HER2 與MET 在胃癌中的表達情況及對惡性程度的評估作用

古彩紅，潘勇權，陳思琦，謝曉丹

（廣東省惠州市第三人民醫院病理科 廣東 惠州 516002）

胃癌為臨床常見的一種惡性腫瘤，為胃組織中上皮、腺體等結構細胞受到內外界因素作用進而發生的惡性轉變[1]。胃癌預后較差，5 年生存率在5.02%～20.13%，中位生存時間多低于1 年。目前臨床對胃癌主要采取手術結合放化療的綜合方式治療，但胃癌對放化療敏感性較低，對化療敏感性低為預后較差的主要原因[2]。故探討胃癌發病機制，尋找可診斷疾病且判斷其預后的生物標志物十分重要，為目前胃癌研究的重點。本研究通過檢測胃癌患者中MET、HER2 的表達，進而探討其對胃癌惡性程度的評估價值。

1.資料與方法

1.1 一般資料

抽取2014 年4 月—2019 年5 月我院收治的胃癌患者標本85 例，男、女分別為51、34 例，年齡51 ～75 歲，平均（63.05±4.78）歲。所有患者均為初治者，TNM 分期Ⅰ～Ⅲ期，所有標本均由甲醛溶液（福爾馬林）固定后石蠟包埋，制成蠟塊后保存。

1.2 方法

應用EnViSion 免疫組化二步法對胃癌標本中MET、HER2 進行檢測，具體染色方法見下：（1）脫蠟及水化，取每張4μm 厚的腫瘤芯片置于65℃環境中5h，先后加入至二甲苯Ⅰ、Ⅱ溶液內浸泡15 min，之后分別放入乙醇（C2H5OH）Ⅰ、Ⅱ中5 min，分別應用95%、85%、70%乙醇溶液浸泡5 min，最后于蒸餾水內浸泡5 min。（2）對0.01 M 檸檬酸鹽緩沖液進行加熱，置入標本后繼續加熱10 ～15 min，冷卻后應用蒸餾水及PBS 緩沖液沖洗3 遍。（3）免疫組化染色，應用蒸餾水配置3%HA，室溫內封閉15 min，分別應用蒸餾水、PBS 各洗2 次，以山羊血清進行密封，置于室溫內1 h 后取出，PBS 沖洗。在標本上滴加免疫組化MaxVision 二抗試劑，300J1/片，室溫靜置15 min，應用PBS 沖洗3 遍，之后置于DAB 中2 ～8 min，于鏡下觀察。

1.3 觀察指標

比較MET、HER2 陽性表達情況，分析MET、HER2 表達相關因素的關系。陽性判定標準[3]：MET、HER2 的陽性率分為1+、2+、3+。＞10%的浸潤細胞呈微弱且不完整染色為1+，＞10%浸潤細胞呈微弱至中等強度且不完整染色為2+，＞10%浸潤細胞呈較強且完整的染色為3+。

1.4 統計學方法

采用SPSS 20.0 統計軟件進行數據處理。正態分布且方差齊的計量資料采用均數±標準差（± s）表示，組間比較采用t 檢驗，計數資料用頻數和百分比（%）表示，組間比較采用χ2檢驗。P ＜0.05 為差異有統計學意義。

2.結果

2.1 MET、HER2 陽性表達情況分析

MET 陽性表達率為31.76%（27/85），HER2 陽性表達率為42.35%（36/85），差異有統計學意義（P ＜0.05），見表1。

表1 MET、HER2 陽性表達情況分析

2.2 MET、HER2 表達與相關因素的關系分析

MET 表達與脈管侵犯、腫瘤分化程度、腫瘤臨床分期有關（P ＜0.05）；HER2 表達與腫瘤分化程度、腫瘤直徑相關（P ＜0.05），見表2。

表2 MET、HER2 表達與相關因素的關系分析

2.3 隨訪結果分析

對患者行12 個月的隨訪，發現死亡23 例，死亡率為27.06%，其中19例（82.61%）患者呈MET、HER2雙向高表達。

3.討論

HER2 為表皮生長因子受體中的一員，位于人染色體17q21，為一種編碼相對分子質量185kD 的跨膜蛋白，具有絡氨酸激酶活性，可參與信號轉導。通常HER2 只會在胎兒時期表達，但成年后人體極少數組織內可能會有低表達。通過檢測可發現多種惡性腫瘤細胞內有HER2 蛋白過表達或基因擴增，包括胃癌、肺癌、乳腺癌、結腸癌等惡性腫瘤。正常情況下HER2 不會被激活，在某種內外因素作用下可能會被激活，由于其表達或結構調控失常，進而出現腫瘤轉化活性因素[4]。有研究表示，從胃癌標本內檢出過表達的HER2 基因，認為其陽性表達為預測腫瘤預后的獨立因素[5]。HER2 可參與多種腫瘤發生及發展，并發揮重要作用，其過表達或基因擴增與患者臨床預后有密切關系，可對化療及內分泌治療的臨床療效進行預測。本次研究結果顯示，HER2 表達與胃癌組織分化程度、腫瘤直徑相關，提示HER2 在胃癌組織中表達具有選擇性，HER2 陽性的胃癌可能存在較高惡性程度。分析原因可能為HER2 基因為一類原癌基因，其擴增水平提高可增加HER2 蛋白在細胞膜的表達，進而增加細胞惡性程度[6]。通過對胃癌組織內HER2 表達進行檢測可為臨床分子靶向治療提供重要指導意見。

腫瘤標志物為早期篩查腫瘤、判斷惡性程度及預后的有效之一，目前被納入臨床研究的眾多分子標志物中，MET 與多種癌基因產物及調節蛋白相關，并參與了細胞信號轉導、細胞骨架重構等多種病理生理過程中，可對上皮及成纖維細胞分離、轉移進程進行誘導，對促進腫瘤細胞增殖能力有重要作用[7]。MET 作為肝細胞生長因子（HGF/SF）的受體，主要存在上皮細胞表面，同樣具有絡氨酸激酶活性[8]。正常狀態下HGF/MET 信號通路處于平衡狀態，并受嚴格調控，可引發MET 增強激活，對腫瘤增生、遷移、侵襲等過程進行激活。有研究表示，激活HGF/MET 信號通路可促進腫瘤血管、腎上腺皮質癌生長，促使腫瘤細胞生存并產生化療抵抗[9]。本次研究結果顯示，MET 在胃癌組織中陽性表達率為31.76%，且與脈管侵犯、腫瘤分化程度、TNM 分期相關，與葉明等[10]研究結果基本一致。提示MET 可作為胃癌侵襲、惡性程度的潛在生物學指標，通過對其分子機制進行探討，可為胃癌分子靶向治療提供有力依據。本次研究通過對患者進行隨訪，發現19 例死亡患者存在MET、HER2 雙向高表達，提示MET、HER2 過表達與患者預后有一定關系。

綜上所述，MET、HER2 高表達與胃癌病死率有一定關系，MET 與脈管侵犯、腫瘤分化程度、TNM 分期相關，HER2 表達與腫瘤分化程度、腫瘤直徑相關，可為臨床分子靶向治療提供重要生物學資料。