分緩解：病灶的最長徑之和顯示縮小大于等于30%；疾病穩定：病灶變化情況處于完全緩解和疾病進展之間；疾病進展：病灶最長徑之和增加20%或出現新病灶。(完全緩解+部分緩解)/組內例數×100.0%=總有效率。②記錄兩組在治療過程出現的急性血液毒性反應情況，包括血小板減少、粒細胞減少、肝腎功能異常。③在治療前后采用腸鏡活檢方法獲得患者的病理組織，采用免疫組化法檢測Bax與Ki-67表達陽性率；Bax與Ki-67單克隆抗體都購自武漢博士德公司，將病理組織制成石蠟切片后進行脫蠟水化，使用雙氧水滅活內源性過氧化物酶，然后使用高溫進行抗原修復，冷卻后加入Bax與Ki-67單克隆抗體低溫孵育過夜(孵育比例為1∶1000)，然后使用生物素標記的二抗室溫孵育20 min，DAB染色后進行蘇木素復染，脫水進行透明化處理，封片后進行鏡檢。④所有患者隨訪至2021年1月，記錄患者的中位生存時間、總生存時間。

2 結 果

2.1 兩組總有效率對比 治療后研究組的總有效率高于對照組(90.0%與66.7%，χ2=4.812，P<0.05)，見表2。

表2 兩組治療總有效率對比 [例(%)]

2.2 兩組血液毒性反應情況對比 兩組治療期間的血小板減少、粒細胞減少、肝腎功能異常等血液毒性反應對比均無統計學意義(均P>0.05)。見表3。

表3 兩組血液毒性反應情況對比(例)

2.3 兩組Bax與Ki-67表達陽性率變化對比 兩組治療后的Bax表達陽性率高于治療前(P<0.05)，Ki-67表達陽性率低于治療前(P<0.05);研究組與對照組對比差異均有統計學意義(均P<0.05)。見表4。

表4 兩組Bax與Ki-67表達陽性率對比[例(%)]

2.4 兩組中位生存時間與總生存時間對比 隨訪到2021年1月，研究組的中位生存時間與總生存時間均都高于對照組(均P<0.05)，見表5。

表5 兩組中位生存時間與總生存時間對比(月)

3 討 論

直腸癌是最常見的消化道腫瘤之一，發病率與病死率一直居高不下。同時由于各種因素的影響，多數直腸癌患者確診時就處于局部晚期，失去了直接手術根治的指征[9]。臨床應用的治療局部晚期直腸癌的方式主要包括放療、化學、分子靶向治療等，化療治療能提高患者的生存率，但是單純化療很難持續改善患者的預后[10]。有研究顯示早期直腸癌患者經單純化療后5年生存率可達到70%～90%，但局部晚期直腸癌患者經化療后5年生存率不足60%，局部復發和遠處轉移是治療失敗的主要原因[11-12]。三維適形放療具有很好的放療精確性，聯合使用放療與化療治療方式可顯著改善患者的預后[13]。本組治療后研究組的總有效率高于對照組；兩組治療期間的血小板減少、粒細胞減少、肝腎功能異常等血液毒性反應對比差異無統計學意義。從機制上分析，放療可以殺滅腫瘤周圍和遠處的亞臨床轉移灶，還可同步化細胞周期，使放療更具敏感性，還可抑制再修復放療殺傷細胞，且不會增加毒副反應的發生[14]。

腫瘤細胞的增殖、凋亡與腫瘤的關系一直是臨床研究的重點，Ki-67的高表達可參與腫瘤的發生、轉移、浸潤，為反映腫瘤細胞相關增殖速率的重要指標[15-16]。當細胞受到死亡信號刺激，促凋亡蛋白Bax可引起細胞線粒體膜的通透性增加，釋放出相關物質，從而導致細胞凋亡[17]。Bax高表達可增加惡性腫瘤對化療藥物和放療的敏感性，放療也可以誘發凋亡的發生，導致Bax蛋白表達水平增加[18-19]。而減少惡性腫瘤組織內Ki-67表達，也能控制腫瘤細胞凋亡[20]。同時Ki-67、Bax在乳腺癌、胃癌、食管癌、白血病、肺癌等人類多種惡性腫瘤組織中都呈現表達異常情況，而這種表達異常情況是由于mRNA 表達減少或穩定性下降有關，揭示Ki-67、Bax異常很可能參與了這些惡性腫瘤的發生發展。本研究顯示兩組治療后的Bax表達陽性率高于治療前，Ki-67表達陽性率低于治療前，研究組與對照組對比差異有統計學意義，表明同步放化療在直腸癌患者的應用能促進腫瘤細胞凋亡，抑制Ki-67表達。本研究隨訪到2021年1月，研究組的中位生存時間與總生存時間都多于對照組，也表明放化療在直腸癌患者的應用能改善患者的長期預后。不過Ki-67、Bax在人類不同類型組織細胞中的表達具有選擇性，而這種差異性表達決定了其發揮調節細胞生長、凋亡以及轉移的不同的生理特性和功能，同樣在不同類型腫瘤組織中的表達情況也是存在差異的，這種差異也決定了Ki-67、Bax在腫瘤的發生和進展過程中發揮著迥然不同的作用。本研究也存在一定的不足，沒有設置多個組別，沒有進行其他病理學指標分析，將在后續研究中進行探討。

綜上所述，放化療對直腸癌患者的應用能促進腫瘤細胞凋亡，抑制Ki-67表達，不會增加血液毒性反應的發生，能促進提高治療效果與延長生存時間。